云南通海小菜蛾種群抗藥性監測及田間藥效評價

尹艷瓊, 沐衛東, 李向永, 趙雪晴,黃春芬, 艾 英, 諶愛東*

(1. 云南省農業科學院農業環境資源研究所, 昆明 650205;2. 云南省通海縣植保植檢站, 通海 652700)

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云南通海小菜蛾種群抗藥性監測及田間藥效評價

尹艷瓊1#, 沐衛東2#, 李向永1, 趙雪晴1,黃春芬2, 艾 英2, 諶愛東1*

(1. 云南省農業科學院農業環境資源研究所, 昆明 650205;2. 云南省通海縣植保植檢站, 通海 652700)

為掌握云南蔬菜主產區通海縣小菜蛾種群對常用殺蟲劑的敏感性及其田間防治效果,采用浸葉法和田間小區試驗對常用殺蟲劑進行室內毒力測定和田間藥效試驗。結果表明：通海縣小菜蛾種群對丁醚脲和Bt的敏感性最高,仍處于敏感水平,對茚蟲威屬低抗水平,對蟲螨腈和多殺菌素的抗性倍數分別為24.28和31.68倍,屬中抗水平,對氯蟲苯甲酰胺抗性倍數為44.62倍,到高抗水平,對阿維菌素的敏感性最差,抗性倍數829.90倍,達極高抗水平。抗性水平和田間藥效呈一定相關性,氯蟲苯甲酰胺和阿維菌素藥后7 d對小菜蛾的防治效果均低于50%,茚蟲威、多殺菌素和丁醚脲的田間防效較好。通海縣小菜蛾可選擇的防治藥劑包括茚蟲威、多殺菌素和丁醚脲,注意不同藥劑之間的輪換和交替使用。

小菜蛾; 敏感性; 抗藥性; 防治效果

小菜蛾[Plutellaxylostella(L.)] 屬鱗翅目(Lepidoptera),菜蛾科(Plutellidae),主要為害十字花科蔬菜,如甘藍、花椰菜、青花菜、小白菜、芥菜等,寄主種類達40 多種,是世界性十字花科蔬菜的重要害蟲, 在全國各地均有分布。小菜蛾抗藥性發展速度快、抗藥譜廣,抗性水平高, 治理難度為國內外所公認[1], 現已成為抗藥性最嚴重的和最難防治的害蟲之一[2]。在云南省由于“冬無嚴寒,夏無酷暑、干濕季分明、蔬菜四季種植”的特殊氣候條件,使小菜蛾周年發生且種群數量大,繁殖快[3-4],導致其對藥劑的抗性水平越來越高,云南通海和彌渡菜區的小菜蛾抗性水平極高,居全國抗藥性之首,已對90% 以上的小菜蛾防治藥劑產生了抗藥性[5]。使用殺蟲劑是目前防治小菜蛾的關鍵技術措施之一,為了科學合理地使用殺蟲劑,需對田間常用藥劑進行抗性測定和田間藥效試驗,制定科學的用藥策略指導生產,減少盲目使用殺蟲劑,從而延長藥劑的使用年限。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源地基本情況

通海縣位于云南中部,東經102°30′,北緯23°65′,海拔1 820 m,氣候溫和,年溫差小而晝夜溫差相對較大,年平均氣溫16.6 ℃,適宜十字花科蔬菜的周年種植,全年白菜、甘藍、蘿卜、花椰菜等為主的十字花科蔬菜種植面積在8 000 hm2左右,當地栽培水平高,用藥量大,小菜蛾周年發生。

1.2 供試藥劑

抗藥性監測的7種殺蟲劑為：1.68%阿維菌素(abamectin)乳油、20.18%丁醚脲(diafenthiuron)乳油、9.17%蟲螨腈(chlorfenapyr)乳油、4.86%茚蟲威(indoxacarb)乳油、3%Bt(Bacillusthuringiensis)可濕性粉劑、2.5%多殺菌素(spinosad)懸浮劑、5.22%氯蟲苯甲酰胺(chlorantraniliprole)乳油。藥劑由廣東省農業科學院植物保護研究所用原藥配制而成,并分析檢測其有效含量。

