匹多莫德治療傳染性單核細胞增多癥的臨床療效及對T淋巴細胞亞群的影響

黃正勇　吳鐵峰　錢　彩

浙江中醫藥大學附屬溫州中西醫結合醫院兒科，浙江溫州325001

匹多莫德治療傳染性單核細胞增多癥的臨床療效及對T淋巴細胞亞群的影響

黃正勇吳鐵峰錢彩

浙江中醫藥大學附屬溫州中西醫結合醫院兒科，浙江溫州325001

目的研究匹多莫德治療傳染性單核細胞增多癥（IM）的臨床療效及對T淋巴細胞亞群的影響。方法采用流式細胞術檢測了53例IM患兒和20名健康兒童外周血淋巴細胞亞群。將53例IM患兒隨機分為兩組，對照組25例和干預治療組28例，兩組均給予常規處理，IM干預組在常規治療的基礎上加用匹多莫德，予以比較。結果①與健康組比較，IM患兒CD3+、CD8+淋巴細胞上升明顯（P＜0.01），CD4+淋巴細胞和CD4+/CD8+比值降低明顯（P＜0.01）；②匹多莫德治療兩周后，CD3+、CD8+淋巴細胞比例降低，CD4+淋巴細胞比例及CD4+/CD8+比值明顯升高，差異有顯著性（P＜0.01）；③兩組IM患兒的熱程、咽峽炎緩解時間、淋巴結腫大消退時間及住院日均有顯著差異（P＜0.05）。結論匹多莫德能改善IM患兒的細胞免疫功能，且有良好臨床療效。

傳染性單核細胞增多癥；T淋巴細胞亞群；匹多莫德

傳染性單核細胞增多癥（infectious mononucleosis，IM）主要是由EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）感染導致的急性傳染病，其發病率呈上升趨勢，臨床表現以發熱、咽峽炎、頸淋巴結及肝脾腫大，外周血可見淋巴細胞增加且出現異型淋巴細胞等為特征[1]，可進展為慢性活動性EBV感染（CAEBV）和EBV相關噬血細胞性淋巴組織細胞增生癥（EBV-HLH），并與部分惡性腫瘤相關。這些與EB病毒感染后的細胞免疫功能缺陷有關。目前該病無特效治療，抗病毒及中藥治療效果并不明確，且部分藥物副作用明顯，故臨床上以對癥和支持治療為主。本研究將我院的IM住院患兒作為觀察對象，使用流式細胞儀檢測IM患兒外周血的淋巴細胞亞群，并采用細胞免疫調節劑匹多莫德對部分IM患兒進行干預治療，探討其對T淋巴細胞亞群以及臨床療效的影響，現報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取2012年3月～2014年2月在我院兒內科住院治療的53例IM患兒作為觀察對象，符合IM的診斷標準[1]，均有典型臨床癥狀體征：發熱、咽峽炎和頸淋巴結腫大，血清EBV-IgM陽性。其中男31例，女22例，年齡1～12歲，隨機分為兩組：IM干預組（匹多莫德干預組）28例，平均（5.5±2.9）歲和對照組25例，平均（5.9±3.2）歲。兩組患兒在性別、年齡、病程以及癥狀特點等方面的差異無顯著性（P＞0.05），具有可比性，且近期均未使用過皮質激素或免疫調節劑。隨機抽取本院兒保門診體檢兒童20名作為健康對照組，男12例，女8例，年齡1～12歲，平均（6.0±2.5）歲，與上述兩組年齡性別比較差異均無顯著性（P＞0.05）。三組兒童均否認既往有免疫低下及過敏性疾病史和過敏性疾病家族史。

1.2實驗方法

IM干預組與IM對照組分別在入院時和治療后的2周時間各采集靜脈血1次，而健康對照組只采集靜脈血1次，采血量2～3 mL，均使用EDTA作為抗凝劑，然后用美國Beckman-Coulter EPICSXL型流式細胞儀分別測定三組兒童的T淋巴細胞亞群，通過測定總T淋巴細胞（CD3+）、T輔助細胞（CD4+）、T抑制細胞（CD8+）以及CD4+/CD8+比值，來分析IM患兒的細胞免疫功能改變。

