冠心病心氣虛證患者血漿環(huán)磷酸腺苷含量變化研究

蔚 青，李曉璇，馬月香，孔春明

（1.山東中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院，山東濟(jì)南250001； 2.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東濟(jì)南250355）

冠心病心氣虛證患者血漿環(huán)磷酸腺苷含量變化研究

Study on content variation of plasma cyclic adenosine monophosphate in heart-qi deficiency patients with coronary heart disease

蔚 青1，李曉璇2，馬月香2，孔春明2

（1.山東中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院，山東濟(jì)南250001； 2.山東中醫(yī)藥大學(xué)，山東濟(jì)南250355）

目的：探討冠心病（CHD）心氣虛證患者血漿環(huán)磷酸腺苷（cAMP）含量變化與CHD心氣虛證發(fā)病的相關(guān)性，以揭示CHD心氣虛證發(fā)病的機(jī)制。方法：選取年齡40歲~75歲的CHD心氣虛證患者30例，非心氣虛證患者30例，另選取正常人30例作為正常對照組，用ELISA技術(shù)測定各組血漿cAMP含量。結(jié)果：CHD心氣虛證患者組的血漿cAMP水平較CHD非心氣虛證組、正常對照組均有明顯升高（P＜0.01）；CHD非心氣虛證組與正常對照組cAMP水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：冠心病患者血漿cAMP含量升高與CHD心氣虛證的發(fā)病具有相關(guān)性，提示血漿cAMP水平升高是CHD心氣虛證發(fā)病的微觀機(jī)制之一。

冠心病；心氣虛證；環(huán)磷酸腺苷；cAMP

冠心病（CHD）是臨床常見病、多發(fā)病，嚴(yán)重危害著人類的身體健康。中醫(yī)臨床辨證多屬于“胸痹”“心痛”等范疇。中醫(yī)臨床辨證治療具有療效顯著、毒副作用小等優(yōu)勢，但具體作用機(jī)制不詳。現(xiàn)代研究表明，血漿環(huán)磷酸腺苷（cAMP）與CHD的發(fā)病密切相關(guān)［1］。實驗研究表明，cAMP是心功能的敏感性指標(biāo)，血小板、動脈壁中cAMP減少是引起動脈粥樣硬化的原因之一，急性心肌梗死初期血中cAMP增加在一定程度上可能是機(jī)體的一種代償機(jī)制［2］。目前CHD中醫(yī)辨證分型與血漿cAMP含量的關(guān)系研究較少，本研究通過測定CHD心氣虛證與CHD非心氣虛證患者以及正常人的血漿cAMP含量，評價血漿cAMP含量與CHD心氣虛證發(fā)病的相關(guān)性，進(jìn)一步探討CHD心氣虛證的發(fā)病機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

2013年1月至2014年1月，按照1979年上海全國中西醫(yī)結(jié)合防治冠心病座談會修訂的CHD診斷標(biāo)準(zhǔn)，在山東中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科新入院確診為CHD的患者中，根據(jù)臨床辨證，從中選取年齡在40歲~75歲之間，30例CHD心氣虛證患者，30例CHD非心氣虛證患者。隨機(jī)選擇同年齡階段的正常人30例作為正常對照組。3組間性別、年齡及體重經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。CHD非心氣虛證組與CHD心氣虛證組在合并癥及NYHA心功能分級方面經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。結(jié)果見表1、表2。

表1 3組間一般資料比較 （x±s）

表2 CHD兩組間合并癥及NYHA心功能分級比較 ［例（%）］

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)

符合CHD診斷標(biāo)準(zhǔn)者；年齡為≥30歲且≤65歲者；意識清楚，具有獨立的判斷能力，能理解本研究的目的并自愿配合簽署知情同意書者。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn)

不符合CHD診斷標(biāo)準(zhǔn)者；CHD合并其他嚴(yán)重疾病者；年齡為≤30歲或≥65歲者；哺乳、妊娠或正準(zhǔn)備妊娠的婦女；不填寫知情同意書不愿意合作者；未按要求完成研究工作者。

