淺論對廣藿香揮發(fā)性成分進行氣相色譜-質(zhì)譜分析的結(jié)果

吳紅旗 徐 蓉 秦昆明 金俊杰

（1泰州市中醫(yī)院 江蘇 泰州 225300；2南京海昌中藥集團有限公司 江蘇 南京 210061；3南京中醫(yī)藥大學(xué) 國家教育部中藥炮制規(guī)范化及標(biāo)準(zhǔn)化工程研究中心 江蘇 南京 210023）

廣藿香為唇形科植物廣藿香Pogostemon cablin(Blanco))Benth.的干燥地上部分，其味辛，性微溫，可入脾經(jīng)、胃經(jīng)及肺經(jīng)，具有芳香化濁、和中止嘔、發(fā)表解暑的功效[1]。我國廣東、廣西、海南等省均有栽培廣藿香。按照產(chǎn)地的不同，廣藿香可分為石牌廣藿香、高要廣藿香、湛江廣藿香和海南廣藿香，其中以石牌廣藿香的品質(zhì)最優(yōu)[2]。近年來，關(guān)于廣藿香藥材化學(xué)成分的研究主要集中在對其揮發(fā)性成分的研究。揮發(fā)性成分是廣藿香主要的功效成分[3]。現(xiàn)代藥理研究表明：廣藿香所含的揮發(fā)油具有抗細(xì)菌、抗真菌、抗瘧原蟲、調(diào)節(jié)胃腸的運動功能、促進消化液分泌、保護腸黏膜功能等作用[4-6]。進行體外抗病毒實驗的結(jié)果表明，廣藿香油具有抗柯薩奇病毒、抗腺病毒、抗甲型流感病毒和抗呼吸道合胞病毒的作用，但不具有抗單純皰疹病毒的作用[7]。廣藿香油對白色念珠菌有很好的體外抑菌活性，對白色念珠菌陰道炎模型小鼠有很好的治療作用，有成為治療念珠菌性陰道炎新型藥物的潛力[8]。廣藿香精油對甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌有顯著的抑制作用，其抑菌機制與其可破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性、損傷細(xì)胞膜、影響細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的通透性、改變膜蛋白的構(gòu)象有關(guān)[9]。目前，廣藿香揮發(fā)油所含化學(xué)成分的組成和結(jié)構(gòu)尚不明確。不同提取方式和不同產(chǎn)地廣藿香的揮發(fā)油其含量的差異較大。為了對廣藿香揮發(fā)油中的化學(xué)成分進行全面的分析，本研究采用水蒸汽蒸餾法提取廣藿香中的揮發(fā)性成分，用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用儀對其進行分析鑒定，并采用峰面積歸一化法測定其中各揮發(fā)性成分的相對含量，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與藥品

本次試驗所用的儀器為 Agilent 5975C MSD氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，本次試驗所用的廣藿香購自南京海源中藥飲片有限公司（批號：130427），經(jīng)南京海源中藥飲片有限公司的丁斐中藥師鑒定為唇形科植物廣藿香Pogostemon cablin(Blanco))Benth.的干燥地上部分。

1.2 揮發(fā)油的提取方法

稱取廣藿香100.00g，置于2000mL的圓底燒瓶中，加水1000mL，浸泡1h，經(jīng)水蒸氣蒸餾提取6h，直至提取出的揮發(fā)油不再增加，經(jīng)無水硫酸鈉脫水處理得到揮發(fā)油，揮發(fā)油的提取得率為2.30%。

1.3 色譜條件

色譜柱：安捷倫19091s-433HP-5MS，5%的苯甲基聚硅氧烷彈性石英毛細(xì)管柱（30m×250μm. 0.25μm）；進樣口的溫度為260℃；程序升溫：起始溫度為50℃，維持2min，之后以5℃·min-1的速度升至240℃，維持5min。載氣為He，流速為1mL·min-1，分流比為20:1，進樣量為 1 μL。

1.4 質(zhì)譜條件

接口溫度：260℃，電離方式：EI，電子能量：70eV，離子源溫度：230℃，四級桿溫度：150℃，調(diào)諧方式：標(biāo)準(zhǔn)調(diào)諧，進行質(zhì)量掃描的方式：全部，掃描范圍：20～500amu，電子倍增器的電壓：1553V，溶劑延遲時間：4min，進樣量：1μL，每個樣品平行進樣2針。

2 結(jié)果

在上述色譜與質(zhì)譜條件下對廣藿香的揮發(fā)性成分進行GC-MS分析，以面積歸一化法測定其揮發(fā)油各組分的相對百分含量，得到廣藿香揮發(fā)油的總離子流圖（詳情見圖1），經(jīng)過質(zhì)譜計算機 G1701EA-E.02.02Chem Station 軟件和NIST11.0標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜檢索庫檢索，并結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜譜圖鑒定廣藿香揮發(fā)油的化學(xué)成分，共得到104種成分，其中26種成分的匹配率在85%以上，其中相對含量在1%以上的成分依次為廣藿香醇（占21.00%）、棕櫚酸（占4.78%）、開司米酮（占3.60%）、西車烯（占3.12%）、α-愈創(chuàng)木烯（占1.75%）、β-廣藿香烯（占1.66%）、藍(lán)桉醇（占1.32%）和月桂酸（占1.08%）。廣藿香揮發(fā)油成分的鑒定結(jié)果見表1。

圖1 廣藿香揮發(fā)油的總離子流圖

表1 廣藿香揮發(fā)油化學(xué)成分的分析

3 討論

從廣藿香的揮發(fā)油中分離出來的成分共有104個，其中有26種成分的匹配度在85%以上，其中相對含量在1%以上的成分依次為廣藿香醇（占21.00%）、棕櫚酸（占4.78%）、開司米酮（占3.60%）、西車烯（占3.12%）、α-愈創(chuàng)木烯（占1.75%）、β-廣藿香烯（占1.66%）、藍(lán)桉醇（占1.32%）和月桂酸（占1.08%）。與已發(fā)表文獻中相關(guān)的數(shù)據(jù)[10-13]相比，本次試驗從廣藿香的揮發(fā)油中分離出的成分及含量存在差異性。經(jīng)炮制后的廣藿香飲片中揮發(fā)油的含量降低，在其功效成分中廣藿香醇的含量有所降低，廣藿香酮已檢測不到。

由表1可以看出，廣藿香中揮發(fā)油的成分多為15個碳的小分子化合物，主要為萜類化合物，其中以倍半萜的種數(shù)最多，并有少數(shù)單萜、半萜及三萜類化合物。廣藿香醇是對廣藿香揮發(fā)油的化學(xué)成分進行藥理作用研究的主要成分。進行Western blot檢測的結(jié)果顯示，廣藿香醇可增強細(xì)胞Caspase-3，Bax的表達，下調(diào)Livin，Bcl-2蛋白的表達，抑制DU145細(xì)胞的增殖，其作用機制與誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的效應(yīng)有關(guān)[14]。此外，廣藿香醇還具有抑制β-淀粉樣蛋白的神經(jīng)毒性、抑制及殺滅微生物等作用[15]。對小鼠進行廣藿香醇急性毒性試驗的結(jié)果顯示，廣藿香醇的安全性較高，屬于低毒藥物[16]。

對廣藿香揮發(fā)油的成分進行分析，可為今后闡明廣藿香飲片揮發(fā)油化學(xué)成的藥理作用提供重要的參考文獻。本試驗所用的廣藿香為經(jīng)炮制的藥材飲片。本試驗中關(guān)于廣藿香的GC-MS特征圖譜及其成分分析不能涵蓋所有廣藿香的品種。

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