1.3治療方法

IM干預組和IM對照組患兒在入院后均予以對癥與支持治療。IM干預治療組加用匹多莫德口服液（DOPPELFARMACEUTICISRL，批準文號：H20090934）口服治療，每日兩次，一次0.4 g，共服兩周。

1.4觀察指標

觀察兩組IM患兒治療前與健康兒童的CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+比值，以及這兩組患兒在治療兩周后上述指標的變化；觀察兩組IM患兒退熱時間、咽峽炎改善時間、頸淋巴結腫大恢復（直徑縮小一半）時間和住院天數。

1.5統計學處理

采用SPSS19.0統計學軟件分析，計量資料以均值±標準差（x±s）表示；采用方差分析與t檢驗，（表1組間采用LSD法進行兩兩比較；表2治療前后比較用配對t檢驗），P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1T淋巴細胞亞群比較

兩組IM患兒治療前同健康組兒童比較，各種T淋巴細胞比例均有顯著變化（P＜0.01），IM對照組與干預組患兒在治療前CD3+、CD4+、CD8+與CD4+/CD8+比值無差異（P＞0.05），見表1；IM對照組患兒治療前后的CD3+、CD4+、CD8+與CD4+/CD8+比值差異無統計學意義（P＞0.05），見表2；IM干預組患兒治療后的CD3+、CD8+下降，CD4+與CD4+/CD8+比值升高，差異有統計學意義（P＜0.01），見表2。

表1　兩組IM患兒治療前與健康兒童的T淋巴細胞亞群監測結果比較（x±s）

表2　IM兩組患兒治療前后的T淋巴細胞亞群監測結果比較（x±s）

2.2臨床恢復情況

與IM對照組相比，IM干預治療組臨床癥狀改善與體征緩解要快（P＜0.05），住院時間縮短（P＜0.01），見表3。

表3　兩組臨床癥狀、體征緩解時間及住院日比較（x±s，d）

2.3不良反應

所有患兒均未發現與藥物相關的明顯不良反應。

3　討論

EBV屬于皰疹病毒科γ亞科，在小兒感染中非常普遍。超過90%的兒童感染過EB病毒，亞洲兒童陽性率高于西方兒童。EB病毒感染人體，以B淋巴細胞作為靶細胞，B淋巴細胞受攻擊后其抗原性發生改變，引發T淋巴細胞的防御性反應，并形成細胞毒效應，從而殺傷受到感染的B淋巴細胞。通常情況下，由受CD8+T細胞介導的強大免疫反應所控制[2]，EB病毒感染兒童可無明顯癥狀。部分兒童可有發熱、咽峽炎、肝脾腫大、淋巴結腫大或異常淋巴細胞增生等傳染性單核細胞增多癥的臨床表現，嚴重的可因EB病毒感染T淋巴細胞或自然殺傷細胞（NK）的異常全身克隆擴增，出現慢性活動性EB病毒感染（CAEBV）、嗜血細胞增多癥、多器官衰竭而危及生命。EB病毒感染導致細胞免疫功能損傷也是發生腫瘤（如Burkitt淋巴瘤、鼻咽癌、霍奇金淋巴瘤等）的重要原因。EB病毒的負荷量與IM疾病嚴重程度無相關性[3]。監測患兒的細胞免疫功能變化，對了解疾病的發展和預后有重要作用。

T淋巴細胞來源于骨髓中的多能干細胞，在胸腺內發育成熟，其后定居于淋巴結、脾臟與黏膜相關淋巴組織等周圍免疫器官，發揮著細胞免疫及免疫調節等作用。CD4是輔助性T細胞（Th）的表面標志，具有輔助細胞免疫與體液免疫的作用；CD8則是細胞毒性T細胞（Tc）的表面標志，可直接殺傷靶細胞或是誘導靶細胞凋亡；而CD3則是所有T細胞的表面標志。T淋巴細胞亞群數量的穩定是維護人體的免疫功能的重要保障。EB病毒感染容易引起患者的免疫調節功能紊亂[4]。監測IM患兒T淋巴細胞亞群比例的變化，可以有效評價IM患兒的細胞免疫狀態、以此來判定IM患兒的病情嚴重程度[5]。本研究中檢測了EB病毒感染IM患兒急性期時淋巴細胞亞群的數量，在與健康兒童對照組進行比較時，發現IM患兒急性期CD3+、CD8+比健康兒童明顯升高且有顯著性差異（P＜0．01），CD4+、CD4+/CD8+比值較健康兒童明顯降低且有顯著性差異（P＜0．01）。可見EB病毒感染IM患兒是處于免疫抑制狀態，與國內外較多文獻相一致[6-8]，也為臨床進行免疫調節治療提供了理論依據。