1.4 證候診斷標(biāo)準(zhǔn)

CHD證候診斷標(biāo)準(zhǔn)參照1990年10月中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會心血管學(xué)會修訂的冠心病中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)。CHD心氣虛證的標(biāo)準(zhǔn)為：氣虛兼有心悸者。氣虛的共性表現(xiàn)為疲乏、氣短、舌質(zhì)淡胖嫩或有齒痕，脈沉細(xì)。同時參照1986年5月全國中西醫(yī)結(jié)合虛證與老年病研究專業(yè)委員會制定的中醫(yī)虛證診斷參考標(biāo)準(zhǔn)：①心悸、胸悶；②失眠或多夢；③健忘；④脈結(jié)代或細(xì)弱。具備兩項，其中第一條為必備。CHD其他證候診斷標(biāo)準(zhǔn)參照相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)。

1.5 研究方法

采血前囑受試者停止喝咖啡、濃茶及服用氨茶堿等對心血管有影響的藥物48 h以上，每個受試者采集2 mL血樣置于肝素抗凝管中，離心后取出待測血漿，放入EP管內(nèi)，置于-80℃冰箱保存。采用ELISA技術(shù)分別檢測各組受試者血漿cAMP的OD值，根據(jù)樣品OD值畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品OD值分別計算出相應(yīng)cAMP含量。試劑盒購自北京信力來生物科技有限公司，由山東省醫(yī)科院檢測。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

計數(shù)資料使用χ2檢驗，計量資料用t檢驗，計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，所有數(shù)據(jù)均使用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS16.0進(jìn)行處理分析。

2 結(jié)果

與正常對照組比較，CHD非心氣虛組、CHD心氣虛組血漿cAMP含量均升高，但CHD非心氣虛組與正常對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），CHD心氣虛組與正常對照組及CHD非心氣虛組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。結(jié)果見表3。

表33 組研究對象血漿cAMP水平比較 （x±s）

3 討論

cAMP以極少量普遍存在于動、植物細(xì)胞和微生物中，是組織細(xì)胞內(nèi)參與調(diào)節(jié)物質(zhì)代謝和生物學(xué)功能的重要因子，它的產(chǎn)生是由于某些激素或其他分子信號啟動腺苷酸環(huán)化酶催化ATP環(huán)化而形成，故被人們稱作“第二信使”。cAMP是評價心功能的敏感性指標(biāo)［2］，其血漿濃度的變化在心血管疾病的發(fā)生過程中具有重要作用。cAMP通過促進(jìn)鈣離子向心肌細(xì)胞內(nèi)流動，增強磷酸化作用，促進(jìn)興奮-收縮耦聯(lián)來提高心肌收縮力，同時它還可以擴(kuò)張外周血管，降低心臟前后負(fù)荷，從而改善心功能［3］。王保申等［4］在對外源性磷酸肌酸聯(lián)合二丁酰環(huán)磷腺苷在不停跳冠脈搭橋術(shù)中心肌保護(hù)作用的研究發(fā)現(xiàn)兩藥聯(lián)合應(yīng)用能更好地保護(hù)心肌。而二丁酰環(huán)磷腺苷鈣是cAMP的衍生物，細(xì)胞滲透性比環(huán)磷酸腺苷強。張麗霞［5］運用環(huán)磷酸腺苷葡甲胺治療慢性心力衰竭64例并進(jìn)行療效觀察發(fā)現(xiàn)其對心力衰竭的治療作用是多方面的，是一種有效而且安全的治療心力衰竭藥物。對于心肌缺血的影響，婁之聰［6］通過研究指出cAMP的含量升高是急性心肌缺血后的第一個生化反應(yīng)，可能與急性心肌缺血后內(nèi)兒茶酚胺釋放增多，作用于β受體，使cAMP生成增多有關(guān)。眾所周知，動脈粥樣硬化（AS）是冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的基本病因。有動物實驗研究發(fā)現(xiàn)動脈壁內(nèi)cAMP含量的下降是促進(jìn)AS進(jìn)展的原因之一［1］。臨床試驗表明冠心病患者體內(nèi)血小板中的cAMP水平明顯降低［7］。鄺安埅等［8］觀察了40例急性心肌梗死患者的血漿cAMP、cGMP含量，結(jié)果顯示起病第1天cAMP升高，cGMP升高更明顯，至第2周~第3周逐漸降至正常。古樂梅［9］觀察了35例冠心病患者cAMP水平卻無明顯統(tǒng)計學(xué)意義。臨床研究結(jié)果不盡一致。

