姜黃素對大鼠缺血再灌注損傷脊髓的抗氧化作用

任宗凱河南永城市人民醫(yī)院骨科 永城 476600

姜黃素對大鼠缺血再灌注損傷脊髓的抗氧化作用

任宗凱
河南永城市人民醫(yī)院骨科 永城 476600

目的 探討姜黃素對缺血再灌注損傷脊髓組織的抗氧化作用。方法 40只健康雄性Wistar大鼠隨機分為假手術組、模型組、姜黃素高劑量組和姜黃素低劑量組，根據分組不同進行相應處理后，采用腹主動脈缺血法制備大鼠脊髓缺血再灌注損傷模型，測定各組大鼠脊髓組織中SOD、MDA表達水平。結果 姜黃素高劑量和姜黃素低劑量組大鼠脊髓組織中SOD均高于模型組，而MDA均低于模型組（P＜0.05）。姜黃素高劑量組脊髓組織中SOD高于姜黃素低劑量組，而MDA低于姜黃素低劑量組（P＜0.05）。結論 姜黃素對缺血再灌注損傷后脊髓組織具有抗氧化作用。

姜黃素；脊髓；缺血再灌注損傷；抗氧化作用；超氧化物歧化酶；丙二醛

脊髓缺血再灌注損傷的發(fā)生可能與機體自由基過剩、細胞凋亡加劇、炎癥反應發(fā)生等有關［1］。姜黃素已被證實在心、腦、肝、腎等器官或組織中具有對缺血再灌注損傷的保護作用［2］。為探討姜黃素在脊髓缺血再灌注損傷這一病理生理過程中的作用，本文利用大鼠脊髓缺血再灌注損傷模型觀察姜黃素對抗氧化相關指標的影響。

1 材料與方法

1.1 研究對象 健康雄性Wistar大鼠40只，體質量260～330g，動物許可證號為SCXK（豫）2014-0001，購自河南省實驗動物中心。

1.2 藥品與試劑 姜黃素購自美國Sigma公司；考馬斯亮藍蛋白檢測試劑盒、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）檢測試劑盒、丙二醛（malondialdehyde，MDA）檢測試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。

1.3 動物分組及給藥方法 40只健康雄性Wistar大鼠隨機分為假手術組、模型組、姜黃素高劑量組和姜黃素低劑量組，各組分別給予相應處理：姜黃素高、低劑量組大鼠于造模前15min分別給予50mg/kg姜黃素+0.9％NaCl溶液和25mg/kg姜黃素+0.9％NaCl溶液，每只大鼠注射藥液量按10mL/kg計算；假手術組和模型組大鼠于術前均給予同體積0.9％NaCl溶液。

1.4 模型制備及指標檢測 大鼠脊髓缺血再灌注損傷模型制備采用改良后的腹主動脈缺血法［3］，缺血時間45min，再灌注時間8h，其中假手術組僅進行腹主動脈分離術，實驗結束后麻醉處死大鼠，取第3～5腰椎處的脊髓組織，用0.9％ NaCl溶液制成組織勻漿，低溫（4℃）離心10min，離心速度4 000r·min-1，取上清液，SOD采用嘌呤氧化酶法測定，MDA采用硫代戊巴比妥法測定，蛋白測定用考馬斯亮藍法。

1.5 統計學處理 采用SPSS 17.0進行數據處理，計量資料以均數±標準差表示，采用單因素方差分析和LSD-t檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結果

姜黃素高、低劑量組大鼠脊髓組織中SOD均高于模型組，而MDA均低于模型組（P＜0.05）。姜黃素高劑量組脊髓組織中SOD高于姜黃素低劑量組，而MDA低于姜黃素低劑量組（P＜0.05）。見表1。

表1 各組大鼠脊髓組織中SOD、MDA水平比較 （±s）

表1 各組大鼠脊髓組織中SOD、MDA水平比較 （±s）

3 討論

脊髓缺血多發(fā)于脊柱骨折、脊髓內微創(chuàng)手術、主動脈瘤手術等過程中，可能導致機體一過性或永久性損傷。因此，臨床上將恢復血流作為首要目標，但在進一步的基礎或臨床觀察中發(fā)現，血流剛開始恢復時，機體的損傷反而加重，這種現象稱為脊髓的缺血再灌注損傷，可能是建立在細胞凋亡加劇、自由基過剩、炎癥反應發(fā)生、鈣超載的病理生理學過程的基礎上［1］。姜黃素提取自姜科姜黃屬植物姜黃根莖，屬于酚類色素，在心、腦、肝、腎等器官或組織中具有對缺血再灌注損傷的保護作用［2］。付健等［4］發(fā)現，姜黃素預處理后能夠影響大鼠缺血再灌注損傷脊髓組織中NF-κB和Hsp70的表達，進而抑制損傷早期出現的炎癥反應。本課題選擇了SOD和MDA作為姜黃素抗氧化作用評估的觀察指標。

SOD是一種氧自由基清除劑，正常情況下，一定水平的SOD能夠維持機體的平衡，在清除過剩自由基的同時又不至于對機體造成損傷。一旦SOD水平急劇下降，體內過剩的自由基就會對機體造成傷害［5］。因此，可通過提高體內SOD水平發(fā)揮抗氧化作用。MDA是機體脂質過氧化的產物之一，體內丙二醛水平上升提示過氧化程度的加重，而且過量的MDA同時會進一步加劇體內蛋白質、核酸等的交聯聚合，具有一定的細胞毒性［5］。本研究結果顯示，姜黃素高、低劑量組大鼠脊髓組織中SOD均高于模型組，而MDA均低于模型組，提示姜黃素具有一定的抗氧化作用；姜黃素高劑量組脊髓組織中SOD高于姜黃素低劑量組，而MDA低于姜黃素低劑量組，提示在一定劑量范圍內，姜黃素的用藥量越大，其抗氧化作用可能越強。總之，姜黃素在大鼠脊髓缺血再灌注損傷過程中具有一定的抗氧化作用，且這種作用具有一定的劑量依賴性，姜黃素可能通過這種抗氧化作用發(fā)揮減輕脊髓缺血再灌注損傷的作用，但尚需進一步研究證實。

［1］袁元杏，劉尚禮，黃彥清，等.脊髓損傷后不同免疫條件下血清IL-6、IL-8、TNF-α含量的變化與意義［J］.臨床骨科雜志，2008，11（3）：195-198.

［2］李冠，夏振.姜黃素對大鼠腦缺血再灌注損傷炎癥反應和血腦屏障通透性的作用研究［J］.現代中西醫(yī)結合雜志，2015，24（8）：814-816；877.

［3］劉輝.白藜蘆醇對大鼠脊髓缺血再灌注損傷組織的保護作用［J］.中國實用神經疾病雜志，2014，17（19）：99-100.

［4］付健，韋波，范洪偉，等.姜黃素對大鼠脊髓缺血再灌注損傷后NF-κB和Hsp70的表達研究［J］.時珍國醫(yī)國藥，2011，22（7）：1 629-1 631.

［5］徐凈.脊髓組織缺血再灌注早期MDA和SOD的動態(tài)變化［J］.西南軍醫(yī)，2008，10（5）：12-13.

（收稿2014-09-26）

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1673-5110（2015）11-0059-02