匹多莫德是一種全新合成的二肽，化學名稱：（R）-3-[（S）-（5-氧代-2-吡咯烷基]羰基]-四氫噻唑-4-羧酸，是目前唯一具有廣泛生物活性的口服免疫促進劑。匹多莫德有益于人體免疫，具有促進先天性和適應性免疫反應增強的活性[9]。它能促進中性粒細胞與巨噬細胞的吞噬作用以及趨化和殺傷作用；又可促進淋巴細胞的增殖，尤其在免疫功能低下時促進降低的CD4+與CD8+比值回升至正常；同時能激發γ干擾素與IL-2的產生來促進細胞免疫反應。目前臨床上較多用于反復呼吸道感染性疾病，促進機體的免疫調節并取得明顯臨床療效[10，11]。鮮見有用于IM患兒，本次主要研究該藥物對IM患兒的細胞免疫促進作用及臨床癥狀的恢復情況。結果顯示，匹多莫德在干預治療IM兩周以后，CD3+與CD8+T淋巴細胞比例顯著下降，而CD4+T淋巴細胞數量與CD4+/CD8+比值顯著上升，較治療前的數據比較，差異有統計學意義（P＜0．01），而對照組同期變化不顯著（P＞0．05）。匹多莫德治療IM患兒在臨床癥狀和體征恢復上同樣有顯著效果，匹多莫德治療組比對照組退熱時間、咽峽炎緩解時間、頸淋巴結縮小等癥狀和體征緩解快（P＜0．05），且住院日明顯縮短（P＜0．01）。目前國內對于IM的治療，臨床上有用更昔洛韋、單磷酸阿糖腺苷等抗病毒治療[12，13]或用中藥治療[14]，雖都取得一定療效。但都缺乏大規模、多中心的RCT研究；且前者抗病毒藥物的不良反應多種多樣，多系統受累及[15]；中藥抗EB病毒作用的靶點尚不清楚，以及對細胞免疫紊亂的調節作用尚不明確。而使用匹多莫德干預治療，可有效改善IM患兒細胞免疫功能，并且有效緩解臨床癥狀與體征變化，未見明顯不良反應，治療安全有效，可以作為IM的首選治療用藥之一[16-18]。當然本研究也有不足之處，未能做好長期的隨訪以及樣本數不夠大，還不能得出可以減少腫瘤發生的結論，有待繼續研究。

[1]胡亞美，江載芳．諸福棠實用兒科學[M]．第7版．北京：人民衛生出版社，2002：821-825．

[2]Hatton OL1，Harris-Arnold A，Schaffert S，et al．The interplay between Epstein-Barr virus and B lymphocytes：implications for infection，immunity，and disease[J]．Immunol Res，2014，58（2-3）：268-276．

[3]John Odame，Joan Robinson，Nasser Khodai-Booran，et al．Correlates of illness severity in infectious mononucleosis[J]．Can J Infect Dis Med Microbiol，2014，25（5）：277-280．

[4]Hislop AD，Palendira U，Leese AM，et al．Impaired Epstein-Barr virus-specific CD8++T-cell functionin X-linked lymphoproliferative disease is restricted to SLAM family-positive b-cell targets[J]．Blood，2010，116（17）：3249-3257．

[5]劉永革，劉春燕.兒童傳染性單核細胞增多癥淋巴細胞亞群的變化及意義[J].內科，2011，6（3）：214-215.

