表皮生長因子樣結構域7（EGFL7）在侵襲性垂體腺瘤中的表達及臨床意義

鄭 杰宋來君于 方

(1 新鄉市中心醫院神經外一科，河南 新鄉 453000；2 鄭州大學第一附屬醫院神經外科，河南 鄭州 450052；3 新鄉醫學院第三附屬醫院，河南 新鄉 453000)

表皮生長因子樣結構域7（EGFL7）在侵襲性垂體腺瘤中的表達及臨床意義

鄭 杰1宋來君2于 方3

(1 新鄉市中心醫院神經外一科，河南 新鄉 453000；2 鄭州大學第一附屬醫院神經外科，河南 鄭州 450052；3 新鄉醫學院第三附屬醫院，河南 新鄉 453000)

目的探討表皮生長因子樣結構7(EGFL7)蛋白在侵襲性垂體腺瘤中的表達及與侵襲性關系。方法應用免疫組化（S-P）方法檢測32例侵襲性垂體腺瘤和10例正常腦組織中EGFL7蛋白的表達情況。結果EGFL7蛋白在侵襲性垂體腺瘤組織和正常腦組織中的陽性表達率差異有顯著統計學意義(P＜0.05)。結論EGFL7蛋白在侵襲性垂體腺瘤中的表達率明顯高于正常腦組織，表明其可能直接參與了侵襲性垂體腺瘤的發生及侵襲過程；在腫瘤的生長、侵襲過程中表現了較強的作用，針對腫瘤EGFL7蛋白的表達可以有效進行阻斷，從而針對腫瘤的生長與侵襲能夠有效起到抑制作用，為腫瘤患者的臨床治療鋪開了新的道路。

表皮生長因子樣結構7基因；侵襲性垂體腫瘤；免疫組化

垂體腺瘤是常見的顱內腫瘤，大多數垂體腺瘤是良性腫瘤，但是侵襲性垂體瘤在病理上雖屬于良性腫瘤，但具有向周圍正常結構顱骨、硬腦膜、海綿竇、蝶竇、鞍上、鞍旁等侵襲性生長的特點，單純手術難以達到全切除，術后需要放療或(和)化療，而且總體治療效果不佳，腫瘤復發率高。研究與侵襲性垂體腺瘤的相關因素對判斷垂體腺瘤治療、復發及愈后十分重要。當機體發生腫瘤時，最重要的特征就是血管內皮細胞的持續增殖。諸多研究表明EGFL7，針對形成血管官腔（生理性以及病理性）具有十分重要的作用。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：所有標本均取自新鄉市中心醫院神經外一科2010年1月至2013年11月垂體腺瘤手術切除標本，男17例，女15例，年齡14～74歲，全部滿足病理學診斷標準。針對鞍膈或者鞍底硬腦膜實施病理學檢查，明確有無出現腫瘤細胞浸潤的情況。垂體瘤是否侵襲性判定符合下列情況之一者可確定為侵襲性垂體腺瘤[1-3]。①在手術過程中對腫瘤組織進行詳細觀察，是否出現了對患者硬腦膜造成侵犯、對視神經造成侵犯以及對骨質等系列結構造成侵犯；②在進行手術的過程中，選擇鞍底鞍隔硬腦膜，對其實施病理學檢查，是否出現瘤細胞侵犯的情況；③根據影像學檢查的最終結果，是否出現腫瘤將骨質破壞，對海綿竇以及蝶竇等造成侵犯的情況。對術中切除的硬膜經病理證實腫瘤細胞浸潤。所選32例標本均為侵襲性垂體腺瘤（符合上述標準之一）。

1.2 方法：免疫組化染色方法嚴格按試劑盒操作步驟進行。免疫組化檢測EGFL7垂體腺瘤蛋白的表達，一抗為鼠抗人EGFL7單克隆抗體，購自美國Novus公司。DAB檢測試劑盒均購自華美生物工程公司。將PBS替代一抗作為本次的對照研究，選擇當前的陽性組織切片作為研究的陽性對照。對于EGFL7，其主要在胞質位置進行陽性表達，主要根據shimizu方法作為染色判斷標準。主要有以下幾步：①對染色強度進行評分：細胞質沒有出現顯色的情況，即為0分；細胞質出現了云霧狀淡黃色的情況，記為1分；細胞質出現了黃色顆粒狀，記為2分。細胞質表現為深黃色（均勻），記為3分。②對陽性細胞所占比例進行評分的標準：陽性細胞數不大于10%的患者，為0分；陽性細胞數在10%～40%的患者，記為1分，陽性細胞數在40%～70%，記為2分；陽性細胞數不小于70%的患者，記為3分。③染色強度對陽性細胞所占比例評總積分。總積分為0～1分則判定為陰性，在2分以上判定為陽性。在2分以下為（-），2～3分為（+），4～5分為（++），＞6分以上為（+++）。在本次的實驗過程中，將總積分在4分以上的定為出現了表達陽性的情況。

