即刻種植中PRF對骨生長情況影響的實驗研究

摘要：目的 觀察即刻種植中應用富血小板纖維蛋白（PRF）種植體周圍骨組織的生長情況。方法 拔除5只beagle犬雙側下頜第四前磨牙（PM4），立即植入柱形螺紋純鈦種植體。實驗采用自身對照，實驗組采用PRF填塞種植體頰側缺損，遠中間隔缺損和拔牙窩；對照組種植體頰側缺損以血凝塊充填，間隔不制備缺損，拔牙窩用明膠海綿填塞。3 個月后手術切開觀察骨缺損位置新骨形成情況，并測量記錄。結果 種植3個月后，實驗組頰側骨量增加高度為2.85mm，對照組為1.69mm，余留缺損面積實驗組為1.81mm2，對照組為3.53mm2。種植體頰側和遠中拔牙窩實驗組比對照組成骨細胞多，間隔骨成熟度與正常骨無明顯差別。結論 即刻種植即刻負重種植中使用PRF，有利于種植體周骨缺損區新骨形成。

關鍵詞：即刻種植；骨組織；富血小板纖維蛋白

富血小板纖維蛋白（PRF）為第二代的血小板凝集物，是具有粘性的富含高濃度纖維蛋白原及多種生長因子的血小板凝膠能促進頭面部的成骨細胞生長，從而促進硬組織的愈合。本研究將PRF引入口腔即刻種植即刻負重中，通過動物實驗的方法描述其修復骨組織的情況，以指導進一步的動物實驗研究和臨床應用。

1 資料與方法

1.1一般資料 種植體：Super line 種植體（3.6mm×8.0mm，SLA，Dentium公司，韓國）植入材料：Bio-Oss骨粉（直徑0.25～1mm 的松質骨顆粒）；Bio-Gide膠原膜（蓋氏制藥有限公司生產）；PRF（無菌操作要求下，經靜脈采血，置于無任何添加劑的無菌負壓采血管中，3000rpm轉速下離心15min。可見到血液樣本分為三層，中間層淡黃色的凝膠即為PRF凝膠，用鑷子將其取出，可用組織剪將其剪碎，亦可用無菌紗布輕輕擠壓制成PRF膜）。實驗動物：健康純種雄性beagle犬5只，體重約13～16kg，年齡為24個月。要求牙體、牙列完整，無牙體牙周疾病，咬關系正常。所有實驗動物適應性飼養1個月后，再進行實驗。

1.2方法

1.2.1動物模型制備 以5只成年Beagle犬為實驗對象。在30g/L 戊巴比妥鈉溶液靜脈麻醉下，微創拔除犬雙側下頜第四前磨牙（PM4），徹底搔刮拔牙窩，于遠中根拔牙窩靠近牙根間隔處預備種植窩至深度8mm，即刻植入直徑3.6mm，長度8mm Super Line種植體。

1.2.2缺損制備標準 采用半口自身對照，隨機法區分對照側與實驗側，用骨鑿在種植體頰側制備約4mm×5mm缺損，暴露種植體上部，制備實驗側牙槽間隔約3mm×3mm缺損，對照側牙槽間隔處不制備缺損。實驗組采用PRF填塞種植體頰側缺損，遠中間隔缺損和拔牙窩；對照組種植體頰側缺損僅以出血形成的血凝塊充填，間隔不制備缺損，拔牙窩用明膠海綿填塞，可吸收縫線關閉創口。

1.2.3 取材 3個月后手術切開觀察骨缺損位置新骨形成情況，并測量記錄，同時在雙側種植體頰側缺損修復區、間隔和拔牙窩骨質處取材，對骨組織中成骨細胞多少和骨基質的礦化程度做出基本判斷。

1.3統計學方法 本實驗使用SPSS19.0軟件包對數據進行統計學處理，結果以均數±標準差（x±s） 表示，各組間的比較采用配對資料的t 檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

實驗組頰側新生骨高度平均為2.85mm，對照組為1.69mm，P<0.05（見表1）；實驗組頰側余留骨缺損面積平均為1.81mm2，對照組3.53mm2，P<0.05（見表2）。兩組數據差異都有統計學意義。可以認為，實驗組骨組織增加的高度多于對照組，余留缺損面積小于對照組，即PRF有利于骨組織的生成。

3 討論

PRF主要是早期促進成骨作用，作用時間為7～11d，長于第一代血小板凝集物富血小板血漿（PRP）的3～5d，且作用穩定，即在成骨的早期，持續釋放大量細胞因子，如轉化生長因子（TGF-β1）、血小板源性生長因子（PDGFs）、胰島素樣生長因子（IGF-1）、血管內皮生長因子（VEGF）等[1，2]，增加了實驗組成纖維細胞和成骨細胞的數量和活性，促進血管的生成等。在這些因子中 TGF-β作為趨化因子可以在種植床周圍吸附大量骨母細胞，刺激成骨細胞的增殖，增加骨細胞的數量，抑制破骨細胞的形成；促進成骨細胞基質的沉積和成纖維細胞基質的形成。PDGF不僅可刺激骨髓基質細胞的有絲分裂以增加骨細胞的數量，還可刺激內皮細胞的有絲分裂，促進種植區毛細血管的生長，使成骨細胞趨化增殖并增加膠原蛋白合成的能力。本研究發現，種植3個月后實驗組新生骨的生成能力、改建和重塑能力強于對照組。

生長因子在PRF 的生物學上發揮了重要的作用，而纖維蛋白基質 起到決定性的作用，PRF中的纖維蛋白網的存在減緩了細胞因子在PRF 的降解過程中釋放速度，并為修復相關的細胞提供了增殖分化的場所，在組織修復過程中發揮了細胞支架的作用，而且纖維蛋白基質是促進間充質干細胞移植最適合的基質載體。纖維蛋白也可以促進新生血管形成，促進血液里未分化的間充質細胞向成骨細胞轉變，形成骨組織。

PRF 的應用能夠有效恢復種植體頰側的骨缺損，表明PRF 可以單獨作為骨充填材料修復種植體周圍骨缺損；在拔牙窩處加入PRF 或明膠海綿[3]，均可促進拔牙創軟硬組織的愈合，但PRF 促進骨形成效果更佳。

參考文獻：

[1]李琦，周延民，翟靜捷，等.富血小板纖維蛋白修復兔顱骨骨缺損的實驗研究[J].口腔醫學研究，2011，27（7）：587-593.

[2]王雙義，楊忠思，李寧毅，等.富血小板血漿促進犬軟組織損傷修復組織病理學觀察[J].青島大學醫學院學報，2011，47（1）：71-72.

[3]徐普，毛小泉，黃謝山，等.拔牙窩放置明膠海綿對骨愈合的影響[J].海南醫學，2010，16（10）：1279-1282.

編輯/成森