胰腺癌患者血清RBP-4和NGAL的水平變化及其關系

·臨床研究·

胰腺癌患者血清RBP-4和NGAL的水平變化及其關系

沈逸辛，黃錢珍

(太倉市中醫醫院，江蘇太倉 215400)

摘要：目的觀察脂肪因子視黃醇結合蛋白4( RBP-4)和中性粒細胞凝膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)在胰腺癌患者血清中的水平變化，并探討二者間的關系。方法選擇30例胰腺癌患者和30例健康體檢者作為研究對象。采用全自動生化分析儀測定血糖(GLU)、胰島素、甘油三酯(TG)、總膽固醇(CHOL)、HDL-C、LDL-C、RBP-4；ELISA法測定血清NGAL；對各指標間的關系進行Pearson或多元線性回歸分析。結果胰腺癌患者與健康體檢者血清RBP-4水平分別為(55.6±20.3)、(36.2±9.3)ng/mL，NGAL水平分別為(139.5±62.4)、(41.5±10.7)ng/mL，二者血清RBP-4、NGAL水平比較，P均<0.01。胰腺癌患者術前血清RBP-4、NGAL水平分別為(58.7±15.4)、(129.8±35.8)ng/mL，術后分別為(41.5±5.7)、(92.5±20.4)ng/mL，手術前后血清RBP-4、NGAL水平比較，P<0.01。相關分析發現胰腺癌患者血清RBP-4與NGAL呈正相關(r=0.464，P=0.010)。血清RBP-4與CA19-9、NGAL存在顯著相關性(r分別為0.487、0.411，P均<0.01)，而與年齡、性別、血糖、胰島素及脂蛋白無相關性。血清NGAL與TG和RBP-4存在顯著相關性(r分別為0.401、0.377，P<0.05)，而與其他指標無相關性。結論 胰腺癌患者血清RBP-4和NGAL水平顯著升高，二者存在顯著正相關關系。

關鍵詞：胰腺癌；視黃醇結合蛋白4；中性粒細胞凝膠酶相關脂質運載蛋白；胰島素抵抗

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.45.015

中圖分類號：R735.9 文獻標志碼：B

收稿日期：(2015-07-11)

胰腺癌惡性程度很高，大部分患者在確診時已進入晚期[1]。因此，通過流行病學研究尋找胰腺癌相關的危險因素十分重要。除了年齡、性別等因素外，已有報道表明吸煙、肥胖和慢性炎癥等亦與胰腺癌的發生密切相關。另有研究發現，高胰島素血癥和胰島素抵抗對于腫瘤風險判斷亦有一定作用[2]。視黃醇結合蛋白-4(RBP-4)是近年來發現的血漿中具有轉運維生素A的一種糖蛋白[3]。除了脂肪組織，肝臟亦可分泌RBP-4，且與胰島素抵抗有很強的相關性。研究表明，血清RBP-4升高與體質量指數(BMI)、胰島素抵抗和血糖水平改變存在顯著相關性[4]。然而，其在胰腺癌中的表達情況及其生物學作用并不明確。中性粒細胞凝膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)是人脂質運載蛋白家族中的新成員[5]。主要在炎癥刺激情況下由中性粒細胞分泌，研究表明其與胰島素抵抗亦存在一定聯系。2011年1月～2014年12月，我們觀察了胰腺癌患者血清RBP-4和NGAL的水平變化，并探討二者間的關系。

1資料與方法

1.1臨床資料選擇2011年1月～2014年12月太倉市中醫醫院診治的胰腺癌患者30例(胰腺癌組)，男19例、女11例，年齡(47.2±3.4)歲。標本收集后經病理檢查均確定為胰腺癌，其中高分化7例，中分化13例，低分化10例。病理分期Ⅰ～Ⅱ期19例，Ⅲ～Ⅳ期11例。患者術前均未接受針對腫瘤的任何放化療。對照組選擇正常健康體檢者30例，男18例、女12例，年齡(45.7±2.4)歲。