[6]王慧燕，田可港，浮苗，等.傳染性單核細胞增多癥患兒血漿sHLA-G及外周血淋巴細胞亞群檢測[J].中華醫院感染學雜志，2012，22（5）：901-906.

[7]王強，王佐鳳，曹玫，等.TLR2、TLR9及T細胞亞群在傳染性單核細胞增多癥患兒中的變化及意義[J].中國小兒血液與腫瘤雜志，2013，18（6）：267-271.

[8]Artur Sulika，Elzbieta Oldaka，Anna Krotena，et al．Epstein-Barr virus effect on frequency of functionally distinct T cell subsets in children with infectious mononucleosis[J]. Advances in Medical Sciences，2014，59（2）：227-231．

[9]Zuccotti GV，Mameli C.Pidotimod：The past and the present[J].Ital J Pediatr，2013，（39）：75.

[10]朱子東，王躍生，張敬，等.匹多莫德治療支原體肺炎對T淋巴細胞功能的影響[J].中國實用醫刊2014，41（2）：113-114.

[11]楚文英，王俊卿.匹多莫德口服液治療小兒反復呼吸道感染臨床療效觀察[J].中國現代醫生，2014，52（13）：132-134.

[12]何英，孫廣超.更昔洛韋治療傳染性單核細胞增多癥有效性的Meta分析[J]．廣州醫學院學報，2008，36（5）：46-51．

[13]江山林.單磷酸阿糖腺苷治療兒童傳染性單核細胞增多癥療效分析[J].蚌埠醫學院學報，2014，19（5）：619-621.

[14]甄小芳，幺遠，秦麗娜，等.中藥治療小兒EB病毒感染療效評價及免疫干預的研究[J].中國中西醫結合雜志，2014，34（2）：167-173.

[15]方瑜.更昔洛韋治療兒童傳染性單核細胞增多癥不良反應觀察[J].中國基層醫藥，2012，9（8）：1233-1234.

[16]孫雨，王華，胡青華，等.不同年齡兒童傳染性單核細胞增多癥臨床特征分析[J].臨床誤診誤治，2013，26（11）：65-68.

[17]王晉妮，雷中勁，張冷.兒童傳染性單核細胞增多癥82例診治分析[J].醫學綜述，2009，15（15）：2362-2363.

[18]謝倫燕，石明芳.兒童傳染性單核細胞增多癥47例臨床分析[J].臨床和實驗醫學雜志，2009，8（11）：93，96.

Clinical efficacy of pidotimod in the treatment of infectious mononucleosis and its impact upon T-lymphocyte Subgroups

HUANG ZhengyongWU TiefengQIAN Cai

Department of Pediatrics，Wenzhou Chinese and Western Integrative Medicine Hospital（the Affiliated to Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine），Wenzhou325001，China

Objective To study the clinical efficacy of pidotimod in the treatment of infectious mononucleosis（IM）and its impact upon T-lymphocyte subgroups.Methods Flow cytometry was adopted to detect peripheral blood lymphocyte subgroups in 53 IM children patients and 20 healthy children.The 53 IM children patients were randomly divided into control group（n=25）and intervention therapy group（n=28）.Conventional therapy were performed in both groups，while intervention group+and CD8+lymphocyte were significantly elevated（P<0.01）in the IM children，while the level of CD4+lymphocyte and the CD4+/CD8+ratio decreased significantly（P<0.01）；（2）After pidotimod treatment for 2 weeks，ratios of both CD3+and CD8+lymphocyte were decreased，while the level of CD4+lymphocytes and CD4+/CD8+ratio increased obviously.The differences were statistically significant（P<0.01）；（3）The differences of the fever course，angina remission period，lymph node enlargement regression period and hospitalization days between two groups were all statistically significant（P<0.05）.Conclusion Pidotimod can improve the cellular immune function in IM children as well as holds a favorable clinical effects.

pidotimod-combined therapy additionally.Comparison was then carried out.Results（1）When compared with healthy children，the levels of CD3

Infectious mononucleosis；T-lymphocytes subgroups；Pidotimod

R725.1

A

1673-9701（2015）07-0004-04

浙江省醫藥衛生科技計劃項目（2012KYB193）

（2014-11-21）