1.3 統計學分析：SPSS13.0統計軟件處理。P＜0.05具有統計學意義。

2 結 果

EGFL7蛋白在正常腦組織和垂體瘤組織中的表達：EGFL7蛋白在垂體瘤組織主要表達于血管內皮細胞胞質中，呈黃色或棕黃色顆粒，呈陽性表達；在正常腦組織中陰性表達。32例垂體瘤組織中陽性表達率為87.5%(28/32)，EGFL7蛋白在垂體瘤組織中的陽性表達率高于正常腦組織極其明顯，組間差異具有統計學意義(P＜0.05)（表1）。

3 討 論

垂體腺瘤在顱內腫瘤中僅低于腦膠質細胞瘤和腦膜瘤，居第3位，但部分侵襲性生長的垂體腺瘤一般表現為破壞腫瘤周圍骨質，侵及腫瘤周圍顱底硬腦膜、神經及血管等。上述表現是導致治愈率下降及腫瘤復發的主要原因之一。1940年Jeffersons首先提出侵襲性垂體腺瘤這一概念[4]。該腫瘤雖沒有轉移，但其表現某些惡性腫瘤的生物學行為，一般對患者的頸內動脈以及患者的腦神經造成了刺激，并且臨床癥狀發展極為迅速，一經檢查到腫瘤，已經出現了壞死以及卒中的情況，最終造成對患者的手術造成了非常大的危險，并且患者手術存在較大的風險，而且手術的全切率非常低，具有較高的復發率，對患者的臨床療效造成了非常嚴重的影響，因此治療方法不能單純依賴手術治療，需要綜合治療。用判斷腫瘤良惡性的形態學標準很難區分侵襲性和非侵襲性垂體腺瘤及評估顱內垂體腺瘤是否復發。但是，目前大多學者都認為垂體腺瘤稱為侵襲性垂體[5]。患者腫瘤的生長臨床癥狀主要表現在以下幾方面：出現了突破腫瘤包膜的情況，并且對患者鄰近的硬腦膜、患者的視神經以及患者的骨折等部位造成了一定程度的侵害。侵襲性垂體瘤的診斷主要是依據影像學及術中所見[6]。垂體腺瘤基因水平的改變導致其具有侵襲性改變，其中就是血管細胞出現了增殖以及患者的血管生長調控等系列的基因；臨床主要選擇侵襲性對相關標準進行判定，而不是將表型改變作為有關的判定標準，仍然根據外表發生的異常作為相關標準。大多學者以為實體腫瘤的生長、浸潤和轉移與新生管形成密切有關，我們能有效地阻斷腫瘤的血供和抑制腫瘤新血管形成才能抑制腫瘤生長。因此本課題的研究目的是希望從垂體腺瘤血管生成方面尋找判定侵襲性的標準和抑制垂體腺瘤侵襲生長的途徑。

表1 EGFL7蛋白在正常腦組織和垂體瘤組織中的表達

[1]Katayone YKM,Rakkar AN.Promoting apoptosis:anovelactivity associated with the cyclin-dependent kinase inhibitor p27[J].Cancer Res,1997,57(13):5541-5545.

[2]Thapar K,Scheithauer BW,Kovacs K,et al.p53 expression in pituitary adenomas and carcinomas:correlation with invasiveness and tumor growth fractions[J].Neurosurgery,1996,38(3):763-770.

[3]于德蓉,易靜,陳玉英,等.垂體腺瘤 p53抑癌基因免疫組化和原位雜交的檢測及與PCNA共表達的研究[J].腫瘤,1999,19(4):202-205.

[4]Abbass SA,Asa SL,Eszal S,et al.Altered expression of fibroblast growth factors in human pituitary adenomas[J].J Clin Endorcrinol Metab,1997,82(4):1160.

[5]張作洪,朱炎昌.雷霆神經生長因子在垂體腺瘤中的表達[J].臨床與實驗病理學雜志,2000,16(1):28-30.

[6]龔俊揚,史繼新.侵襲性垂體腺瘤及其研究進展[J].國外醫學神經病學神經外科學分冊,2000,27(1):27-28.

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1671-8194（2015）03-0165-02