1.2血清RBP-4和NGAL及生化指標檢測患者入院前采集空腹靜脈血，手術前后單獨再次采集外周血，30 min內3 000 r/min離心10 min，分離血清，行生化腫瘤指標檢測，同時將分離血清予-80 ℃凍存備用。使用全自動生化分析儀(Olympus AU2700，日本)對所有標本進行GLU、胰島素、TG、CHOL、HDL-C、LDL-C、RBP-4分析，CA19-9采用發光免疫分析儀(Roch E801，美國)測定。ELISA試劑盒(R&D systems, 美國)測定血清NGAL，操作按試劑盒說明書進行。

2結果

2.1兩組血清RBP-4和NGAL及生化指標水平比較胰腺癌組血清胰島素、HOMA-IR、CA19-9、RBP-4和NGAL水平較對照組均明顯升高(P均<0.01)，見表1。胰腺癌組術前血清RBP-4、NGAL水平分別為(58.7±15.4)、(129.8±35.8)ng/mL，術后分別為(41.5±5.7)、(92.5±20.4)ng/mL，手術前后比較，P<0.01。

表1　兩組血清RBP-4和NGAL及生化指標水平比較

2.2血清RBP4與NGAL的相關性分析胰腺癌組血清RBP-4與NGAL呈正相關(r=0.464，P=0.010)，而對照組則無顯著相關性(r=0.054，P=0.778)。多元線性回歸分析結果顯示，RBP-4與CA19-9(r=0.487，P=0.002)和NGAL(r=0.411，P=0.007)存在顯著相關性，而與年齡、性別、血糖、胰島素及脂蛋白并無相關性。NGAL與甘油三脂(r=0.401，P=0.005)和RBP-4(r=0.377，P=0.011)存在顯著相關性，而與其他指標無相關性。

3討論

研究發現，胰島素抵抗及其并發的高胰島素血癥在胰腺癌發生發展中有重要作用。此外，胰島素抵抗還可能在胰島素與脂肪素相互作用過程中發揮作用。RBP-4和NGAL是兩種重要的脂肪因子，被認為與胰島素抵抗存在密切聯系[2,6]。本研究結果提示，胰腺癌組血清胰島素水平和HOMA-IR較對照組顯著升高。而Godsland等[7]發現胰島素抵抗和高胰島素血癥對胰腺腫瘤的發生和發展有重要作用。因此，我們的研究進一步證實了胰腺癌與胰島素抵抗具有顯著相關性，而血清胰島素水平升高可致胰腺組織在局部受到高濃度的胰島素刺激，進而促進癌組織的發生與進展。

通過檢測脂肪因子RBP-4，發現其在胰腺癌患者中明顯增加，這表明RBP-4在胰腺癌中可能發揮一定作用。但目前并無此類相關研究，我們推測其中一個可能是RBP-4抑制了胰島素的信號傳導通路，從而加劇了胰島素抵抗的產生。這需要進一步的研究予以證實。目前已經明確，慢性炎癥往往伴隨血清RBP-4的升高[8]。因此，亦有可能RBP-4水平改變與胰島素抵抗無關，而是參與了炎性反應，從而加劇了腫瘤的進程。

我們的結果還發現，胰腺癌患者血清NGAL顯著升高。有研究發現在胰腺損傷過程中NGAL表達顯著升高[9]，且由于NGAL是通過NF-κB活化，因此具有調節炎癥反應的潛在應用價值[10]。這可能會在一定程度上影響胰腺癌的發展過程。此外，NGAL等脂肪因子水平和功能的改變對于天然免疫應答和凋亡過程有一定調節作用[11]。因此，可能通過下調免疫應答水平促進癌細胞的免疫逃逸，從而加劇腫瘤的發生。