田間藥效試驗的7種藥劑(其中氯蟲苯甲酰胺有2個劑型),濃度設定按廠家推薦劑量的上限：1.5%阿維菌素乳油 (河北威遠生物化工股份有限公司)1 000倍液、50%丁醚脲乳油 (江蘇常隆化工有限公司)500倍液、20%蟲螨腈懸浮劑(德國巴斯夫公司)1 000倍液、15%茚蟲威懸浮劑(美國杜邦公司)3 000倍液、Bt 32000IU/mg(武漢科諾生物農藥有限公司)750倍液、2.5%多殺菌素懸浮劑(美國陶氏益農公司)750倍液、20%氯蟲苯甲酰胺水分散粒劑(日本株式會社)3 000倍液、20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑(美國杜邦公司)3 000倍液。

1.3 試驗方法

1.3.1 生物測定方法

試蟲飼養：采集的小菜蛾蛹放入4 ℃的冰箱保存,高齡幼蟲在人工氣候室內[溫度(25±1)℃,RH 65%～70%, L∥D=16 h∥8 h]用寄主植物飼養到蛹,收集蛹。全部蛹收集完后放到產卵箱(45 cm×45 cm×45 cm),在養蟲室[溫度(25±1)℃,RH 70%～75%, L∥D=16 h∥8 h]中羽化,成蟲用15%的蜂蜜水飼養以補充營養。待50%以上的成蟲羽化后,將用甘藍汁液浸泡的鋁箔片,晾干后吊掛于養蟲籠內壁四周,每24 h更換1次產卵箔,收集的卵在4 ℃冰箱保存。產卵7 d后把卵箔取出放在培育好的蘿卜苗[6]上飼養,取F1代3齡初期幼蟲進行測試。

測定方法(浸葉法)[7]：用含0.05% Triton X-100的蒸餾水稀釋藥液,按等比級數稀釋法,順次配制成5個系列濃度,每濃度藥液量200 mL。用潔凈的甘藍(Brassicaoleracea)葉,剪成直徑6.5 cm的圓片(避免主葉脈)。將葉片在不同濃度的溶液中浸泡10 s后取出晾干,放在直徑6.5 cm的培養皿中,接入10頭3齡初期幼蟲,重復4次,用0.05% Triton X-100水溶液浸漬的葉片作為對照,覆蓋雙層吸水卷紙,最后蓋上培養皿上蓋。將其正面向上置于(RXZ-380B型)培養箱中[溫度(25±1)℃,RH 65%～70%, L∥D=16 h∥8 h]。除Bt藥后96 h調查外,其余藥劑48 h后調查,以小毛筆輕觸蟲體,不能協調運動視為死亡,記錄最終試蟲數和死蟲數。

1.3.2 田間藥效試驗

試驗地點：云南省通海縣秀山鎮黃龍村五組。

試驗作物：花椰菜,移栽成活期。

試驗方法：采用隨機區組排列,3次重復,小區面積10 m2,施藥前蟲量調查,每小區蟲量高于30頭,3齡前幼蟲占80%以上,按5點取樣法每點計數12株進行標記,傍晚17:00,用自動噴霧器(新峰牌15 L)進行噴霧。噴施清水作對照。施藥前一天調查藥前基數,藥后4、7和14 d各調查1次標記植株上小菜蛾的幼蟲數。

1.4 計算方法

抗藥性倍數計算：測定結果用POLO軟件計算毒力回歸方程的斜率,LC50值及其95%置信限,并與室內敏感品系的LC50相比較,計算出抗性倍數。抗性倍數=田間種群的LC50/敏感種群的LC50。小菜蛾敏感毒力基線參照十字花科小菜蛾抗藥性監測技術規程[8]。

