橋本甲狀腺炎合并甲狀腺乳頭狀癌組織中survivin和Ki-67的表達變化及意義

章冪，章佳新，馮倩倩

(揚州大學臨床醫(yī)學院蘇北人民醫(yī)院，江蘇揚州225001)

橋本甲狀腺炎(HT)可合并發(fā)生甲狀腺乳頭狀癌(PTC)，且近年發(fā)病率呈上升趨勢。survivin是凋亡抑制蛋白家族的成員，可通過有絲分裂促進轉化細胞的異常增殖［1］。Ki-67存在于增殖細胞的細胞核中，能反映組織細胞的增殖能力［2］。本研究觀察了甲狀腺腺瘤(TA)、HT、PTC及HT合并PTC組織中survivin和Ki-67蛋白的表達，探討HT和PTC的關系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集蘇北人民醫(yī)院病理科2007年1月～2014年2月的甲狀腺存檔蠟塊，隨機抽取TA 20例、HT 40例、PTC 40例、HT合并 PTC 40例;均經病理學證實，且臨床資料齊全，術前均未行任何治療。40例HT合并PTC患者中，男7例，女33例;年齡23～72歲，中位年齡47歲;臨床分期Ⅰ、Ⅱ期26例，Ⅲ、Ⅳ期14例;有淋巴結轉移17例，無淋巴結轉移23例。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 采用免疫組化SP法。純化的小鼠抗人survivin單克隆抗體，購自美國Santa Cruz公司;小鼠抗人Ki-67單克隆抗體，購自美國CST公司;DAB試劑盒由北京中杉金橋生物技術有限公司提供，染色步驟按操作說明書進行。選取5個不同高倍視野，每個視野計數(shù)100個細胞。survivin陽性染色為細胞質或細胞核內出現(xiàn)棕黃色顆粒。陽性細胞所占百分比 ＜5%、5%～25%、25%～50%、50%～75%、＞75%分別為 0、1、2、3、4 分，陽性細胞顯色強度無著色、輕度染色、中度染色、重度染色分別為0、1、2、3分，兩者得分之和≥2分為表達陽性。Ki-67陽性染色為細胞核內出現(xiàn)棕黃色顆粒，陽性細胞所占百分比≥10%為表達陽性。

1.2.2 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件。組間比較行χ2檢驗，用Spearman等級相關系數(shù)描述相關性。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 不同甲狀腺組織中survivin和Ki-67表達情況在 TA、HT、PTC、HT合并 PTC組織中 survivin蛋白陽性表達率分別為 10.0%(2/20)、42.5%(17/40)、77.5%(31/40)、72.5%(29/40)，除 HT 合并PTC與PTC比較P＞0.05外，其余兩兩比較P均＜0.05;在 TA、HT、PTC、HT 合并 PTC 組織中 Ki-67 蛋白陽性表達率分別為 15.0%(3/20)、57.5%(23/40)、67.5%(27/40)、65.0%(26/40)，除 HT、PTC及HT合并PTC與TA比較P均＜0.05外，其余兩兩比較P均＞0.05。

2.2 survivin和Ki-67表達與HT合并PTC患者臨床病理參數(shù)的關系 見表1。

表1 survivin和Ki-67表達與HT合并PTC患者臨床病理參數(shù)的關系

2.3 HT合并PTC組織中survivin和Ki-67表達的關系 相關性分析發(fā)現(xiàn)，survivin與Ki-67的表達呈正相關(r=0.146，P=0.007)。

3 討論

流行病學表明，慢性炎癥和腫瘤關系密切，阻止癌前病變患者的慢性炎癥，可降低癌癥發(fā)生率［3～5］。Lindsay等［6］首次提出HT合并甲狀腺惡性腫瘤，指出甲狀腺惡性腫瘤可由HT發(fā)展而來，其后大量學者也證明了此觀點，并且認為HT和PTC的關系尤為緊密［7，8］。

survivin是迄今發(fā)現(xiàn)的抑制細胞凋亡最強的一種凋亡抑制因子，其主要通過兩種途徑抑制細胞凋亡:①與細胞周期蛋白激酶p34cdc2及p34cdk4發(fā)生作用，阻斷凋亡通路信號的轉導［9］;②直接通過抑制凋亡終末效應器Capase3和Capase7的活性，阻斷各種誘導的細胞凋亡過程［10］。研究發(fā)現(xiàn)［11］，survivin 在多種惡性腫瘤中均異常表達增高，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。本研究顯示，survivin在PTC和HT合并PTC組織中高表達，提示survivin基因可能參與HT合并PTC或PTC的發(fā)生、發(fā)展過程。本研究還發(fā)現(xiàn)，survivin異常表達與淋巴結轉移、臨床分期有關，表明survivin與HT合并PTC的惡性程度和不良預后有關。而本研究中，HT組織survivin蛋白也呈中等程度異常表達，提示HT可能具有一定癌變潛質。

