UPLC法測定酮康唑制劑中酮康唑的含量

龐 滂楊曉莉牛建功

（1 西安楊森制藥有限公司，陜西 西安 710043；2 陜西省食品藥品檢驗所，陜西 西安 710065）

UPLC法測定酮康唑制劑中酮康唑的含量

龐 滂1楊曉莉2牛建功1

（1 西安楊森制藥有限公司，陜西 西安 710043；2 陜西省食品藥品檢驗所，陜西 西安 710065）

目的建立酮康唑系列不同制劑產品含量測定的UPLC方法。方法采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱（2.1×100 mm，1.7 μm），0.34%硫酸四丁基氫銨溶液-乙腈為流動相，梯度洗脫，流速為0.3 mL/min，檢測波長為230 nm，柱溫40 ℃。結果酮康唑對照品溶液線性范圍為：0.1～150 μg/mL，r=0.9999（n=9）；片劑：回收率為98.33%～99.80%，RSD為0.43%（n=6）；乳膏劑：回收率為99.45%～102.24%，RSD為1.21%（n=6）；2%洗劑：回收率為98.61%～101.24%，RSD為1.08%（n=6）。結論UPLC法簡便、靈敏、準確、重復性好，可用于酮康唑系列不同制劑產品的質量控制。

酮康唑；超高效液相色譜法；含量

酮康唑系列產品主要包括酮康唑片劑、酮康唑乳膏和酮康唑洗劑，均為抗真菌類藥物，其主要成分都為酮康唑[1-3]。采用超高效液相色譜法（UPLC）同時測定不同制劑的酮康唑產品中酮康唑的含量，結果滿意，該法可用于控制制劑的質量。

1 儀器與試藥

Waters ACQUITY型UPLC，酮康唑對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為100294-200602，校正因子：0.999）；硫酸四丁基氫銨（TBAHS，分析純）；乙腈（色譜純）；酮康唑片劑（西安楊森制藥有限公司，批號為110902514）；酮康唑乳膏（西安楊森制藥有限公司，批號為111208542）；酮康唑洗劑（西安楊森制藥有限公司，批號為111116945）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件。色譜柱：Waters ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱（2.1× 100 mm，1.7 μm）；流動相：0.34%硫酸四丁基氫銨溶液-乙腈為流動相，梯度洗脫（梯度表見表1）；柱溫：40 ℃；流速：0.3 mL/min；檢測波長：230 nm；進樣量：5 μL。

表1 梯度表

2.2 溶液制備：取酮康唑對照品適量，精密稱定，加甲醇制成100 μg/mL的溶液作為對照品溶液。分別取酮康唑片劑、乳膏劑和洗劑適量，按規格用甲醇制成100 μg/mL的溶液作為酮康唑制劑的供試品溶液。按照處方及工藝制備不含酮康唑的空白樣品適量，照上述方法制備成空白輔料溶液。

2.3 方法學考察

2.3.1 專屬性試驗：陰性對照品溶液測定結果表明，在與酮康唑保留時間相應位置上無吸收，表明其他成分對本品的酮康唑含量測定無干擾，方法專屬性良好（圖1）。

圖1 超高效液相色譜圖[1. 片劑（Tablet）；2. 乳膏劑（Cream）；3. 2%洗劑（2% Lotion）；4. 酮康唑（Ketoconazole）；A.對照品（Reference substance）；B. 供試品（sample）；C. 空白輔料（Blank）]

2.3.2 線性關系考察：用甲醇準確配制1 mL中含酮康唑1.25 mg的儲備液，然后用甲醇逐步稀釋至150、125、100、50、25、10、5、1、0.1 μg/mL系列溶液，進樣量5 μL。按照上述色譜條件測定峰面積，以峰面積對溶液質量濃度進行線性回歸，得回歸方程Y=3×107X+6540.1，r=0.9999（n=9）。結果表明，酮康唑質量濃度在0.1～150 μg/mL與峰面積線性關系良好。

2.3.3 重復性試驗：分別取片劑、乳膏、洗劑的供試品溶液各6份，依法測定。測得RSD分別為：片劑0.20%（n=6）；乳膏劑：0.29%（n=6）；2%洗劑：0.69%（n=6），表明方法重復性良好。

2.3.4 穩定性試驗：分別取同一份片劑、乳膏、洗劑的供試品溶液，分別在制備后0、2、4、6、8 h時進樣測定。測得RSD分別為：片劑0.43%；乳膏劑：0.17%；2%洗劑：0.66%，表明供試品溶液在8 h內基本穩定。

2.3.5 中間精密度試驗：分別取片劑、乳膏、洗劑供試品溶液各6份，分別由A、B、C 3人分別在不同的時間用同一臺設備，依法測定。測得RSD分別為：片劑0.47%；乳膏劑：0.68%；2%洗劑：0.73%，表明中間精密度良好。

2.3.6 回收率試驗：分別取片劑、乳膏、洗劑空白樣品各6份，分別精密加入線性儲備液6、4、2 mL，加甲醇稀釋至刻度，依法測定。測得回收率分別為：片劑為98.33%～99.80%，RSD為0.43%（n=6）；乳膏劑為99.45%～102.24%，RSD為1.21%（n=6）；洗劑為98.61%～101.24%，RSD為1.08%（n=6）。

2.3.7 含量測定：取“2.2溶液制備”下對照品溶液和供試品溶液，按上述色譜條件進樣5 μL，按外標法計算其標示含量，測得結果為：片劑97.8%，RSD為0.2%（n=6）；乳膏劑100.4%，RSD為0.3%（n=6）；和2%洗劑103.4%，RSD為0.7%（n=6）。

3 討 論

3.1 流動相的選擇：對流動相的種類和比例進行了系列試驗，結果表明選用0.34%硫酸四丁基氫銨溶液和乙腈的梯度比例洗脫最佳。

3.2 檢測波長和柱溫的選擇：經試驗表明，酮康唑在230 nm處峰形最好，且在柱溫40 ℃時分離度和峰形最佳。

3.3 輔料的影響：專屬性試驗結果表明，空白輔料對酮康唑制劑的含量測定無影響。

實驗表明，采用UPLC方法對酮康唑不同制劑進行含量測定，快速、簡便、靈敏、重現性好，利于更好地控制產品質量。

[1]國家藥典委員會.中國藥典(二部)[M].2010版.北京:中國科技醫藥出版社,2010:679.

[2]李華侃.茜素紅荷移分光光度法測定酮康唑含量[J].理化檢驗(化學分冊),2013,49(4):479-480.

[3]張艷紅,孫麗建,李強,等.高效液相色譜法測定緩釋微球中酮康唑的含量[J].黑龍江大學工程學報,2012,3(3):42-44.

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1671-8194（2015）03-0058-02