長鏈非編碼RNA MALAT1影響口腔鱗狀細胞癌侵襲的實驗研究*

劉速周旋王曉非岳愷段遠勝何清華王佳鑫司海山王旭東

·基礎研究·

長鏈非編碼RNA MALAT1影響口腔鱗狀細胞癌侵襲的實驗研究*

劉速①周旋①王曉非②岳愷①段遠勝①何清華①王佳鑫①司海山①王旭東①

目的：探討肺腺癌轉移相關轉錄因子1（metastasis-associated lungadenocarcinoma transcript 1，MALAT1）對口腔鱗狀細胞癌侵襲能力的影響。方法：應用RT-PCR方法檢測MALAT1在口腔鱗狀細胞癌組織標本、正?？谇火つそM織標本以及口腔鱗癌細胞系中的表達；利用小干擾RNA（siRNA）敲低MALAT1在人舌鱗狀細胞癌細胞Tscca中的表達；MTT法檢測細胞的增殖能力變化；劃痕實驗、Transwell實驗檢測腫瘤細胞遷移、侵襲能力的變化；蛋白質印跡法檢測腫瘤細胞遷移、侵襲及上皮間質轉化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）等相關蛋白的表達變化；免疫熒光法檢測細胞EMT相關蛋白表達變化；建立Tscca裸鼠皮下荷瘤模型，免疫組織化學染色法檢測細胞增殖、侵襲相關蛋白表達。結果：MALAT1在口腔鱗癌組織中的表達明顯高于正常組織。抑制MALAT1表達后細胞增殖率下降，細胞系劃痕閉合減慢，通過Transwell小室聚碳酸酯膜的細胞數減少，與對照組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；基質金屬蛋白酶-2、-9（MMP-2、MMP-9）、神經鈣黏素（N-cadherin）蛋白表達水平明顯下調，鈣黏著蛋白（E-cadherin）表達水平上調。免疫熒光顯示，細胞神經鈣黏素熒光強度明顯減弱，鈣黏著蛋白熒光強度顯著增強。體內實驗結果顯示，MALAT1 siRNA治療組裸鼠皮下荷瘤體積小于空白對照組及無義序列組（F=18.664，P＜0.001）；免疫組織化學染色結果示，MALAT1 siRNA治療組中增殖核抗原（PCNA）、MMP-2、MMP-9表達減少。結論：MALAT1在口腔鱗癌組織中過表達，敲低人舌鱗癌細胞中MALAT1的表達可抑制舌鱗癌細胞的遷移、侵襲能力，MALAT1可能通過調控EMT促進口腔鱗癌的增殖和侵襲過程。

肺腺癌轉移相關轉錄因子1 口腔鱗狀細胞癌 腫瘤侵襲 EMT

頭頸部鱗狀細胞癌（head and neck squamous cell carcinoma，HNSCC）是最常見的惡性腫瘤之一，每年有逾50萬例新發病例?？谇击[癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）是頭頸鱗癌最常見的類型，惡性程度高、易發生局部侵襲及頸部淋巴結轉移，且嚴重影響患者預后［1-2］。盡管近年來采用根治性手術聯合放療、新輔助化療以及靶向治療的綜合治療方式，但口腔鱗癌的5年生存率仍低于50%［3］。上皮間質轉化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）是腫瘤細胞獲得侵襲轉移能力的有效方式之一，包括口腔鱗癌在內的上皮來源的惡性腫瘤浸潤及轉移過程中重要的生物學過程［4］。肺腺癌轉移相關轉錄因子1（metastasisassociatedlungadenocarcinomatranscript1，MALAT1）為最早發現的長鏈非編碼RNA之一。研究表明

MALAT1在結腸癌、非小細胞肺癌、膠質瘤、骨髓瘤等多種惡性腫瘤細胞的增殖、侵襲和遷移中發揮重要作用［5-6］，但MALAT1在調控口腔鱗癌侵襲轉移過程中的作用尚不明確。本研究通過抑制MALAT1在口腔鱗癌細胞系中的表達，探討MALAT1影響人舌鱗狀細胞癌侵襲能力的作用效果。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1組織標本收集天津醫科大學腫瘤醫院自2012年4月至2013年10月間外科手術切除的口腔鱗癌標本48例。其中男性34例，女性14例；年齡34～79歲，中位年齡55歲。病例包括舌癌15例，牙齦癌14例，口底癌11例，頰癌8例。收集天津醫科大學口腔醫院正?？谇火つそM織標本9例作為對照。所有組織標本去除出血、壞死及電灼組織，用生理鹽水洗去血污，置于凍存管于-80℃條件下保存。所有程序均由天津醫科大學醫學倫理委員會審查批準。