Ki-67在細胞 G1、S、M、G2期均有表達，為調節(jié)細胞周期存在于細胞核內的蛋白［12］。有研究發(fā)現(xiàn)，ki-67在多種惡性腫瘤均過度表達，與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預后有關［13］。本研究結果顯示，Ki-67在PTC和HT合并PTC中異常高表達，提示Ki-67在HT合并PTC(或PTC)的發(fā)生、發(fā)展過程中起重要作用。進一步研究發(fā)現(xiàn)，Ki-67表達與患者淋巴轉移和臨床分期有關，表明Ki-67可能在腫瘤的遠處轉移、侵襲中起重要作用。同時，本研究中Ki-67在HT中也呈異常高表達狀態(tài)，提示HT可能具有一定的癌變傾向。

研究發(fā)現(xiàn)，HT中有 IL-17的異常高表達存在［14，15］。在胃癌中 IL-17 可上調 IL-6 水平，間接活化STAT-3信號通路，進而促進腫瘤的發(fā)生發(fā)展。岳利華等［16］研究發(fā)現(xiàn)，在淋巴瘤中異常活化的STAT-3不僅可促進survivin表達，也可促進Ki-67表達。提示HT在高水平的IL-17炎性因子的長期刺激下，引起STAT-3信號通路的異常活化，進而引起survivin和Ki-67的逐漸異常表達增高。這可能也是本研究中survivin、Ki-67在HT中呈中等程度表達的原因所在。本研究關性分析發(fā)現(xiàn)，survivin與Ki-67表達呈正相關關系，均與淋巴結轉移、臨床分期有關，提示survivin與Ki-67的關系緊密，兩者可能來自同一條通路的調控，這也一定程度印證了以上觀點。因此，HT與PTC之間關系密切，HT具有一定的癌變?yōu)镻TC的傾向，而survivin和Ki-67在HT中的異常高表達可能在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲及遠處轉移等過程中起著重要作用。

［1］Ambrosini G，Adida C，Altieri DC.A novel ant-i apoptosis gene，survivin，expressed in cancer and lymhoma［J］.Nat，1997，3(8):917-921.

［2］Fukase K，Kato M，Kikuchi S，et al.Effect of eradieation of helicobaet erpylori on incidence of metachronous gastric carci-noma after endoscopic of early gastric cancer;an open-lable randomized controlled triai［J］.Cancer，2009，372(9636):392-397.

［3］Affara NI，Coussens LM.IKKalpha at the crossroads of inflammation and metastasis［J］.Cell，2007，129(1):25-26.

［4］ Perwez Hussain S，Harris CC.Inflammation and cancer:an ancient link with novel potentials［J］.Int.J Cancer，2007，121(11):2373-2380.

［5］Lu H，Ouyang W，Huang C.Inflammation，a key event in cancer development［J］.Mol Cancer Res，2006，4(4):221-233.

［6］Lindsay S，Dailey ME，Eriedlander J，et al.chronic throiditis:a clinical and pathologic study of 354 patients［J］.Clin Endocrinal，1952，12(4):1578-1600.

［7］Pasquale M，Rothstein JL，Palazzo JP.Pathologic features Hashimoto's associated papillary thyroid carcinomas［J］.Hum Pathol，2001，32(1):24-30.

［8］Singh B，Shaha AR，Trivedi H，et al.Coexistent Hashimoto's thyroiditis with papillary carcinoma:impact on presentation，management，and outcome［J］.Sugery，1999，126(6):1070-1077.

［9］Suzuki A，Hayashida M，Ito T，et al.survivin initiates cell cycle entry by the competitive interaction with Cdk4/pl6(INK4a)and Cdk2/cyclin E complex activation［J］.Oncogen，2000，19(29):3225-3234.

［10］Shin S，Sung BJ，Cho YS，et al.An antiapoptotic protein human survivin is a diret inhibitor of caspase3 and 7［J］.Biochemistry，2001，40(4):1117-1123.

［11］Kuda S，Pelus LM.Survivin，a cancer target with an emerging role in normal adult tissues［J］.Mol Cancer Ther，2006，5(5):1087-1098.

［12］Dowsett M，Smith IE，Ebbs SR，et al.Proliferation and apoptosis as markers of benefit in neoadjuvant endaerine therapy of breast cancer［J］.Clin Cancer Kes，2006，12(3 Pt 2):1024-1030.

［13］Quinn CM，Wright NA.The clinical assessmet of proliferation and growth in human tumall tumous Evaluation of methos and applications as prognostic vairables［J］.Pathol，1990，160(2):93-102.

［14］Figueroa-Vega N，Alfonso-Perez M，Benedicto I，et al.Increased circulating pro-inflammatory cytokines and Th17 lymphocytes in Hashimoto's thyroiditis［J］.J Clin Endocrinol Metab，2010，95(2):953-962.

［15］屠燕，沈美萍，秦瑞浩.IL-17在甲狀腺乳頭狀癌中的表達與臨床意義［J］.南京醫(yī)科大學學報(自然科學版)，2013，33(4):485-489.

［16］岳利華，程金妹，張鵬飛，等.STAT3和STAT5與survivin和Ki67蛋白在鼻NK/T細胞淋巴瘤中的表達及意義［J］.臨床耳鼻咽喉科雜志，2006，20(20):931-933，936.