非諾貝特片和膠囊的溶出度評價

非諾貝特片和膠囊的溶出度評價

趙婷1，余曉娟2,耿東升3*

(1.新疆醫科大學，烏魯木齊830054；2.新疆軍區第五干休所，烏魯木齊830002；3.新疆軍區聯勤部藥品儀器檢驗所，烏魯木齊830063)

摘要：目的利用光纖藥物溶出度儀(FODT-601)實時測定非諾貝特片(膠囊)的溶出度，并通過比較溶出曲線評價其制劑工藝和內在質量的差異。 方法采用FODT-601儀，以《中國藥典》2010年版規定的溶出度測定條件實時監測非諾貝特制劑的溶出曲線；并采用直觀分析、Weibull分布模型擬合以及f2相似因子法比較不同劑型、不同廠家、不同批號間的溶出曲線。 結果《中國藥典》2010年版規定非諾貝特片及膠囊溶出度標準是：60 min時取樣，其限度為標示量的60%，所選的所有藥物均在20 min時就滿足其限度規定。非諾貝特片與膠囊原創廠家的溶出行為較為一致，但國產廠家的非諾貝特片與膠囊溶出行為不一致；非諾貝特片國產廠家的溶出行為與原創廠家溶出行為差異較大，但非諾貝特膠囊國產廠家的溶出行為與原創廠家溶出行為較為一致；Weibull分布模型擬合法和f2相似因子法評價結果基本一致。 結論用FODT-601儀測定非諾貝特制劑，操作簡單，得到的數據信息完整，其溶出曲線用Weibull分布模型或f2相似因子法評價均可。

關鍵詞：非諾貝特片；非諾貝特膠囊;溶出曲線；光纖溶出度實時測定法

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2015.03.016

中圖分類號：R944

文獻標志碼：A

文章編號：1004-2407(2015)03-0270-05

Abstract:ObjectiveThe dissolution parameters of Fenofibrate Tablets and Capsules were determined with fiber optic medicament dissolution rate real time test instrument (FODT-601)， and its preparation process and inner quality difference were evaluated through the comparison of the dissolution curves. Methods The FODT-601 meter to real-time monitor was used to determine the dissolution of fenofibrate under the dissolution determination conditions of Chinese Pharmacopoeia 2010. Visual analysis， Weibull distribution model fitting and f2 similarity factor method were used to evaluate the different types， different manufacturers， and different batches′dissolution curves. ResultsChinese Pharmacopoeia 2010 edition requests the dissolution is 60% of the labeled amount at 60 min. All drugs tested met the specified limits at the time of 20 min.Fenofibrate Tablets and Capsules dissolution behavior of the original manufacturer was consistent， but dissolution behavior of Fenofibrate Tablets and Capsules for domestic manufacturers was inconsistent. Fenofibrate Tablets of original manufacturer and domestic manufacturers were different. The evaluation results of Weibull distribution model fitting and f2 similarity factor method were basically identical. Conclution Using FODT-601 meter to measure the dissolution of fenofibrate preparation is simple， and the data information is complete. The evaluation of dissolution curve with the Weibull distribution model is same to the f2 similarity factor method.

基金項目：新疆維吾爾自治區自然科學基金(編號：2013211A119)

作者簡介：趙婷，女，碩士研究生

收稿日期：(2014-10-28)

Invitroevaluation of dissolution of Fenofibrate Tablets and Capsules

ZHAO Ting1， YU Xiaojuan2，GENG Dongsheng3*(1.Xinjiang Medical University， Urumqi 830054，China； 2. the Fifth Retired Cadres of Xinjiang Military Region； 2.Xinjiang Military Region Lianqinbu Medicine Instrument Institute， Urumqi 830063，China)

Key words: Fenofibrate Tablets； Fenofibrate Capsules; dissolution curve;optical fiber dissolution real-time measurement

*通信作者：耿東升，男，主任藥師

非諾貝特(fenofibrate)為第二代苯氧芳酸類藥物，與吉非貝齊、苯扎貝特同屬于貝特類調脂藥物，于1998年在美國開始上市，在臨床上得到了廣泛應用[1]。非諾貝特片(膠囊)的體外溶出度檢測是評價其臨床療效的重要指標之一，本實驗采用光纖藥物溶出度實時測定儀(fiber-opic in situdissolution testing，FODT)[2-3]對不同廠家、不同批號的非諾貝特片與膠囊在線實時監測，旨在探討《中國藥典》2010年版有關非諾貝特片和膠囊溶出限度的合理性及溶出行為的評價方法，以期為其仿制藥的質量控制提供理論依據。

1儀器與試藥

1.1儀器光纖藥物溶出度實時測定儀(FODT-601，新疆富科思分析儀器有限公司)；梅特勒電子天平(AG285，梅特勒-托利多儀器(上海) 有限公司)；紫外分光光度儀(UV-2450，日本島津制作所)。