抗性分級標準[9]：抗性倍數RR≤5.0為無抗性,抗性倍數5.0160.0極高水平抗性。

藥效計算方法[10]：

蟲口減退率(%)=(藥前蟲口基數-藥后蟲口基數)/藥前蟲口基數×100;

校正防效(%)=(防治區蟲口減退率-空白對照區蟲口減退率)/(100-空白對照區蟲口減退率)×100;

方差分析采用SPSS軟件,鄧肯氏新復極差(DMRT)法對試驗數據進行差異顯著性分析(P<0.05)。

2 結果與分析

2.1 室內毒力測定結果

室內毒力測定結果表明,云南滇中通海菜區小菜蛾田間種群對丁醚脲和Bt的敏感性最高,LC50分別為60.53 mg/L和1.05 mg/L,處于敏感水平;對茚蟲威的敏感性下降,抗性倍數9.22倍;對蟲螨腈、多殺菌素的抗藥性達中抗水平,抗性倍數24.28、31.68倍;對氯蟲苯甲酰胺達到高抗水平,LC50為10.08 mg/L,抗性倍數為44.62倍;敏感性最差的是阿維菌素,LC50為16.60 mg/L,抗性倍數829.90倍。通海菜區小菜蛾田間種群對7種常用藥劑的敏感性依次為：丁醚脲>Bt>茚蟲威>蟲螨腈>多殺菌素>氯蟲苯甲酰胺>阿維菌素。

表1 幾種常用殺蟲劑對通海小菜蛾種群室內毒力測定結果(2012年)

2.2 田間藥效評價

20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑3 000倍液、20%氯蟲苯甲酰胺水分散粒劑3 000倍液和1.5%阿維菌素乳油1 000倍液藥后4、7 d防治效果均低于50%,防效較差;15%茚蟲威懸浮劑3 000倍液、2.5%多殺菌素懸浮劑750倍液、50%丁醚脲乳油500倍液的效果較好,蟲口減退率均高于80%,20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑、20%氯蟲苯甲酰胺水分散粒劑與這3種藥劑的田間防效差異顯著,與1.5%阿維菌素乳油沒有顯著性差異,藥后7 d,除了15%茚蟲威懸浮劑、50%丁醚脲乳油和20%蟲螨腈懸浮劑的效果有所上升之外,其他藥劑的防效呈下降趨勢,20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑的防效藥后7 d與對照間在0.05水平無顯著性差異,已失去了防效。藥后14 d,50%丁醚脲乳油的田間防效為84.7%,表現出較好的持效性。8種常用藥劑對通海菜區小菜蛾田間種群的防治效果總體表現為：丁醚脲>茚蟲威>多殺菌素>Bt>蟲螨腈>氯蟲苯甲酰胺水分散粒劑>阿維菌素>氯蟲苯甲酰胺懸浮劑。

通海小菜蛾對7種常用殺蟲劑的抗性水平與藥后7 d的田間防效有一定的相關性,除Bt外,抗藥性水平處于無抗和低抗的丁醚脲、茚蟲威的田間防效最高,抗藥性水平為中抗的多殺菌素、蟲螨腈的田間防效也相對較高,抗藥性水平為高抗和極高抗的氯蟲苯甲酰胺、阿維菌素田間防效最差,按廠家推薦的劑量使用已基本無效。

表2 不同藥劑對小菜蛾田間防治效果(2012,通海縣)1)

1) 表中同列數據后小寫英文字母不同者表示在0.05水平差異顯著。

Data followed by different letters in the same column are significantly different at 0.05 level.

