毛葉三條筋化學成分的研究

楊玉春， 伍賢學， 孟艷林， 秦 穎， 夏從芳， 胡秋芬， 李銀科*

（1.玉溪師范學院資源環境學院，云南玉溪653100；2.云南民族大學化學與生物技術學院，民族藥資源化學國家民委-教育部重點實驗室，云南昆明650500）

毛葉三條筋化學成分的研究

楊玉春1，2， 伍賢學1， 孟艷林2， 秦 穎2， 夏從芳2， 胡秋芬2， 李銀科1*

（1.玉溪師范學院資源環境學院，云南玉溪653100；2.云南民族大學化學與生物技術學院，民族藥資源化學國家民委-教育部重點實驗室，云南昆明650500）

目的 研究毛葉三條筋Lindera caudata（Nees）Hook.f.的化學成分。方法 毛葉三條筋提取液的分離純化采用硅膠、HPLC色譜等技術進行，然后根據所得化合物的理化性質及波譜數據進行鑒定。結果 從中分離鑒定出6個化合物，分別為（1R，2S，5R，6S）-2-（3，4-methylenedioxyphenyl）-6-（4-hydroxy-3，5-dimethoxyphenyl）-3，7-dioxabicyclo［3.3.0］octane（1）、（1R，2S，5R，6S）-6-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-2-（3，4-methylenedioxyphenyl）-3，7-dioxabicyclo［3.3.0］octane（2）、epipinoresinol（3）、pinoresinol（4）、medioresinol（5）、（-）de-4′，4″-O-dimethylepimagnolin A（6）。結論 所有化合物均為首次從該植物中分離得到。

毛葉三條筋；化學成分；分離鑒定

毛葉三條筋Lindera caudata（Nees）Hook.f.又名黃脈山胡椒、樸香根、芽三英 （傣名），為樟科山胡椒屬植物，是西雙版納人民常用的植物藥，生長于海拔700～2 300 m的灌叢、疏林、路邊、林緣等處，資源豐富，收錄于 《中藥大辭典》［1］，具有止血生肌，理氣止痛之功效，也可治療跌打扭傷、外傷瘀腫、出血、胸痛咳嗽等。山胡椒屬植物的主要成分有生物堿、黃酮、萜類、脂肪酸、木質素和鞣質等［2-7］，但目前對毛葉三條筋化學成分的研究較少，僅報道有十八烷醇和4，5-dihydrohumenol A［8］。本實驗應用硅膠、HPLC色譜等技術，從該植物80%乙醇提取液中分離得到6個化合物，

具體結構見圖1。

圖1 化合物1～6的化學結構式Fig.1 Chem icaIstructures of com pounds1-6

1 儀器與材料

1.1 儀器 VG AUTO Spec-3000質譜儀（英國VG公司）；Bruker AVANCEⅢ-400核磁共振儀（德國Bruker公司）；Agilent 1100 HPLC色譜儀、ZORBAX SB-C18反相柱（9.4 mm×250 mm）、LH-20凝膠柱（美國Agilent公司）；EYELA N1100旋轉蒸發儀 （東京理化器械株式會社）；SHZ-DⅢ循環水真空泵 （上海道京儀器有限公司）；SK5210HP超聲波清洗器 （上海滬粵明科學儀器有限公司）；流動相過濾裝置，包括0.45μm微孔濾膜 （美國頗爾公司）。MS和NMR由云南民族大學測定。

1.2 試劑 100～200目、200～300目硅膠、GF254硅膠板 （100 mm×100 mm） （青島海洋化工有限公司）；MCI-gel CHP-20P（日本三菱化學株式會社）；Sephadex LH-20凝膠（美國GE公司）；顯色劑為5%H2SO4-乙醇溶液。乙醇、甲醇、石油醚、乙酸乙酯均為工業純，乙腈、四氫呋喃均為分析純 （國藥集團化學試劑有限公司）；超純水（自制）。

1.3 材料 毛葉三條筋于2012年3月購自云南省普洱市景谷縣，經云南民族大學化學及生物技術學院陳毅堅教授鑒定為毛葉三條筋Lindera caudata（Nees）Hook.f.，標本保存于云南民族大學民族藥資源化學國家民委教育部重點實驗室。

2 提取分離

取干燥的毛葉三條筋20.0 kg，粉碎后用80%乙醇溶液25 L室溫浸泡2～3 d，超聲提取4次，每次30 min，過濾，減壓回收溶劑，常溫下反復浸泡，超聲提取5～6次，合并后得到浸膏1.5 kg。浸膏用粗硅膠 （100～200目）3.0 kg拌樣，烘干，上硅膠柱層析 （100～200目，10.0 kg），石油醚-乙酸乙酯1：0（I）、20：1（Ⅱ）、9：1（Ⅲ）、4：1（Ⅳ）、1：1（Ⅴ）、0：1（Ⅵ）梯度洗脫，分成6個部分。