1.2試藥非諾貝特對照品(中國食品藥品檢定研究院提供，批號100733-200401，含量99.9%)；進口非諾貝特片(法國利博福尼制藥公司， 規格0.16 g，批號19877，標注為A)；國產非諾貝特片(上海信宜萬象藥業股份有限公司，規格0.1 g，批號110504，110602，09120902，標注為B1，B2，B3；江蘇神龍藥業有限公司，規格0.1 g，批號110907， 標注為C)；進口非諾貝特膠囊(法國利博福尼制藥公司， 規格0.2 g，批號18858，19285，20271， 標注為D1，D2，D3);國產非諾貝特膠囊(廣東先強藥業有限公司，規格0.1 g，批號120804，130105，130107，標注為E1，E2，E3；北京京豐制藥有限公司，規格0.1 g，批號120901， 130102， 130403，標注為F1，F2，F3);溶出用水為經脫氣的蒸餾水；其他試劑均為分析純。

2方法與結果

2.1儲備液的制備分別精密稱取非諾貝特對照品150.00，200.03，295.94和320.08 mg，置于250 mL量瓶中，加少量無水乙醇溶解，加溶出介質[10 g·L-1的十二烷基硫酸鈉溶液(SDS)]稀釋定容至刻度，搖勻，依此得到質量濃度為0.600 0，0.801 2,1.183 8和1.280 3 mg·mL-1的儲備液。

2.2檢測波長及光程的選擇稱取非諾貝特對照品約16.644 mg，加少量無水乙醇溶解，加入10 g·L-1的SDS稀釋至50 mL，吸取25 mL，用10 g·L-1的SDS稀釋至50 mL，相當于非諾貝特片溶出104.02 %時的質量濃度，以10 g·L-1的SDS為空白，于UV-2450上掃描其紫外吸收光譜，結果顯示，在206 和290 nm處有強吸收峰，在550 nm處無吸收。考慮到FODT儀的波長范圍為220～600 nm，選擇290 nm作為測定波長， 550 nm作為參比波長(參比波長可消除溶液中輔料的干擾)。根據L-B定律和儀器有效吸光度范圍，選擇2 mm規格探頭。

2.3溶出度實驗條件按照《中國藥典》2010年版(二部)規定的非諾貝特片(膠囊)溶出度測定條件：采用槳法；轉速：100 r·min-1(非諾貝特片)，120 r·min-1(非諾貝特膠囊)；溶出介質:10 g·L-1的十二烷基硫酸鈉溶液(取10 g十二烷基硫酸鈉，加水至1 000 mL)；溶出體積：1 000 mL；溫度：36.5～37.5 ℃。

2.4標準曲線的建立精密量取2.1項下對照品儲備液適量，分別用10 g·L-1的SDS稀釋，制成含非諾貝特約20～250 μg·mL-1的不同質量濃度的系列標準溶液，搖勻。將該系列標準溶液分別加入1～6 號10 mL燒杯中，六根光纖探頭同時浸入標準溶液中，掃描系列標準溶液得到吸收光譜，并采集得到在各通道測定各組溶液的吸光度，以溶出百分比C與吸光度A進行線性回歸,結果見表1。結果表明，在20～250 μg·mL-1范圍內線性關系良好。

表1實時測定線性方程及相關系數

Tab.1 The real-time equations and correlation coefficients

( n=7)

2.5精密度實驗分別配制相當于不同規格非諾貝特片(膠囊)溶出30%，50%和80%的系列非諾貝特對照品溶液，采用FODT-601儀測定，于1，4，7，9和12 h時，測定日內精密度，其RSD分別為1.02%，0.87%和1.23% (n= 6)，說明儀器的精密度較高，實驗數據可靠。

2.6回收率實驗分別將A、B、D、E各1片(粒)，溶于1 000 mL的10 g·L-1的SDS中，從中精密吸取25 mL,置于100 mL量瓶中，相當于溶出25%。分別精密加入溶出百分率為：①56.05 %，75.55 %和95.04%；②56.08 %，76.11 %和96.14%；③53.27%，73.98 %和94.70%；④54.00 %，75.00 %和96.00%的非諾貝特對照品，用FODT-601測定，并計算回收率。結果平均回收率分別為95.86%，96.84%，97.44%和97.39%；RSD值分別為1.10%，1.55%，0.85%和0.40% (n= 6)。