1.1.2細胞培養和分組人口腔鱗狀細胞癌細胞株Tscca、Hep-2（中國醫學科學院基礎醫學研究所）培養于含10%胎牛血清（美國Hyclone公司）的MEM/ EBSS（美國Hyclone公司）完全培養基內，平衡鹽溶液含2.00 mM-谷氨酰胺基本培養基。人口腔鱗狀細胞癌細胞株Tca8113、Tca8113P160（中國醫學科學院基礎醫學研究所）、Tb3.1（上海交通大學第九人民醫院）培養于含10%胎牛血清的RPMI 1640（美國Hyclone公司）完全培養基內，細胞均置于37℃、5%CO2細胞培養箱內培養，0.25%胰酶-EDTA消化傳代。

1.2方法

1.2.1反轉錄RT-PCR方法檢測MALAT1在組織及細胞中的表達用Trizol（美國Invitrogen公司）提取總RNA；用M-MLT反轉錄酶反轉錄，反應體系為20 μL，參照反轉錄試劑盒說明書加樣并進行反應，產物cDNA置于-20℃保存。引物序列（美國Invitrogen公司）：內參照GAPDH上游：5'-GGTGAAGGTCGGA GTCAACGG-3'；GAPDH下游：5'-GAGGTCAATGAAG GGGTCATTG-3'。MALAT1上游：5'-GACGGAGGTTG AGATGAAGC-3'；下游：5'-ATTCGGGGCTCTGTAGT CCT-3'。PCR條件：MALAT1：95℃5 min，95℃10 s，60℃45 s，共進行40個循環，Opticon 3軟件計算ΔC（t）值（2-ΔΔCT表示目的基因表達）。

1.2.2MALAT1 siRNA轉染將處于對數生長期的Tscca細胞常規消化后接種于6孔細胞培養板中，12～24 h后（融合度60%～80%），棄完全培養基，無血清MEM清洗2次，放培養箱中饑餓培養。用無RNase去離子水溶解MALAT1 siRNA（上海吉瑪公司）至最終濃度20 μmol/L。實驗共分為3組：1）空白對照組；2）無義序列組：7.5 μL脂質體+7.5 μL無意義對照序列RNA（正義序列：5'-UUCUUCGAACGUG UCACGUTT-3'；反義序列：5'-ACGUGACACGUUCGG AGAATT-3'）+250 μL無血清MEM；3）MALAT1 siRNA組：7.5 μL脂質體+7.5 μL MALAT1-siRNA（正義序列：5'-GAGGUGUAAAGGGAUUUAUTT-3'；反義序列：5'-AUAAAUCCCUUUACACCUCTTT-3'）+250 μL無血清MEM。將轉染液加入上述6孔板中，混勻，繼續培養4～6 h后，更換為含10%FBS的完全培養基。

1.2.3MTT法檢測細胞增殖活性取對數生長期Tscca細胞以3 000個細胞/孔接種于96孔板，待細胞貼壁后，常規轉染，每組設4個復孔，分別于接種后0、1、2、3、4、5天進行MTT檢測，每孔中加入濃度為5 mg/mL MTT溶液20 μL，37℃條件下培養4 h，棄上清，每孔加入200 μL二甲基亞砜（DMSO）200 μL，

振蕩10 min，酶標儀檢測570 nm波長測各孔吸光度值，取每組4孔的均值。按照公式計算各組細胞生存率=（處理組細胞吸光度÷空白對照組細胞吸光度）× 100%，并繪制生長曲線。

1.2.4劃痕實驗3組細胞接種于6孔板，常規轉染MALAT1 siRNA后，用200 μL槍頭在6孔板中間劃一豎線，PBS洗滌細胞3次，加無血清培養基，0、48 h分別用倒置顯微鏡觀察照相并用Image pro plus圖像分析軟件測量劃痕相對寬度。