經溶樣分析，Ⅰ～Ⅲ不溶于甲醇，Ⅳ、Ⅴ易溶，Ⅵ極性較大，在大致對比Ⅳ、Ⅴ后，最終選擇Ⅴ進行分離，即石油醚：乙酸乙酯為1：1的部分。甲醇溶解后，經MCI-gel CHP-20P柱處理，0.45 μm微孔濾膜過濾，再經ZORBAX SB-C18反相柱（9.4 mm×250 mm），75%甲醇為流動相，體積流量為8.0 mL/min，分為六段。在調配流動相比例后，再經Agilent-C18反相柱，以3.0 mL/min的體積流量對以上六段進行分析，發現第一段為雜質，繼續調節流動相配比，HPLC柱對后五段進行分離純化，得到化合物1（18.3 mg）、2（12.9 mg）、3（13.1 mg）、4（11.8 mg）、5（9.5 mg）、6（27.1 mg）。

3 結構鑒定

化合物1：無色膠狀物。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.88（1H，d，J=1.5 Hz，H-2），6.85（1H，dd，J=8.0，1.5 Hz，H-6），6.78（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），6.65（2H，s，H-2，6），5.92（1H，s，H-O-CH2-O），4.71（2H，t，J=5.4 Hz，H-7，7′），4.24（1H，m，H-9），3.86（1H，m，H-9′），3.83（6H，s，3，5-OCH3），3.10（2H，m，H-8，8′）。13C-NMR（400MHz，CD3OD）δ：149.3（C-

3，3′，5），148.5（C-4′），136.4（C-4），136.1（C-1′），133.0（C-1），120.6（C-6′），108.9（C-5′），107.5（C-2′），104.4（C-2，6），102.3（C-O-CH2-O），87.5（C-7），87.2（C-7′），72.7（C-9′），72.6（C-9），56.7（3，5-OCH3），55.5（C-8，8′）。以上數據與文獻 ［9］一致，故鑒定化合物1為 （1R，2S，5R，6S）-2-（3，4-methylenedioxyphen-yl）-6-（4-hydroxy-3，5-dimethoxyphenyl）-3，7-dioxabicyclo［3.3.0］octane。

化合物2：1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.88（1H，brs，H-2′），6.85（1H，m，H-2），6.83（1H，m，H-5′），6.81（1H，m，H-6′），6.78（1H，m，H-6），6.75（1H，m，H-5），5.92（1H，s，H-OCH2-O），4.70（1H，m，H-7），4.24（1H，m，H-7′），4.19（2H，m，H-9，9′），3.85（2H，m，H-9，9′），3.84（3H，s，3-OCH3），3.11（2H，m，H-8，8′）。13C-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：149.3（C-3′），149.1（C-3），148.5（C-4′），147.3（C-4），136.5（C-1′），133.7（C-1），120.6（C-6′），120.0（C-6），116.0（C-5），110.9（C-2），108.9（C-5′），107.5（C-2′），102.3（C-O-CH2-O），87.6（C-7），87.4（C-7′），72.7（C-9′），72.6（C-9），56.4（3-OCH3），55.5（C-8，8′）。以上數據與文獻 ［10］一致，故鑒定化合物2為 （1R，2S，5R，6S）-6-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-2-（3，4-methylenedioxyphenyl）-3，7-dioxabicyclo［3.3.0］octane。

化合物3：白色無定型粉末。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.96（1H，brs，H-2′），6.94（1H，d，J=1.8 Hz，H-2），6.82（1H，m，H-6），6.80（1H，m，H-6′），6.78（1H，m，H-5），4.85（1H，d，J=6.1 Hz，H-7′），4.40（1H，d，J=7.0 Hz，H-7），4.10（1H，d，J=9.4 Hz，H-9），3.85（3H，s，3-OCH3），3.84（3H，s，3′-OCH3），3.78（1H，d，J=8.6 Hz，H-9′），3.37（1H，m，H-8′），3.27（1H，d，J=8.6 Hz，H-9′），2.92（1H，q，H-8）。13C-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：149.3（C-3），148.8（C-3′），147.3（C-4），146.5（C-4′），133.8（C-1），131.3（C-1′），120.1（C-6），119.3（C-6′），116.0（C-5），115.9（C-5′），110.8（C-2），110.4（C-2′），89.4（C-7），83.4（C-7′），71.9（C-9），70.6（C-9′），56.3（3，3′-OCH3），55.6（C-8），51.2（C-8′）。以上數據與文獻 ［11］一致，故鑒定化合物3為epipinoresinol。