3 討論

通海縣小菜蛾對目前常用殺蟲劑的抗性水平在不斷上升,除丁醚脲、Bt和茚蟲威在低抗水平外,其他測定的藥劑均在中抗以上,阿維菌素達到了極高抗水平,敏感性與田間防治效果總體一致。通海縣1995年開始使用阿維菌素類殺蟲劑, 2001年抗藥性為46.1倍[11],到了2008年就上升到1 034.5～ 40 624.5 倍,達到極高抗水平[12],2009年后隨著氯蟲苯甲酰胺等新型藥劑的使用,對阿維菌素抗藥性有所下降,本研究監測到抗性倍數達829.90倍,但仍處于極高抗水平,田間防效在推薦濃度下也不理想。對氯蟲苯甲酰胺的抗藥性達到了高抗水平,藥后7 d藥效與清水對照無顯著性差異。15%茚蟲威懸浮劑和2.5%多殺菌素懸浮劑對小菜蛾的田間防治效果藥后7 d達85.9%和73.1%,藥后14 d仍在55.8%和64.9%,室內毒力測定的結果也較敏感,處于低中抗水平;丁醚脲對云南通海菜區小菜蛾敏感性最高,田間防治效果較好,且持效期長。敏感性與田間防效的一致性說明抗藥性的室內毒力測定結果對指導田間用藥具有實際意義。

室內毒力測定的結果與田間防效總體一致,但不是完全吻合的正相關性,如Bt和蟲螨腈,抗藥性低于多殺菌素,而田間防效沒有多殺菌素高,所以在用藥建議中除依靠抗藥性監測的結果外,還要考慮藥劑的劑型、作用機制和施藥方式,才能達到提高田間防效、降低抗藥性的理想效果。根據本研究的結果針對不同的藥劑對通海菜區提出如下用藥建議：氯蟲苯甲酰胺抗藥性增加,田間防效也明顯降低,該藥與現有的藥劑無交互抗性[13],建議減少該藥劑的使用,僅用于小菜蛾發生前或發生初期或作為抗性治理的輪換藥劑;多殺菌素是一種較新的生物農藥,低毒、高效、廣譜,殺蟲效果受下雨影響較小,小菜蛾對多殺菌素產生抗性的速度較慢,該藥與阿維菌素、氟蟲腈、殺蟲單沒有交互抗性[14],可作為常規用藥;茚蟲威使用時應注意用藥的次數,盡量不連續施用;蟲螨腈處于中抗水平,對高齡幼蟲的防效較差,建議在卵孵化高峰、低齡幼蟲發育初期噴霧能起到良好的防治效果;丁醚脲對小菜蛾的活性高,可用于防治已對有機磷和擬除蟲菊酯類藥劑產生抗性的害蟲[15],也可作為通海縣防治小菜蛾常規用藥;Bt室內毒力測定處于敏感水平,但在使用過程中Bt存在防效不穩定、殘效期短、殺蟲速度慢等問題應要注意施藥條件,盡量在傍晚施藥,增加濕展劑以保證Bt在作物上均勻分布, 同時應用菌液霧化良好的藥械和適宜的噴霧量[16],也可利用增效劑[17-18]提高菌劑的田間防效。

[1] 馮夏,陳煥瑜,呂利華,等.廣東小菜蛾對阿維菌素的抗性研究[J].華南農業大學學報,2001,22(2):35-38.

[2] 梁沛,高希武,鄭炳宗,等.小菜蛾對阿維菌素的抗性機制及交互抗性研究[J].農藥學學報,2013 (1):41-45.

[3] 李向永,尹艷瓊,趙雪晴,等.通海菜區小菜蛾的主要生物學特征[J].動物學研究,2011,32(S1):48-51.

[4] 李向永,尹艷瓊, 趙雪晴,等.云南不同菜區小菜蛾的產卵規律與發育起點溫度[J].應用昆蟲學報,2011,48(2):254-259.

[5] 馮夏,李振宇,吳青君,等.小菜蛾抗性治理及可持續防控技術研究與示范[J].應用昆蟲學報,2011,48(2):247-253.

[6] 劉傳秀,韓招久,李鳳良,等.應用蛭石蘿卜苗法室內續代大量繁殖小菜蛾的研究[J].昆蟲知識,1993,30(6):341-344.