1.2.5Transwell實驗檢測細胞侵襲能力將Matrigel（美國BD公司）與MEM按1∶2稀釋后，取50 μL加入Transwell上室（美國BD公司），37℃30 min使其聚合成凝膠。在下室中加入含血清培養液500 μL。待檢細胞用無血清培養基200 μL制成單細胞懸液，上室中加入3×104個細胞，48 h后棄上室液體，多聚甲醛固定3 min，結晶紫染色5 min，倒置顯微鏡下觀察。隨機取3個視野，計數每個視野內的穿膜的細胞數。

1.2.6蛋白質印跡法檢測相關蛋白的表達轉染48 h后提取總蛋白，測定蛋白濃度，SDS-聚丙烯酰胺凝膠（SDS-PAGE）電泳，冰浴下80 V轉膜60 min。37℃封閉1 h，剪膜分別加入MMP-2/9，GADPH（美國Santa Cruz公司），E-cadherin、N-cadherin（美國Abcam公司）一抗（1∶1 000）4℃孵育過夜，復溫1 h，相應加入辣根酶標記山羊抗小鼠二抗或抗兔二抗（1∶1 000）室溫孵育1 h。加發光液后用成像系統檢測蛋白條帶的表達。

1.2.7免疫熒光檢測相關蛋白表達變化將無菌載玻片放入6孔板，接種細胞并常規轉染，48 h后4%多聚甲醛固定，1%BSA封閉30 min，加入1∶200稀釋E/N-cadherin一抗（美國Santa Cruz公司），置濕盒中4℃過夜；次日棄一抗，避光滴加1∶100稀釋的FITC標記二抗（美國Santa Cruz公司），孵育30 min，DAPI染色孵育5 min，避光?？篃晒獯銣鐒┓馄?，共聚焦顯微鏡下觀察。

1.2.8動物實驗動物實驗過程由中國協和醫科大學血液研究所實驗動物保護和管理委員會審查批準。實驗所用動物為4～6周齡雌性BALB/c-nu（SPF）裸鼠，平均體質量15～18 g（購自中國醫學科學院實驗動物研究所）。飼養于中國協和醫科大學血液學研究所實驗動物中心。用1 mL無菌注射器抽取細胞濃度為5×107/mL的Tscca單細胞懸液200 μL分別接種于18只裸鼠左側腹股溝皮下。瘤細胞接種3周后，全部裸鼠皮下成瘤，將其按照隨機對照表分組，每組6只，分為3組?？瞻讓φ战M：在觀察期內不給與任何治療措施；PBS組：使用微量注射器將25 μL PBS緩慢多點瘤內注射；MALAT1-siRNA組：將總量30 ng的MALAT1-siRNA用微量注射器緩慢多點瘤內注射。從第1次給予治療措施開始，每3天進行1次治療并用游標卡尺測量一次腫瘤的長徑（a）及寬徑（b），連續觀察3周，繪制腫瘤生長曲線。最后一次腫瘤測量結束后，斷頸處死動物，手術取出裸鼠皮下荷瘤標本，福爾馬林固定，石蠟包埋，制備厚度8 μm的石蠟切片。腫瘤體積計算公式：V=（ab2）/2。

1.2.9免疫組織化學檢測方法及結果判定石蠟切片常規脫蠟水化，抗原修復，3%H2O2孵育，胎牛血清封閉，分別滴加PCNA、MMP-2、MMP-9一抗（北京中杉金橋公司）（1∶100稀釋）4℃孵育過夜；PBS充分洗滌，加入生物素標記的二抗（北京中杉金橋公司）（1∶100稀釋）37℃孵育1 h；洗去二抗，加入辣根過氧化物酶標記的三抗（1∶100稀釋）37℃孵育1 h；DAB顯色，蘇木素復染，梯度脫水，封片；倒置顯微鏡采集圖像。

蛋白表達水平根據Fromowitz評級法［7］對染色水平進行分級。選擇5個視野，每個視野中計數100個細胞，以5個視野的平均陽性細胞數計算陽性細胞率。0分：陽性細胞率≤5%；1分：陽性細胞率為6%～25%；2分：陽性細胞率為26%～50%；3分：陽性細胞率為51%～75%；4分：陽性細胞率為＞75%；根據染色強度（陰性、淺黃色、褐色、棕褐色）分為（0、1、2、3分）。兩項之和＜4分為陰性至弱陽性表達，≥4分為中強陽性表達。