化合物4：粘稠油狀物。1H-NMR（400 MHz， CD3OD）δ：6.91（2H，brs，H-2，2′），6.76（2H，m，H-6，6′），6.74（2H，m，H-5，5′），4.66（2H，brs，H-7，7′），4.20（2H，m，H-9，9′），3.86（6H，s，3，3′-OCH3），3.84（2H，m，H-9，9′），3.09（2H，brs，H-8，8′）。13C-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：149.1（C-3，3′），147.2（C-4，4′），133.8（C-1，1′），120.1（C-6，6′），116.1（C-5，5′），110.9（C-2，2′），87.4（C-7，7′），72.6（C-9，9′），56.4（3，3′-OCH3），55.3（C-8，8′）。以上數據與文獻［12］一致，故鑒定化合物4為pinoresinol。

化合物5：白色粉末。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.95（1H，d，J=1.8 Hz，H-2），6.80（1H，dd，J=8.0，1.8 Hz，H-6），6.77（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），6.65（2H，s，H-2′，6′），4.71（2H，m，H-7，7′），4.26（2H，m，H-9，9′）3.85（3H，s，3-OCH3），3.84（6H，s，3′，5′-OCH3），3.11（2H，m，H-8，8′）。13C-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：149.3（C-3′，5′），149.1（C-3），147.3（C-4），133.7（C-1），133.1（C-1′），120.0（C-6），116.0（C-5），110.9（C-2），104.3（C-2′，6′），87.6（C-7′），87.4（C-7），72.7（C-9′），72.6（C-9），56.7（3′，5′-OCH3），55.5（C-8′），55.3（C-8）。以上數據與文獻 ［13］一致，故鑒定化合物5為medioresinol。

化合物6：無色膠狀物。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.95（1H，d，J=1.8 Hz，H-2），6.81（1H，m，H-6），6.78（1H，m，H-5），6.65（2H，s，H-2′，6′），4.86（1H，d，J=6.0 Hz，H-7′），4.41（1H，d，J=7.0 Hz，H-7），4.11（1H，d，J=9.4 Hz，H-9），3.86（3H，s，3-OCH3），3.84（6H，s，3′，5′-OCH3），3.78（1H，m，H-9′），3.41（1H，m，H-8′），3.29（1H，m，H-9′），2.95（1H，m，H-8）。13C-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：149.3（C-3），149.1（C-3′，5′），147.3（C-4），133.8（C-1），130.6（C-1′），120.0（C-6），116.0（C-5），110.8（C-2），103.9（C-2′，6′），89.5（C-7），83.6（C-7′），71.9（C-9），70.6（C-9′），56.7（3′，5′-OCH3），55.5（C-8），51.2（C-8′）。以上數據與文獻 ［9］一致，故鑒定化合物6為 （-）de-4′，4″-O-dimethylepimagnolin A。

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Chem icaIconstituents from Lindera caudata（Nees）Hook.f.

YANG Yu-chun1，2， WU Xian-xue1， MENG Yan-lin2， QIN Yin2， XIA Cong-fang2， HU Qiu-fen2，LIYin-ke1*

（1.Gollgeof Resourceand Environment，YuxiNormal University，Yuxi653100，Ghina；2.SchoolofGhemistry and Biotechnology，Yunnan Minzu University；Key Laboratory of Ghemistry in Ethnic Medicinal Resources，State Ethnic Affairs Gommission and Ministry of Education，Kunming 650500，Ghina）

AIM To study the chemical constituents from Lindera caudata（Nees）Hook.f..METHODS

Lindera caudata（Nees）Hook.f；chemical constituents；isolation and identification

R284.1

A

1001-1528（2015）11-2455-04

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.11.026

2014-10-09

云南省科技廳應用基礎研究計劃應用基礎研究青年項目 （2012FD056）；云南民族大學化學與生物技術學院2013年大學生（碩士組）SRT創新性實驗項目（2013HXSRTY09）

楊玉春（1989—），男，碩士，從事天然產物的研究。E-mail：yychun214@126.com

*通信作者：李銀科 （1984—），男，碩士，副教授，從事天然產物的研究。E-mail：linkli609@163.com

The isolation and purification of L.caudata extractwere carried outon silica and HPLC column.The structures of isolated compoundswere then elucidated on the basis of physicochemical properties and spectral data.RESULTS Six compounds were isolated from this plant and identified as（1R，2S，5R，6S）-2-（3，4-methylenedioxyphenyl）-6-（4-hydroxy-3，5-dimethoxyphenyl）-3，7-dioxabicyclo［3.3.0］octane（1），（1R，2S，5R，6S）-6-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-2-（3，4-methylenedioxyphenyl）-3，7-dioxabicyclo［3.3.0］octane（2），epipinoresinol（3），pinoresinol（4），medioresinol（5），（-）de-4′，4″-O-dimethylepimagnolin A（6）.

CONCLUSION All compounds are isolated from this plant for the first time.