塵螨過敏哮喘患兒舌下含服粉塵螨滴劑后血清塵螨SlgE、SlgG4及IL-12、IL-13水平變化

塵螨過敏哮喘患兒舌下含服粉塵螨滴劑后血清塵螨SlgE、SlgG4及IL-12、IL-13水平變化

曾春云1，董蔚1，嚴華杰1，盛軍1，錢丹1，陳向明1，陸敏2

(1上海市嘉定區南翔醫院，上海201802；2上海市兒童醫院)

摘要：目的觀察塵螨過敏哮喘患兒經舌下含服粉塵螨滴劑治療2年后血清塵螨特異性IgE(SlgE)、塵螨特異性IgG4(SlgG4)及IL-12、IL-13水平變化。方法 選擇輕中度塵螨過敏哮喘患兒69例，隨機分為觀察組32例和對照組37例。兩組均予沙美特羅替卡松粉吸入劑吸入治療，觀察組再予粉塵螨滴劑舌下含服治療，兩組均治療2年。治療前后采用熒光酶聯免疫法檢測血清塵螨SlgE、SlgG4，采用化學發光免疫分析法檢測血清IL-12、IL-13。結果 對照組治療前后血清塵螨sIgE、塵螨sIgG4、IL-12、IL-13水平比較差異均無統計學意義(P均>0.05)，觀察組治療后血清塵螨sIgG4、IL-12水平較治療前升高(P均<0.05)。與對照組比較，觀察組治療后血清塵螨sIgG4、IL-12水平升高，IL-13水平降低(P均<0.05)。結論 塵螨過敏哮喘患兒經舌下粉塵螨滴劑治療2年后血清塵螨sIgG4及IL-12水平升高，血清IL-13水平降低，血清塵螨sIgE無明顯變化。

關鍵詞：哮喘；粉塵螨滴劑；舌下免疫療法；免疫功能；兒童

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.45.028

中圖分類號：R256.12 文獻標志碼：B

收稿日期：(2015-08-05)

特異性免疫治療(SIT)可影響變應性疾病的發病機制，從而改變疾病自然進程[1]，是目前惟一針對過敏性疾病的對因治療方法[2]。舌下免疫治療(SLIT)是SIT的一種[3]，安全性及依從性較高,目前已廣泛用于治療過敏性哮喘及變應性鼻炎等過敏性疾病[4]，但SLIT的作用機制尚不明確。目前，國內有關兒童SLIT對其免疫機制的影響報道不多，且療程多在1年內。2011年10月～2014年10月，我們對輕中度塵螨過敏哮喘患兒予粉塵螨滴劑舌下含服治療2年，觀察血清塵螨特異性IgE(SlgE)、塵螨特異性IgG4(SlgG4)及IL-12、IL-13水平變化。

1資料與方法

1.1臨床資料哮喘患兒69例，男36例、女33例，年齡5～12歲。納入標準：①均符合中華醫學會小兒哮喘診斷及防治指南對支氣管哮喘的臨床診斷標準；②均為輕中度哮喘；③經體外過敏原檢測塵螨過敏，血清塵螨SlgE 2級或以上；④患兒家屬均簽署知情同意書。排除標準：①有心血管、肝、腎、肺結核等嚴重慢性疾病或炎癥；②嚴重免疫性疾病，如自身免疫性疾病、免疫缺陷病等；③服用β2受體阻滯劑患者；④重度持續性哮喘、哮喘病情不穩定或急性發作期、第1秒用力呼氣容積占預計值的百分比<70%；⑤未完成2年療程。根據隨機數字表法將患者分為觀察組32例與對照組37例，兩組性別、年齡等比較差異無統計學意義。

1.2治療方法兩組均予沙美特羅替卡松粉吸入劑(50 μg/100 μg)治療，前3個月每次1吸、2次/d，3個月后根據病情減量漸至停藥，如癥狀反復可調整用量，治療期間可據病情使用其他對癥治療藥物。觀察組在此基礎上予粉塵螨滴劑舌下含服治療，第1、2、3周分別使用滴劑1號(1 μg/mL)、2號(10 μg/mL)、3號(100 μg/mL)，每周第1～7天，每天按1、2、3、4、6、8、10滴依次遞增服用；從第4周開始使用滴劑4號(333 μg/mL)作為維持劑量，每次3滴，直至療程結束。患兒自行或在家長協助下將粉塵螨滴劑滴于舌下，含服1～2 min后吞咽，服藥后15 min內不再飲水進食，每日1次，固定時間用藥。治療期間若出現哮喘急性發作，暫停舌下含服粉塵螨滴劑，待病情穩定后繼續治療。兩組均治療2年。