2.7溶出過程的測定及溶出曲線的直觀分析采用FODT-601儀，照2.3項下溶出度實驗參數，測定非諾貝特片和膠囊的實時溶出曲線及數據。記錄5，10，15，20，30，45和60 min的藥物累積溶出百分率,結果見表2，并以取樣時間(t)-平均累積溶出量(%)做圖,結果見圖1，直觀比較非諾貝特同一劑型不同廠家、不同規格和不同劑型的藥物溶出曲線類型(形狀)。結果發現：非諾貝特片原創廠家溶出速度明顯快于國產廠家(A廠家片劑18 min累積藥物溶出量達到了100 %，B和C廠家片劑60 min累積藥物溶出量才達到100 %，A片溶出曲線類似“廠”型，反映開始溶出早，溶出快，短時間即可達到基本溶出，B和C片類似“弧”型，反映溶出緩慢，短時間不能達到基本溶出)；非諾貝特膠囊原創廠家溶出速度與國產廠家具有一致性(D、E和F廠家的制劑經30 min累積藥物溶出量均達到100 %， D、E和F膠囊溶出曲線類似“S”型，反映開始溶出有遲滯，之后較快溶出)；同一個廠家不同批號藥品的溶出速度差異較小，溶出曲線形狀具有一致性。

表2不同廠家生產的非諾貝特片和膠囊的平均累積溶出百分率

Tab.2 The average cumulative dissolution amount of different manufacturer production of Fenofibrate Tablets and Capsules

廠家不同廠家生產的非諾貝特片和膠囊不同時間(min)的平均累積溶出百分率(%)5101520304560A14.9±1.754.8±3.088.9±3.4104.9±1.8113.0±2.8113.3±1.9113.4±2.2B125.6±0.743.7±1.055.3±1.863.8±2.177.0±2.789.3±3.497.9±1.5B225.5±1.645.3±1.557.0±1.364.2±2.377.8±1.490.5±1.699.3±1.8B329.8±1.346.5±1.757.9±2.065.6±2.476.9±2.989.3±3.098.0±0.8C30.6±2.249.2±2.961.1±2.969.6±3.580.4±4.492.0±4.999.5±1.9D113.7±2.547.8±7.770.7±5.683.0±3.995.7±2.6104.4±2.2109.7±2.1D214.4±1.853.1±2.074.8±2.185.7±2.097.2±1.7105.0±1.7109.1±1.8D318.9±3.760.4±3.783.2±2.394.1±2.0104.3±1.9110.9±1.9113.5±1.5E13.4±0.630.3±8.671.0±8.495.1±3.8108.8±1.9111.5±2.1112.1±1.8E24.5±0.940.9±9.371.1±6.887.4±4.0100.0±2.4105.9±2.3108.0±2.1E39.1±1.852.1±6.882.3±5.093.6±4.7102.6±4.3107.2±3.9109.1±3.5F113.3±2.656.0±4.481.9±2.293.6±2.7102.0±2.4106.5±3.2109.3±2.8F213.5±3.352.8±5.578.4±2.990.4±2.5101.7±2.1107.1±1.5108.6±1.9F312.7±2.551.3±8.576.9±4.388.6±3.199.3±2.6105.0±2.9107.0±2.2

圖1不同廠家、不同劑型、不同批號非諾貝特片與膠囊的溶出曲線比較

Fig.1 Comparison of fenofibrate dissolution curve of different types， different manufacturers， different batches

2.8非諾貝特片與膠囊溶出曲線、溶出參數的評價和比較

2.8.1Weibull分布模型擬合與參數提取根據Weibull分布模型[4]，計算體外溶出參數t50(溶出50%的時間)，td(藥物溶出63.2%的時間)，m(形狀參數)，并對其進行獨立設計資料的t檢驗,結果見表3。結果：非諾貝特片國產廠家開始溶出無時間遲滯，其余廠家制劑開始溶出均有時間遲滯。不同廠家非諾貝特膠囊的m(形狀參數)，td(min)和t50(min)值差異均無統計學意義(P>0.05)；不同劑型的非諾貝特片和膠囊的原創廠家的m(形狀參數)，td(min)和t50(min)值差異均無統計學意義(P>0.05)；非諾貝特片原創廠家和國產廠家的m(形狀參數)，td(min)和t50(min)值差異均有統計學意義(P<0.05)；國產廠家的非諾貝特片和膠囊的m(形狀參數)，td(min)和t50(min)值差異均有統計學意義(P<0.05)。

表3非諾貝特片(膠囊)體外溶出參數

Tab.3 Dissolution parameters of Fenofibrate Tablets (Capsules)invitro

± s， n=14)

注：τ為位置參數，也稱滯留時間，τ=0時，說明藥物制劑溶出無時間延滯，τ>0時，說明溶出有時間延遲；m為形狀參數，決定所擬合曲線的形狀；t0稱為尺度參數，表示時間的尺度。