為進一步明確這兩種脂肪因子血清水平的升高與癌組織存在相關性，我們分析了手術前后的血清水平變化。結果發現胰腺癌術后RBP-4和NGAL較術前明顯降低。提示胰腺癌的腫瘤組織可能是該脂肪因子的一個來源。相關性分析發現，胰腺癌患者血清RBP-4與NGAL存在正相關關系，而研究已證實，這兩種因子的表達水平明顯受到炎癥及胰島素抵抗的影響[12]。因此，這種相關性可能說明這兩種脂肪因子間存在一定影響，并同時在胰腺癌發病過程中起作用，但其確切機制尚不明確。研究[13]表明，部分腫瘤患者中血清RBP-4水平與血脂存在一定相關性。本研究結果表明RBP-4與NGAL和CA19-9存在正相關關系，而NGAL與RBP-4及甘油三酯存在顯著相關性。進一步說明脂肪因子水平改變可能與胰腺癌患者脂質代謝紊亂存在一定關系。

綜上所述，RBP-4和NGAL在胰腺癌患者血清中顯著升高，并存在正相關關系，二者可能在胰腺癌發生、發展過程中發揮重要作用。

參考文獻：

[1] Schober M, Jesenofsky R, Faissner R, et al. Desmoplasia and chemoresistance in pancreatic cancer[J]. Cancers (Basel), 2014,6(4):2137-2154.

[2] Dalamaga M1, Migdalis I, Fargnoli JL. Pancreatic cancer expresses adiponectin receptors and is associated with hypoleptinemia and hyperadiponectinemia: a case-control study[J]. Cancer Causes Control, 2009,20(5):625-633.

[3] Bachmayer C, Lammert A, Hasenberg T, et al. Healthy obese and post bariatric patients - metabolic and vascular patterns[J]. Exp Clin Endocrinol Diabetes, 2013,121(8):483-487.

[4] Karadag AS, Ertugrul DT, Kalkan G, et al. The effect of acitretin treatment on insulin resistance, retinol-binding protein-4, leptin, and adiponectin in psoriasis vulgaris: a noncontrolled study[J]. Dermatology, 2013,227(2):103-108.

[5] Vanmassenhove J, Glorieux G, Lameire N, et al. Influence of severity of illness on neutrophil gelatinase-associated lipocalin performance as a marker of acute kidney injury: a prospective cohort study of patients with sepsis[J]. BMC Nephrol, 2015,(16):18.

[6] Esteve E, R icart W, Real J. A dipocytokines and insulin resistance: the possible role of lipocalin-2, retinol binding protein-4, and adiponectin [J]. Diabetes Care, 2009,32(Suppl 2):S362-367.

[7] Godsland I. Insulin resistance and hyperinsulinaemia in the development and progression of cancer[J]. Clin Sci, 2010,118(5):315-332.

[8] Ferranti S, Mozaffarian D. The perfect storm: obesity, adipocyte dysfunction, and metabolic consequences [J]. Clin Chem, 2008,54(6):6945-6955.

[9] Moniaux N, Chakraborty S, Yalniz M, et al. Early diagnosis of pancreatic cancer: neutrophil gelatinaseassociated lipocalin as a marker of pancreatic intraepithelial neoplasia [J]. Br J Cancer, 2008,98(9):1540-1547 .

[10] Wang Y, Lam KS, Kraegen EW, et al. Lipocalin-2 is an infl ammatory marker closely associated with obesity, insulin resistance, and hyperglycemia in humans[J]. Clin Chem, 2007,53(1):34-41.

[11] Donghui L. Diabetes and pancreatic cancer[J]. Mol Carcinogen, 2012,51(1):64-74.

[12] Malyszko J, Tesar V, Macdougall IC. Neutrophil gelatinaseassociated lipocalin and hepcidin: what do they have in common and is there a potential interaction[J]. J Kidney Blood Press Res, 2010,33(2):157-165.

[13] Christou GA, T ellis CC, Elisaf MS, et al. The changes in plasma retinol-binding protein 4 levels are associated with those of the apolipoprotein B-containing lipoproteins during dietary and drug treatment[J]. Angiology, 2012,63(1):67-75.