醫(yī)院制劑“平喘固本膠囊”質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

敬玉錫 馮仔駒 賈天貴 周瑞君 周 姍 陳圣堂

（廣元市中醫(yī)醫(yī)院，四川 廣元 628000）

醫(yī)院制劑“平喘固本膠囊”質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

敬玉錫 馮仔駒 賈天貴 周瑞君 周 姍 陳圣堂

（廣元市中醫(yī)醫(yī)院，四川 廣元 628000）

目的研究建立醫(yī)療機(jī)構(gòu)?？菩轮苿捌酱瘫灸z囊”的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法采用理化鑒別、顯微鑒別、TLC、HPLC四個(gè)方面對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制。結(jié)果經(jīng)試驗(yàn)建立的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，方法簡便可行，重現(xiàn)性好。結(jié)論可很好地控制平喘固本膠囊的內(nèi)在質(zhì)量。

平喘固本膠囊；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；薄層色譜；高效液相色譜

平喘固本膠囊是廣元市中醫(yī)醫(yī)院制劑室新研制的中藥成分制劑，由五味子、沉香、白果、蛤蚧、熟地等22味中藥加工制成，對(duì)于慢性阻塞性肺氣腫的病患有很好的治療效果。為有效地控制其內(nèi)在質(zhì)量，在制備工藝確定的基礎(chǔ)上，需要對(duì)其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的起草和制定進(jìn)行系統(tǒng)研究，最終對(duì)處方中原粉入藥的中藥建立了理化鑒別、顯微鑒別項(xiàng)；對(duì)處方中提取部分的中藥采用TLC、HPLC法建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)，這里介紹對(duì)樣品中黃芪、甘草、熟地黃進(jìn)行的薄層色譜鑒別和對(duì)其主要藥味丹參所含的成分丹酚酸B的含量測(cè)定。

1 材料與方法

試驗(yàn)用樣品由廣元市中醫(yī)醫(yī)院制劑室提供，方法學(xué)研究樣品為121122、121225、130517、130620、130722、130821。

2 黃芪的薄層鑒別

采用黃芪甲苷為對(duì)照品（中檢所110781-200613），進(jìn)行薄層色譜鑒別研究。

2.1 樣品處理：取本品6 g，加水50 mL超聲提取30 min，離心，取上清液濾過，濾液加水飽和正丁醇萃取3次，每次20 mL，合并正丁醇液，用60 mL氨試液洗滌3次，取正丁醇液蒸干，殘?jiān)?0 mL甲醇溶解，濾過，濾液加在中性氧化鋁柱上，用100 mL 40%甲醇洗脫，洗脫液蒸干，殘?jiān)?.5 mL甲醇溶解，作為供試品溶液。

2.2 陰性對(duì)照處理：取按處方比例及制備工藝制備的不含黃芪的陰性對(duì)照樣品，同法制成陰性對(duì)照溶液。

2.3 對(duì)照品溶液：取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每1 mg/mL的溶液。

2.4 展開劑：三氯甲烷-甲醇-水（13∶7∶2）的下層溶液。

2.5 顯色劑：10%硫酸乙醇溶液，105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，日光與紫外光燈（365 nm）下檢視。

2.6 點(diǎn)樣：考察不同薄層板情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，日光與紫外光燈（365 nm）下顯相同顏色斑點(diǎn)，顯色清晰。而陰性對(duì)照溶液無此斑點(diǎn)。此條件下，分離度好，耐用性好。

3 甘草的薄層鑒別

采用甘草對(duì)照藥材為對(duì)照品（中檢所120904-200512），進(jìn)行薄層鑒別研究。

3.1 樣品處理：取本品5 g，加水20 mL，使溶解，離心，取上清液過濾，濾液通過DA-201型大孔吸附樹脂柱（內(nèi)徑l cm，柱高12 cm，濕法裝柱），用水50 mL洗至近無色，再用30 mL 60%乙醇洗脫，洗脫液蒸干，殘?jiān)? mL甲醇溶解，上清液作為供試品溶液。

3.2 陰性對(duì)照處理：取按處方比例及制備工藝制備的不含甘草的陰性對(duì)照樣品，同法制成陰性對(duì)照溶液。

3.3 對(duì)照品溶液：取甘草對(duì)照藥材0.5 g，加水30 mL，加熱回流30 min，濾過，濾液濃縮至20 mL，同法制成對(duì)照藥材溶液。

3.4 展開劑：正丁醇-乙醇-濃氨（10∶4∶3）。

3.5 顯色劑：10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，在日光燈及紫外光燈（365 nm）下檢視。

3.6 點(diǎn)樣：考察不同薄層板情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，日光與紫外光燈（365 nm）下顯相同顏色斑點(diǎn)，顯色清晰，而陰性對(duì)照溶液無此斑點(diǎn)。分離度好，耐用性好。

4 熟地黃的薄層鑒別

采用熟地黃對(duì)照藥材為對(duì)照品（中檢所121196-200804），進(jìn)行薄層鑒別研究。

4.1 樣品處理：取本品4 g，加40 mL水，煎煮30 min，放冷后濾過，濾液用60 mL乙酸乙酯提取2次，合并乙酸乙酯提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状? mL溶解，作為供試品溶液。