1.3統計學方法

所有實驗數據均經SPSS 18.0統計軟件分析。計量資料以x±s表示，比較采用ANOVA單因素方差分析，進一步兩兩比較采用LSD-t檢驗。所有統計結果均以雙側P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1RT-PCR法檢測MALAT1在組織標本及口腔鱗癌細胞系中的表達

RT-PCR結果顯示，MALAT1在口腔鱗癌組織中的表達9.043±0.936明顯高于正常口腔黏膜組織3.432±0.747，差異有統計學意義（P=0.013 6，圖1A）。Tscca、Tb3.1、Tca8113細胞系在口腔鱗癌細胞系中MALAT1的表達相對較高，在Tscca細胞中表達最高（圖1B）。選取Tscca細胞系轉染MALAT1 siRNA后24 h，MALAT1表達開始明顯受到抑制，72 h抑制程度達到最大（圖1C）。

2.2MTT法檢測細胞增殖活性

Tscca細胞敲低MALAT1的表達后，細胞增殖活性明顯受到抑制。轉染MALAT1 siRNA 24 h后，細胞生長開始出現明顯抑制，相對存活率呈逐漸下降趨勢，與對照組和無義序列組比較差異有統計學意義（P＜0.05，圖2）。

圖1 RT-PCR法檢測MALAT1在組織標本及口腔鱗癌細胞系中的表達Figure 1Expression of MALAT1 in sample tissues and OSCC cell lines by real-time polymerase chain reaction assay

圖2 MTT法檢測轉染MALAT1 siRNA后Tscca細胞增殖活性變化Figure 2Methyl-thiazolyl-tetrazolium reduction assay indicating that cell proliferation is inhibited after down-regulation of MALAT1 expression in TSCCa cells

2.3劃痕實驗檢測細胞遷移能力

計算Tscca細胞系0、48 h劃痕間隙融合率，間隙融合率=（0 h間隙寬度-48 h間隙寬度）/0 h間隙寬度；與空白對照組和無義序列組比較，MALAT1 siRNA組劃痕間隙融合率明顯降低，差異有統計學意義（P＜0.05，圖3，表1）。

2.4Transwell實驗檢測細胞侵襲能力

Transwell實驗結果顯示，Tscca細胞系轉染MALAT1 siRNA 48 h后各隨機計數3個視野，與空白對照組和無義序列組比較，MALAT1 siRNA組穿膜細胞數均明顯減少，差異均有統計學意義（P＜0.05，圖4，表2）。

2.5蛋白質印跡法檢測細胞侵襲及EMT相關蛋白表達

細胞轉染MALAT1 siRNA后，總蛋白中MMP-2、MMP-9、N-cadherin蛋白表達水平均明顯受到抑制；E-cadherin蛋白表達水平明顯上調，與空白對照組及無義序列組比較，差異有統計學意義（P＜0.05，圖5）。

2.6免疫熒光法檢測細胞相關蛋白水平變化

E-cadherin熒光信號表達于細胞膜上，N-cadherin熒光信號在細胞膜和細胞質中均有表達，Tscca細胞轉染MALAT1 siRNA后，細胞膜上的E-cadherin熒光強度明顯增加，高于空白對照組和無義序列組；而細胞膜和細胞質上N-cadherin和熒光強度與對照組相比明顯減弱（圖6）。

2.7裸鼠皮下荷瘤模型生長抑制曲線

截止觀察期結束，MALAT1 siRNA治療組裸鼠皮下荷瘤體積（833.08±374.54）mm3小于空白對照組（1 855.53±277.98）mm3及無義序列組（1 738.42± 290.53）mm3（F=18.664，P＜0.001，圖7）。

2.8免疫組織化學染色檢測治療后腫瘤相關蛋白的變化

PCNA陽性信號定位于細胞核，MMP-2、MMP-9陽性信號定位于細胞質，轉染MALAT1 siRNA后，細胞中PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白均呈中弱陽性表達，較空白對照組和PBS組表達明顯減弱（圖8）。