本研究對60例CHD患者進(jìn)行中醫(yī)辨證分型，因患者單純一種中醫(yī)證型者較少，因此，辨證分型以主證為分型標(biāo)準(zhǔn)。選擇出30例CHD心氣虛證，30例CHD非心氣虛證患者，與30例正常對照組比較，結(jié)果顯示，與正常對照組相比較，CHD心氣虛證組及CHD非心氣虛組血漿cAMP含量均升高，而CHD非心氣虛證組與正常對照組相比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。本次入選的為新入院病人，多數(shù)為不穩(wěn)定型心絞痛患者，少數(shù)為穩(wěn)定型心絞痛及急性心肌梗死病人，入院后即抽血化驗，因此多在急性心肌缺血反復(fù)發(fā)作的急性期。CHD心氣虛證組患者的血漿cAMP含量升高明顯，約是正常對照組的3倍。在急性心肌缺血時，機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài)，交感-腎上腺髓質(zhì)系統(tǒng)激活，腎上腺素及去甲腎上腺素釋放增加，可與細(xì)胞膜上的β受體結(jié)合，使血液中cAMP含量增加。cAMP又可通過蛋白激酶活化甘油三酯脂肪酶，促進(jìn)甘油三酯水解，使脂肪酸生成增加，使心肌缺氧下仍獲得一定的ATP，但對缺血心肌能量代謝不利。王蕭等［10］觀察了心氣虛型家兔心衰模型血清cAMP、cGMP的含量，結(jié)果表明，隨心衰程度加重，cGMP含量顯著增加，而cAMP、cAMP/cGMP比值下降；而劉寶華等［11］對急性心肌缺血家兔血漿cAMP、cGMP含量進(jìn)行了測定，結(jié)果顯示心肌缺血家兔血漿cAMP含量明顯升高。本研究結(jié)果提示冠心病心氣虛證患者血漿cAMP含量顯著升高，與非心氣虛證組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，說明血漿cAMP含量測定對冠心病心氣虛患者特異性較高，可以作為冠心病心氣虛證客觀化指標(biāo)，可能是冠心病心氣虛證的發(fā)病機(jī)制之一。

［1］袁源.cAMP在冠心病中的作用［J］.第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，1983，3（增刊），375-376.

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［4］王保申，劉蘇.外源性磷酸肌酸聯(lián)合二丁酰環(huán)磷腺苷在不停跳冠脈搭橋術(shù)中心肌保護(hù)作用的研究［J］.北華大學(xué)學(xué)報，2014，15（4）：490-494.

［5］張麗霞.環(huán)磷酸腺苷葡甲胺治療慢性心力衰竭64例療效觀察［J］.實用醫(yī)技雜志，2011，18（4）：412-413.

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［10］王蕭，許慶文，董浩然，等.cAMP、cGMP及基因表達(dá)譜在心氣虛型家兔心衰模型中的變化［J］.中藥新藥與臨床藥理，2012，23（4）：387-390.

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（編輯：翟春濤）

R259.414

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1671-0258（2015）01-0048-03

國家自然科學(xué)基金資助項目（81273625）

蔚青，副教授，E-mail：weiqingtongzhi@sina.com

馬月香，教授，碩士生導(dǎo)師，E-mail：myx1008@126.com