TLR2和TLR4與慢性心功能不全患者免疫球蛋白的相關性研究

摘要：目的 對72例慢性心功能不全患者進行外周血單核細胞Toll樣受體2和4的表達變化與患者體內免疫球蛋白指標變化的相關性研究并將所研究的結果外推至人群性的疾病研究。方法 選取我院的心內科接受治療的72例心功能不全患者進行回顧性的資料分析，同時選取35名健康人作為對照組。使用流式細胞技術和德國BN-Ⅱ全自動特種蛋白分析儀檢查TLR2、TLR4及免疫球蛋白相關指標，探究其相關性。結果 TLR4陽性在外周血單核細胞中表達輕微組和嚴重組較對照組相比差異顯著（P<0.05），TLR2陽性在外周血單核細胞中的表達與IgA和IgG具有正相關（P<0.05），TLR4陽性在外周血單核細胞中的表達與IgA具有正相關（P<0.05）。結論 TLR2和TLR4與慢性心功能不全患者免疫球蛋白具有相關性。

關鍵詞：TLR2；TLR4；慢性心功能不全；免疫球蛋白

Toll樣受體（TLRs）是一種識別受體，也是機體在自身與身具有一種保守模式的受體，在天然免疫中具有舉足輕重的作用。TLR2和TLR4是該受體家族中具有一定代表性的受體，它們與機體的發生的炎癥以及免疫功能具有一定的聯系[1]。研究并分析TLR2和TLR4在慢性心功能不全患病人群外周血中CD14+單核細胞中的表達，以及該類受體與患者體內免疫球蛋白相關指標的相關性 [2]。并為深入闡明TLR2和TLR4在慢性心功能不全的發生、發展的作用提供新的理論基礎。

1資料與方法

1.1一般資料 選取自2013年1月20日～2014年10月20日來我院的心內科接受治療的慢性心功能不全患者72例進行回顧性的資料分析，所有患者均經過Framingham標準進行判定，并且應用NTHA進行分級。將1～2級患者分入輕微組，3～4級患者分入嚴重組，同時選取35名健康人作為對照組。其中輕微組患者29例，男性患者18例，女性患者11例，年齡38～82歲，平均是（58.4±10.5）歲，嚴重組患者43例，男性患者23例，女性患者20例，年齡36～85歲，平均是（59.2±11.6）歲，對照組30例，男性17例，女性13例，年齡39～79歲，平均是（56.4±10.3）歲。三組患者一般資料無明顯差異，具有可比性。

1.2方法

1.2.1流式細胞染色及受體分析先對慢性心功能不全患者和正常人進行靜脈取血，而后對其進行染色，進而使用離心機進行離心5min，棄上清液。采用美國COULTER EPICSALTRA流式細胞儀檢測樣品。樣品的分析使用cellquest軟件，分析TLR2和TLR4在外周血CD4+單核細胞表達的百分率，以及平均熒光強度。

1.2.2免疫球蛋白相關指標檢測先對慢性心功能不全患者和正常人進行空腹靜脈取血，采用德國BN-Ⅱ全自動特種蛋白分析儀檢測，應用速率散射比濁法檢測蛋白中IgA、IgG以及IgM的水平。

1.3統計學方法 采用SPSS18.0統計軟件對本次研究所取得的數據進行分析，計數資料采用χ2檢驗，計量資料采取t檢驗，以（x±s）的形式對數據進行表示，以P<0.05代表有統計學意義。

2結果

2.1三組TLR2和TLR4在外周血單核細胞表面表達水平對比TLR4+在輕微組和嚴重組患者測得的外周血的CD14+單核細胞表面的值差別顯而易見（P<0.05），并且輕微組和嚴重組的差別也顯而易見（P<0.05）。

2.2TLR2、TLR4的表達與免疫球蛋白相關指標的相關性經過資料取證以及統計學分析可知，TLR2陽性在外周血單核細胞中的表達與IgA具有正相關（r=0.245，P<0.05），TLR2陽性在外周血單核細胞中的表達與IgG具有正相關（r=0.346，P<0.05），TLR4陽性在外周血單核細胞中的表達與lgA具有正相關（r=0.314，P<0.05）。

3討論

TLR2和TLR4的種類為跨膜受體蛋白，它們的結構由三種成分組成。相對TLR4而言，TLR2的識別能力較強，它可以識別革蘭陽性菌，也可識別該類細菌的細胞壁的固有成分肽聚糖。而TLR4只可以識別革蘭陰性菌固有的成分脂多糖[3，4]。依據近期的相關調查研究發現，這兩種跨膜受體蛋白可以導致炎性組織損傷，并且TLR4還與腫瘤的發生密切相關[5]。相對Toll樣受體家族中其它亞類而言，這兩種蛋白最具有代表性，它們幾近在人體所有細胞系中表達，在淋巴細胞、單核細胞、中性粒細胞等中均由它們的表達[6]。并且在心肌細胞、消化道上皮細胞中也有分布。

本次研究對72例慢性心功能不全患者和35例健康人進行相關性研究并將研究的結果外推至人群性的疾病研究。用流式細胞技術檢測72例慢性心功能不全患者外周血單核細胞中TLR2和TLR4的表達差異，研究結果表明，TLR2+在三組患者測得的外周血的CD14+單核細胞表面的值無差別（P>0.05），而TLR4+在嚴重組中的表達明顯高于輕微組（P<0.05），并且，嚴重組和輕微組中的表達均明顯高于對照組（P<0.05）。同時也進一步證實TLR4在外周血單核細胞中的高度表達與慢性心功能不全的發生有一定的關聯性。同時經德國BN-Ⅱ全自動特種蛋白分析儀的檢測結果表明，TLR2陽性在外周血單核細胞中的表達與IgA和IgG具有正相關（P<0.05），TLR4陽性在外周血單核細胞中的表達與IgA具有正相關（P<0.05）。綜上所述，慢性心功能不全患者體內TLR2和TLR4的表達與免疫球蛋白的相關指標具有一定的聯系，其中TLR2與IgA和IgG呈正向線性相關，隨著TLR2的表達增強，IgA和IgG含量增加。TLR4與IgA呈正向線性相關，隨著TLR4的表達增強，IgA含量增加。

參考文獻：

[1]肝硬化患者外周血單核細胞表面TLR4和TLR2表達的臨床意義[J].世界華人消化雜志，2006，14（34）：234-235.

[2]金伯泉.細胞核分子免疫學實驗技術[M].第四軍醫大學出版社，2002：78-81.

[3]郭燕，李俠，周華蘭，等.老年慢性左心衰嚴重程度與循環激酶插入結構閾受體陽性細胞水平變化的關系[J].現代中西醫結合雜志，2011，20（29）：3644-2645.

[4]郭燕，李俠，楊海晨.TOll樣受體2和4在老年慢性左心力衰竭中的表達[J].中國臨床標間雜志，2012，15（04）：412-413.

[5]王妍，陶軍，涂昌，等.高血壓患者循環內皮細胞微顆粒水平的變化[J].中華老年心腦血管病雜志，2006，8（04）：222-223.

[6]李俠，郭燕，胡有東，等.循環內皮細胞微顆粒和高敏C反應水平變化與慢性左心衰嚴重程度的相關性研究[J].中華老年醫學雜志，2011，30（06）：472-473.

編輯/王海靜