圖3 劃痕實驗檢測轉染MALAT1 siRNA后Tscca細胞遷移能力（×100）Figure 3Scratch test showing that MALAT1 siRNA significantly inhibited TSCCa cell migration（×100）

表1 Tscca細胞轉染MALAT1 siRNA后細胞遷移能力的變化Table 1MALAT1 siRNA significantly inhibiting Tscca cell migration

圖4 Transwell實驗檢測不同處理組Tscca細胞侵襲能力（×100）Figure 4A and B.Transwell assay with matrigel indicating that MALAT1 siRNAsignificantlyinhibitedTSCCacellinvasionability（×100）

表2 Tscca細胞轉染MALAT1 siRNA后細胞侵襲能力的變化Table 2MALAT1 siRNA significantly inhibiting Tscca cell invasion

圖5 MALAT1 siRNA處理后Tscca細胞相關蛋白表達變化Figure 5Western blot analyses showing that MALAT1 siRNA could significantly inhibit N-cadherin and MMP2/9 expression and increase E-cadherin expression in TSCCa cells

圖6 免疫熒光檢測不同處理組Tscca細胞相關指標表達強度變化（×1 000）Figure 6Immunofluorescence staining indicating that MALAT1 siRNA significantly increased E-cadherin expression and inhibited N-cadherin expression in TSCCa cells（×1 000）

圖7 不同處理組裸鼠皮下荷瘤的生長抑制曲線Figure 7Tumor volume curves indicating that MALAT1 siRNA injection treatment could significantly inhibit TSCCa-xenograft tumor growth

圖8 不同處理組裸鼠皮下荷瘤生長相關蛋白的表達（SP法×200）Figure 8IHC staining showing that PCNA，MMP-2，and MMP-9 expression was inhibited in the MALAT1 siRNA-treated TSCCa-xenograft tumors（SP×200）

3 討論

口腔鱗癌是頭頸鱗癌中最常見的類型，全世界每年有約300 000例新發病例，且發病率逐年上升?？谇击[癌常呈浸潤性生長，局部侵襲能力強，易發生頸部淋巴結轉移，預后較差［3］。

長鏈非編碼RNA因其近年來越來越多的被發現在腫瘤形成、侵襲和轉移過程中發揮重要作用而備受關注［8］。MALAT1是最早發現的長鏈非編碼RNA之一，由最初發現于人類非小細胞肺癌而得名［9］。研究發現，在很多人類惡性腫瘤中均可發現MALAT1過表達，如食管癌、膠質瘤、乳腺癌、前列腺癌等，且MALAT1通過影響基因的表達在惡性腫瘤的侵襲和轉移過程中發揮重要作用［10-12］。本研究通過對口腔鱗癌及正常口腔黏膜組織進行RT-PCR檢測發現，MALAT1在口腔鱗癌組織中的表達明顯高于正常組織。

EMT是指細胞上皮表型在特定的生理及病理情況下向間質轉化的現象，大量研究表明，EMT在促進

腫瘤的侵襲、浸潤和轉移過程中起到重要作用［13-14］。

本課題組前期研究發現，EMT參與調控口腔鱗癌原發浸潤和繼發轉移的生理過程［15］。EMT以上皮細胞極性的喪失及間質特性的獲得為重要特征，上皮細胞標志物E-cadherin的表達下調，間葉表型標記物N-cadherin的表達上調，使腫瘤細胞更加富于侵襲性［16］，同時MMPs作為內源性蛋白水解酶可降解細胞外基質中的各種蛋白成分，便于細胞從原發腫瘤分離脫落發生侵襲轉移［17］。PCNA是一種與細胞的增殖周期相關的多肽，是反映細胞增殖活性的一項重要的生物學指標［18］。

本研究敲低MALAT1在口腔鱗癌細胞中的表達后，細胞增殖活性受到抑制，穿過Transwell小室的細胞數明顯減少，劃痕愈合減慢，證明了敲低MALAT1可以抑制腫瘤細胞的增殖、遷移、侵襲能力。蛋白質印跡實驗表明，隨著MALAT1表達的抑制，侵襲及EMT相關蛋白E-cadherin表達上調，N-cadherin、MMP-2、MMP-9表達明顯下調。免疫熒光法檢測細胞中E-cadherin、N-cadherin表達強度發現，敲低MALAT1后，細胞中E-cadherin熒光強度增大，N-cadherin熒光強度明顯減弱，表明MALAT1可能通過誘導EMT過程促進口腔鱗癌細胞的侵襲轉移。進一步通過體內實驗研究發現，抑制MALAT1的表達后，腫瘤增長速度和體積明顯低于對照組，免疫組織化學結果表明，腫瘤增殖、侵襲相關指標PCNA和MMP-2、MMP-9蛋白表達顯著降低，與體外實驗結果一致。