1.3 血清塵螨SlgE、SlgG4檢測采用熒光酶聯免疫法。SlgE、SlgG4試劑購自上海鑫樂生物科技有限公司。患兒分別于治療前后采靜脈血2 mL，分離血清。在Unicap100系統中加入包被了塵螨抗原的固相載體CAP試劑，加入血清樣本后，根據待測指標分別加入酶標記的抗人IgE抗體、抗人IgG4抗體，最后加入底物，生成熒光物質，根據熒光強度計算SlgE、SlgG4水平。

1.4血清IL-12、IL-13檢測采用化學發光免疫分析法。IL-12、IL-13試劑購自上海鑫樂生物科技有限公司。患兒分別于治療前后采靜脈血2 mL，分離血清，在血清樣本中分別加入酶標記的抗人IL-12抗體、抗人IL-13抗體，最后加入底物，生成化學發光物質，在芬蘭酶標儀系統中根據發光強度計算各項待測指標水平。

2結果

兩組治療前后血清塵螨sIgE、sIgG4及IL-12、L-13水平比較見表1。

表1　 兩組治療前后血清塵螨sIgE、sIgG4

注：與同組治療前相比，*P<0.05；與對照組相比，△P<0.05。

3討論

SLIT已逐漸用于臨床[5]，但其作用機制尚未完全明確，目前研究主要側重于T細胞反應、產生抗體成分和效應細胞活性等免疫學變化[6]。國內學者在研究SLIT治療支氣管哮喘療效同時檢測血清sIgE水平,但結論不一[7,8]。目前研究認為，SIT是否導致變應原SlgE水平降低有可能受多種因素影響，如治療時間、環境變應原持續暴露等。有研究對塵螨過敏哮喘患兒SLIT治療1年后發現，SLIT組SlgE水平與非SLIT組比較差異無統計學意義，考慮可能是由于抗原特異性T淋巴細胞構象改變后導致對抗體產生的變化需相當長的一段時間，或由于SLIT治療中所用抗原劑量尚不足以致抗體型別的轉換[9]。本研究結果顯示，SLIT 后2年sIgE水平無明顯變化。WHO推薦的SIT時間為3～6年，通常在治療2～3年后sIgE水平才能逐漸緩慢降低。目前國內SLIT療程多為2～3年，療程結束癥狀多改善，而兒童對于變應原敏感性的改善可能需更長時間治療，故療程結束時sIgE不一定降低。

IgG4是IgG的一種抗過敏的非炎性亞型，由于其活性和親和性能更早地捕獲變應原，競爭性地阻斷肥大細胞與變應原IgE的結合，避免肥大細胞激活，減少炎性介質釋放，抑制過敏反應[10]。本研究SLIT 2年sIgG4水平明顯升高，與鄭伯強等[11]研究結論一致。Th1/Th2細胞功能紊亂是哮喘發病的重要機制，變應原對特異性個體誘導，導致患兒Th1/Th2分化和調控比例失衡，這種失衡的細胞因子微環境又促使Th0細胞向Th2細胞分化。IL-12由單核巨噬細胞分泌，促使Th0細胞向Th1細胞分化，抑制Th2細胞功能,降低氣道的高反應性；Th2型主要分泌IL-4、IL-5、IL-13，IL-13是多效細胞因子，直接促進IgE合成，可誘導痰液、上皮化生及氣道高反應。SLIT的機制是刺激機體對變應原產生免疫反應，多數變應原蛋白被舌下豐富的抗原遞呈細胞捕獲后，移行至舌下黏膜下的淋巴組織或附近淋巴結啟動脫敏反應，調節Th1/Th2淋巴細胞平衡[12]。本研究結果顯示，經SLIT治療后血清IL-12水平明顯升高，有利于T細胞兩個亞種的免疫應答處于平衡狀態。但SLIT后血清IL-13水平無明顯變化，與上述研究不一致，故經過SLIT后血清IL-13水平未必明顯下降。可見，SLIT對塵螨過敏哮喘兒童的免疫功能有調節作用,SLIT 后2年，血清塵螨SIgG4、IL-12水平上升,動態監測sIgG4、IL-12對臨床評估脫敏治療效果有一定指導意義。

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