4.2 陰性對(duì)照處理：取按處方比例及制備工藝制備的不含熟地黃的陰性對(duì)照樣品，同法制成陰性對(duì)照溶液。

4.3 對(duì)照品溶液：取熟地黃對(duì)照藥材2 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。

4.4 展開劑：甲苯-乙酸乙酯（1∶1）。

4.5 顯色劑：105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，在日光燈下檢視。

4.6 點(diǎn)樣：考察不同薄層板情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，日光燈下顯相同顏色斑點(diǎn)，顯色清晰，而陰性對(duì)照溶液無此斑點(diǎn)。分離度好，耐用性好。

5 樣品中丹酚酸B的含量測(cè)定

5.1 儀器及色譜條件。儀器：Agilent1260-DAD檢測(cè)器；色譜條件：①色譜柱：Xbridge C18（5 μm，250 mm×4.6 mm）；②流動(dòng)相：乙腈-0.1%甲酸溶液（22∶78）；③檢測(cè)波長：256 nm；④柱溫：30 ℃；⑤流速：1.0 mL/min；⑥進(jìn)樣量10 μL。

5.2 對(duì)照品溶液的制備：取丹酚酸B對(duì)照品（中檢所111562-201111，含量98.2%，無需處理）適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含70 μg的溶液，即得。

5.3 供試品溶液的制備：取本品內(nèi)容物，約2.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%甲醇50 mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率500 W，頻率40 kz）30 min，放冷，再稱定重量，用75%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

5.4 陰性對(duì)照溶液取按處方比例及制備工藝制備的不含丹參的陰性對(duì)照樣品，照5.3項(xiàng)下操作，同法制成陰性對(duì)照溶液。

5.5 精密度試驗(yàn)：取同一對(duì)照品溶液5 μL，重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定丹酚酸B峰面積。見表1。試驗(yàn)結(jié)果表明：儀器的精密度良好。

表1 精密度試驗(yàn)結(jié)果（n=6）

5.6 穩(wěn)定性考察：將新配制的對(duì)照品溶液5 μL及新制備的供試品溶液

10 μL，精密進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，以后每間隔一定時(shí)間測(cè)定1次，記錄其色譜峰面積變化。結(jié)果見表2、3。

表2 對(duì)照品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明：對(duì)照品溶液的RSD＜2.0%，說明對(duì)照品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

表3 樣品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明：樣品溶液的RSD＜2.0%，說明樣品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

5.7 重復(fù)性考察：取同一批號(hào)本品粉末2.5 g，精密稱定，分別取6份，按擬定方法制備并測(cè)定含量，見表4。

表4 重復(fù)性考察結(jié)果

樣品重復(fù)測(cè)定6次的結(jié)果RSD＜2.0%，證明本方法重復(fù)性良好。

5.8 加樣回收試驗(yàn)：精密稱取本品（丹酚酸B含量為1.36 mg/g）2.5 g，共6份，分別精密加入丹酚酸B對(duì)照品溶液（濃度為0.1355 mg/mL）1mL，揮干溶劑，按照擬定方法分別制成供試品和對(duì)照品溶液，注入對(duì)照品溶液5 μL，供試品溶液10 μL，測(cè)定含量，計(jì)算回收率。見表5。

表5 丹酚酸B加樣回收試驗(yàn)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：丹酚酸B平均加樣回收率分別為96.3%，RSD為1.47%。說明本方法回收率良好。

5.9 六批樣品含量測(cè)定：采用正文擬定的含量測(cè)定方法，測(cè)定6批平喘固本膠囊樣品中丹酚酸B的含量，結(jié)果見表6。六批平喘固本膠囊中丹酚酸B的含量為1.28～1.41 mg/g，考慮大生產(chǎn)中丹參酚酸類成分提取效率不高，以平均值下浮20%計(jì)算，暫定本品含丹參以丹酚酸B計(jì)不得少于1.0 mg/g。

表6 樣品的含量測(cè)定

6 討 論

6.1 平喘固本膠囊是由五味子、沉香等22味藥組成的中藥復(fù)方制劑，藥味多，成分復(fù)雜，單一的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)不足以控制成藥的內(nèi)在質(zhì)量，我們采用理化鑒別、顯微鑒別、TLC、HPLC四種方法對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制[1]，達(dá)成全面控制質(zhì)量的目的。

6.2 薄層色譜鑒別最好采用硅膠G可裁板，重復(fù)性好，使用方便。

6.3 含量測(cè)定在選擇被測(cè)成分時(shí)要根據(jù)制作工藝適當(dāng)選擇，其中丹參的提取是水提，故在樣品中，脂溶性成分丹參酮ⅡA不合適，選擇水溶性成分的酚酸B作為被測(cè)成分，結(jié)果較為滿意。

[1]國家藥典委員會(huì).中國藥典.2010年版一部[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:1139-1141.

R282

B

1671-8194（2015）01-0053-02