綜上所述，MALAT1可能通過調控EMT促進口腔鱗癌的增殖和侵襲過程，臨床上可能作為一種新型腫瘤標志物并為口腔鱗癌的治療提供新的靶點，對于其調控口腔鱗癌生物學行為的分子機制及在臨床中的應用有待進一步研究和探索。

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（2015-03-18收稿）

（2015-04-03修回）

（編輯：邢穎）

Metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1 modulates oral squamous cell carcinoma invasion in vitro and in vivo

SuLIU1，XuanZHOU1，XiaofeiWANG2，KaiYUE1，YuanshengDUAN1，QinghuaHE1，JiaxinWANG1，HaishanSI1，XudongWANG1

Xudong WANG；E-mail:wxd.1133@163.com

Objective:To investigate the effect of metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1（MALAT1）in modulating the effects of oral squamous cell carcinoma（OSCC）invasion.Methods:Real-time polymerase chain reaction was employed to detect the expression of MALAT1 in samples of OSCC post-radical resection，normal oral mucosa samples，and oral squamous cell lines. MALAT1-siRNA was transfected into TSCCa human tongue squamous cell carcinoma cell lines.Cell proliferation was determined by methyl-thiazolyl-tetrazolium reduction assay.Cell migration and invasive ability were evaluated by scratch test and transwell assay.The expression of proteins that regulated invasion and apoptosis were examined using Western blot assay.Immunofluorescence assay was used to detect changes in epithelial-mesenchymal transition（EMT）-associated proteins in the cells.Tumor-bearing nude mouse models were established by subcutaneous implantation of TSCCa cells.Immunohistochemistry was used to detect up-regulation of proliferating cell nuclear antigen（PCNA）and matrix metalloproteinase-2/9（MMP-2/9）.Results:MALAT1 expression was significantly higher in OSCC than in normal tissues（P＜0.05）.MALAT1 expression was inhibited by transfecting MALAT1-siRNA.After MALAT1 expres-

MALAT1，oral squamous cell carcinoma，neoplasm invasiveness，epithelial-mesenchymal transition（EMT）

10.3969/j.issn.1000-8179.20150313

①天津醫科大學腫瘤醫院頜面耳鼻喉科，國家腫瘤臨床醫學研究中心，天津市腫瘤防治重點實驗室（天津市300060）；②天津市第一中心醫院耳鼻喉科

*本文課題受國家自然科學基金（編號：81172573）和天津市應用基礎與前沿技術研究計劃（編號：12JCYBJC33800）資助

王旭東wxd.1133@163.com

1Department of Otorhinolaryngology and Maxillofacial Oncology，Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital；National Clinical Research Center for Cancer，Key Laboratory of Cancer Prevention and Therapy，Tianjin 300060，China；2Department of Otorhinolaryngology，Tianjin First Central Hospital，Tianjin 300060，China.

This work was supported by the National Natural Science Foundation of China（No.81172573）and the Tianjin Application Research of Basic andAdvanced Technology（No.12JCYBJC33800）.

sion was down-regulated in TSCCa cells，proliferation was inhibited and invasion was attenuated，showing significant differences compared with the cells transfected with scrambled siRNA and control cells（P＜0.05）.Expression of N-cadherin and MMP-2/9 were downregulated in the cells after MALAT1 was knocked down.Tumor growth was significantly slower in the MALAT1-siRNA group than in the control groups.IHC indicated that PCNA and MMP-2/9 expression of tumor tissues were significantly inhibited in MALAT1-siRNA group.Conclusion:MALAT1 is over-expressed in human OSCC.MALAT1 reduction can inhibit the proliferation and invasion of OSCC cells.Furthermore，MALAT1 may promote OSCC invasion and metastasis by modulating EMT.

劉速專業方向為頭頸部鱗癌外科治療。

E-mail：suzan6689@163.com