[7] 吳益東,沈晉良,陳進,等.用點滴法和浸葉法監測棉鈴蟲抗藥性的比較[J].植物保護,1996,22(5):3-6.

[8] 中華人民共和國農業部.中華人民共和國農業行業標準 NY/T 2360-2013,十字花科小菜蛾抗藥性監測技術規程[S].北京：中國農業出版社,2013.

[7] 尤民生,魏輝.小菜蛾的研究[M].北京:中國農業出版社,2007:131-242.

[8] 趙楊,趙奇,田本志,等.幾種藥劑對小菜蛾的田間藥效比較[J].世界農藥,2009,31(2):28-30.

[9] 張雪燕,何婕,葉翠玉,等.云南小菜蛾對阿維菌素的抗藥性監測和藥劑防治試驗[J].華中農業大學學報,2001,20(5):426-430.

[10]羅雁婕,高希武,吳文偉,等.藥劑對小菜蛾抗性及敏感品系乙酰膽堿酯酶抑制作用比較[J].農藥學學報,2008,10(2):211-216.

[11]楊桂秋,童怡春,楊輝斌,等.新型殺蟲劑氯蟲苯甲酰胺研究概述[J].世界農藥,2012,34(1):31-34.

[12]朱劍翔,武淑文,楊亦樺,等.小菜蛾對多殺菌素的抗性篩選及遺傳方式分析[J].南京農業大學學報,2007,30(1):61-65.

[13]宋玉泉,王軍鋒,常秀輝.丁醚脲對幾種重要害蟲的室內生物活性[J].農藥,2008,47(8):609-611.

[14]黃紹寧.Bt防治小菜蛾的幾項使用技術[J].中國病毒學,2000,15(殺蟲微生物學專刊):196-200.

[15]岳書奎,王志英,黃玉清.Bt生物增效劑研究[J].東北農業大學學報,1996,24(4):46-49.

[16]張聰沖,邱浩,覃春華,等.BT工程菌WG-001與化學殺蟲劑復配最佳配方篩選及田間防效研究[J].應用昆蟲學報,2011,48(2):313-318.

(責任編輯：王 音)

Resistance monitoring of diamondback moth and field control efficacy of pesticides against the pest in Tonghai, Yunnan Province

Yin Yanqiong1, Mu Weidong2, Li Xiangyong1, Zhao Xueqing1, Huang Chunfen2, Ai Ying2, Chen Aidong1

(1.Institute of Agricultural Environment and Resources, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Kunming 650205, China; 2. Tonghai County Plant Protection and Quarantine Station, Yunnan 652700, China)

To understand the current status of insecticide resistance in diamondback moth (DBM),Plutellaxylostella(L.) and the control efficacy of some common insecticides to DBM in Tonghai County, Yunnan Province, the indoor leaf-dipping bioassay and field trial were conducted, respectively. The results showed that the susceptibility of the Tonghai DBM to diafenthiuron and Bt were the highest, and exhibited sensitive levels. The resistance level was low to indoxacarb. The resistance ratios to chlorfenapyr and spinosad were 24.28 and 31.68 fold, respectively, which showed a middle resistance level. As to chlorantraniliprole, the resistance ratio was 44.62 fold with a high resistance level. The susceptibility to abamectin was the lowest and the resistance ratio was high to 829.90-fold. There was some correlation between the resistance ratio and the field control efficacy. The control efficacy of chlorantraniliprole and abamectin to the DBM was below 50% seven days after treatment. Indoxacarb, spinosad and diafenthiuron provided good control efficacy to the DBM, which can be selected for the DBM control in Tonghai with rational rotation and alternative using strategy.

Plutellaxylostella; susceptibility; insecticide resistance; control effects

2014-04-10

2014-07-29

公益性行業(農業)科研專項(200803001，201103021)

S 481.4

B

10.3969/j.issn.0529-1542.2015.03.041

*通信作者 E-mail:shenad68@163.com

#共同第一作者