2.8.2相似因子f2評價溶出曲線的相似性實驗通過對各時間點變異系數的比較，受試制劑與參比制劑在各時間點均滿足以下要求：除0時外，第1個時間點的變異系數未超過20%，從第2個時間點至最后1個時間點溶出結果的變異系數未超過10%；參比制劑與受試制劑含量差異未超過5%。因此，可以使用f2相似因子法作為模型比較其溶出曲線相似性，并以f2因子在50～100范圍內則溶出曲線相似為標準。分別以A和D為參比制劑，按2.7項下的實驗方法，選取5，10，15和20 min的溶出數據，采用f2相似因子法[5]對供試廠家藥品B、C、E和F進行統計分析和比較,結果見表4。

由于非諾貝特片的原研廠制劑A在15 min以內平均溶出率達85%以上，則無需進行曲線比較，而此時，仿制制劑亦應滿足此條件，但經測定，仿制制劑B1、B2、B3和C在15 min以內平均溶出率均未達到85%以上，可見非諾貝特片的兩個國產廠家的溶出過程與原研廠家的溶出過程不相似。非諾貝特膠囊的原研廠制劑D在15 min內平均溶出率未達85%以上，則需進行溶出過程比較。同一劑型不同廠家對比發現：非諾貝特膠囊原創廠家和國產制劑的溶出曲線相似(只有E1與原創廠家的溶出曲線不相似，考慮到批間差異，可忽略)；不同劑型對比結果發現：非諾貝特片和膠囊的原創廠家溶出曲線相似，國產廠家溶出曲線不相似。

表4不同時間點的累積溶出率的相似因子的統計結果

Tab.4 The statistical results of cumulative dissolution rate by similar factors analysis at different time points

廠家Q值f2值相似性Q值f2值相似性D-E1784.842.6 不相似B3-E12001.332.5不相似D-E2316.652.4相似B3-E21320.937.0不相似D-E3118.762.8相似B3-E31839.233.4不相似D-F178.767.1相似B3-F11722.034.1不相似D-F218.281.4相似B3-F21340.736.8不相似D-F316.382.3相似B3-F31205.538.0不相似D-A162.256.5相似

3討論

非諾貝特為難溶性藥物，《中國藥典》2010年版規定非諾貝特片及膠囊溶出度標準是60 min時取樣，其限度為標示量的60%，所選的所有藥物均符合規定。本實驗通過FODT-601儀分別實時測定非諾貝特片(膠囊)原創廠家不同批號以及2個國產廠家不同批號的溶出度，發現非諾貝特片原創廠家在15 min平均溶出率達到88.9%±3.4%，而國產廠家15 min平均溶出率才達到57.8%±2.0%，40 min平均溶出率才達到85%，故懷疑國產廠家是否在制定溶出限度時只是為做溶出度而做溶出度，不為療效只為合格；非諾貝特膠囊的原創和國產廠家在15 min平均溶出率就可以達到76.9%±3.7%，故考慮是否應該提高藥典的溶出限度。

溶出曲線的評價方法很多，本文僅使用目前應用最多、使用最廣的非模型依賴法——相似因子法和模型依賴法——Weibull分布模型擬合法進行非諾貝特片和膠囊溶出曲線的評價， Weibull分布模型擬合法能用幾個可統計比較的參數來描述溶出曲線，較好地擬合和提供溶出度數據，使數據的分析和解釋變得容易，但只能進行描述而不能充分地突出藥物的溶出動力學性質，沒有與藥物的溶出速率相關聯的參數，不能用于評價體內體外相關性 。相似因子法便于計算，可直接對溶出數據進行分析，無需模型擬合，但該法缺乏統計學依據，只使用各時間點均值，未考慮溶出值變異性以及溶出值與時間的相關性，且f2值易受溶出度取樣時間和點數的影響。本文用Weibull分布模型擬合法與相似因子法的判定結果基本一致，因此在非諾貝特片和膠囊的溶出曲線評價時這兩種方法均可采用。

按照現有的藥物質量標準檢驗，操作復雜，只檢測終點溶出值，無法發現其間的差別，而FODT采用原位過程監測，操作簡單，所得數據信息完整，反映了藥物在體外溶出的全過程，實現了藥物固體制劑溶出度體外測定的自動化分析[6]，故應當使其盡早地應用于藥品質量檢驗中。但由于不同廠家藥物以及同一廠家不同批號藥物的實時溶出行為均可能存在較大差異，如作為一種標準方法收載入藥典，并應用于具體藥物品種的溶出度測定，應深入實驗和比較研究，并統一溶出度的評價指標和方法。

總之，我們有必要改進溶出度評價方法，以及藥典的限度要求，全面分析和比較藥物的溶出曲線，才能有效地控制固體制劑的質量。本實驗結果可為新藥典非諾貝特和膠囊溶出度的測定提供實驗基礎和理論參考，并為臨床合理用藥提供理論依據。

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