清咽片的薄層鑒別研究

賀 婕，張愛榮，吳成軍

（山西華元醫藥集團有限公司，山西太原 030032）

清咽片收載于《中華人民共和國衛生部藥品標準中藥成方制劑》第十七冊中，是由桔梗、硼砂、寒水石、青黛、冰片、薄荷腦、訶子、甘草、甘草霜9味中藥制成的片劑。具有清涼解熱、生津止渴的功效，適用于咽喉腫痛、聲音嘶啞、口干舌燥、咽下不利等癥。原部頒標準中只有一項青黛的薄層鑒別，為了更好地控制其內在質量，保證產品療效，我們對處方中其余藥材進行研究，建立冰片、薄荷腦、訶子、甘草、甘草霜的薄層鑒別方法，方法簡便、靈敏、準確、專屬性強，可用于清咽片的質量控制。

1 材料與方法

1.1 實驗儀器

ZF-2三用紫外儀（上海市安亭電子儀器廠），AL204電子天平（Mettler公司）。

1.2 實驗材料

冰片對照品（批號110743-200303），薄荷腦對照品（批號110728-200506），甘草酸銨鹽對照品（批號110731-201116），訶子對照藥材（批號121015-201004），甘草對照藥材（批號 120904-200410），以上對照品和對照藥材均購于中國食品藥品檢定研究院；其他試劑均為分析純；清咽片由山西天星制藥有限公司提供。

1.3 實驗方法

1.3.1 冰片、薄荷腦 取清咽片10片，除去包衣，研細，加乙醚20mL，密塞，冷浸30min，濾過，濾液低溫揮干，殘渣加三氯甲烷1mL使溶解，作為供試品溶液。分別取冰片對照品、薄荷腦對照品，加三氯甲烷制成1mg/mL的對照品溶液。另取缺冰片、薄荷腦陰性對照樣品，同法制成陰性對照溶液。

1.3.2 甘草、甘草霜 取清咽片15片，除去包衣，研細，加乙醚30mL，加熱回流1h，濾過，棄去醚液，藥渣加甲醇30mL，加熱回流1h，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20mL使溶解，用正丁醇提取3次，每次20mL，合并正丁醇液，用水洗滌3次，每次15mL，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇5mL使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取甘草酸銨鹽對照品，加甲醇制成5mg/mL的溶液，作為對照品溶液。取缺甘草、甘草霜陰性對照樣品，同法制成陰性對照溶液。

1.3.3 訶子 取清咽片5片，除去包衣，研細，加無水乙醇30mL，超聲處理30min，濾過，濾液濃縮至1mL，作為供試品溶液。另取訶子對照藥材0.2g，同法制成對照藥材溶液。再取沒食子酸對照品，加無水乙醇制成1mg/mL的溶液，作為對照品溶液。取缺訶子陰性對照樣品，同法制成陰性對照溶液。

2 結果

2.1 冰片、薄荷腦

照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VIB）實驗，吸取 1.3.1中 4種溶液各 10μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60℃～90℃）-甲苯-乙酸乙酯（7∶4∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，在日光下檢視［1-4］。供試品色譜中，與對照品色譜相應的位置，顯相同顏色的斑點，陰性對照液無干擾，見圖1。

2.2 甘草、甘草霜

照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄 VIB）實驗，吸取1.3.2中4種溶液各2μL，分別點于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15∶1∶1∶2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈（365nm）下檢視［5-7］。供試品色譜中，與對照藥材和對照品色譜相應的位置，顯相同顏色的熒光斑點，陰性對照液無干擾，見圖2。

2.3 訶子

照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VIB）實驗，吸取1.3.3中4種溶液各4μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水（7∶10∶3∶4）的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鐵乙醇溶液［8-9］。供試品色譜中，與對照藥材色譜相應的位置，顯相同顏色的斑點，陰性對照液無干擾，見圖3。

圖1 清咽片中冰片、薄荷腦的TLC

圖2 清咽片中甘草、甘草霜的TLC

圖3 清咽片中訶子的TLC

3 討 論

我們首先對本處方中桔梗的薄層鑒別方法進行了多次研究，通過篩選不同前處理方法、固定相、展開系統，均無法達到有效的分離，陰性干擾大，專屬性不強。

本實驗對甘草薄層鑒別方法進行摸索時，按照藥典中的方法甘草酸銨對照品未出現熒光斑點，懷疑是對照品未展開或顯色不夠。通過展開相和紫外波長的對比，發現調整展開相甘草酸銨對照品可出現熒光斑點且顯色清晰，但是藥材和樣品分離效果不佳，展開成一條線。254nm波長下甘草酸銨斑點清晰，但是藥材其余鑒別斑點不明顯，故最終確定此方法。經過反復實驗，發現對照品溶液中甘草酸銨不易溶解且易析出，造成點樣時溶液濃度低，我們加入少量的冰醋酸后解決此問題。此外，105℃加熱顯色時，需要注意加熱時間，加熱時間太短，顯色效果不好，斑點不清晰；加熱時間過長，板烤糊也不易觀察。

本實驗對清咽片中冰片、薄荷腦、甘草、甘草霜、訶子5味藥材進行薄層鑒別研究，方法簡便、專屬性強、重現性好，可作為清咽片的質量控制指標。在原部頒標準僅有青黛藥材鑒別的基礎上，進一步增強了該品種的質量可控性，也為類似制劑或成分的提取、鑒別和含量測定提供了參考依據。

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