松針提取物對高脂血癥大鼠血脂及主動脈壁ICAM-1表達的影響

黃靜，張愛元，周天罡，盧建濤(濰坊市人民醫院，山東濰坊261041)

松針提取物對高脂血癥大鼠血脂及主動脈壁ICAM-1表達的影響

黃靜，張愛元，周天罡，盧建濤
(濰坊市人民醫院，山東濰坊261041)

摘要:目的研究松針提取物對高脂血癥大鼠血脂及主動脈壁細胞間黏附分子1(ICAM-1)表達的影響。方法

將40只大鼠隨機分成正常對照組10只和高脂模型組30只，正常對照組給予正常飲食，高脂模型組給予高脂飲食，喂養2周后隨機分為高脂對照組、低劑量組、高劑量組各10只，高脂對照組繼續給予高脂飲食，低劑量組給予高脂飲食和松針提取物100mg/(kg·d)，高劑量組給予高脂飲食和松針提取物300mg/(kg·d)。于10周末取靜脈血檢測各組血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平，免疫組化法檢測各組主動脈壁ICAM-1表達情況。結果治療后低劑量組LDL-C水平較高脂對照組降低(P＜0.05)，但TC、TG、HDL-C無統計學差異;高劑量組TC、TG、LDL-C水平均較治療前及高脂對照組明顯降低(P＜0.05或＜0.01)，HDL-C水平升高(P＜0.05);低劑量組用藥前后血脂水平無明顯變化。高脂對照組ICAM-1表達較正常對照組明顯增加(P＜0.01);低劑量組較高脂對照組有所下降，但差異無統計學意義;高劑量組較高脂對照組顯著下降(P＜0.01)，但仍高于正常對照組(P＜0.05)。結論高劑量松針提取物對高脂血癥大鼠有降血脂作用，并能降低主動脈壁ICAM-1表達，抑制炎癥反應，保護血管內皮。

關鍵詞:高脂血癥;松針提取物;細胞間黏附分子1;大鼠

血脂代謝紊亂所致的動脈粥樣硬化是導致冠心病(CHD)發生、發展的重要危險因素。動脈粥樣硬化是一種慢性炎癥過程，細胞間黏附分子(ICAM)的表達與慢性炎癥過程密切相關。2013年10月～2014年10月，我們觀察了松針提取物對高脂血癥大鼠血脂及主動脈壁ICAM-1表達的影響。現報告如下。

1　材料與方法

1.1動物與試劑清潔級近交系雄性Wistar大鼠40只，體質量180～200 g，40日齡，由濟寧魯抗制藥公司提供。標準飼料含碳水化合物41.47%、脂肪14.42%、蛋白質21.06%，總熱量約為1 560 kJ/100 g。在標準飼料中添加10%熟豬油、5%雞蛋黃、2%膽固醇、1%膽酸鹽即為高脂飼料，總熱量約為1 940 kJ/100 g。松針提取物由寧夏宏德生物技術有限公司提供，含原花青素25.57%。

1.2動物分組與模型制備隨機抽取10只大鼠給予標準飼料喂養(正常對照組)，其余30只給予高脂飲食喂養(高脂模型組)，2周后高脂模型組取血測定TC、TG、HDL-C、LDL-C水平。以高脂模型組TC、TG、LDL-C水平較正常對照組明顯升高(P＜0.05)為模型制作成功。將高脂模型組隨機分為高脂對照組、低劑量組、高劑量組各

10只，分別給予高脂飲食、高脂飲食+松針提取物100mg/(kg·d)灌胃、高脂飲食+松針提取物300mg/(kg·d)灌胃，繼續喂養8周。實驗過程中共4只大鼠死亡，其中高脂對照組2只、低劑量組1只、高劑量組1只。

1.3血脂檢測分別于實驗2周(高脂模型確立當天)、10周時，內眥靜脈采血，采用酶法、全自動生化分析儀檢測血清TC、TG、HDL-C、LDL-C水平。

1.4 ICAM-1檢測于實驗10周采血后處死大鼠，取主動脈弓處標本，置預冷的2.5%戊二醛固定，石蠟包埋，用免疫組織化學方法檢測主動脈壁ICAM-1表達。ICAM-1表達于主動脈內皮細胞胞質和胞膜，呈棕黃色顆粒。顯微鏡顯影系統采集圖像，選擇血管壁隨機取3個視野(×400)，計算機自動測量并計算陽性信號積分光密度。

1.5統計學方法采用SPSS19.0統計軟件。計量資料以珋x±s表示，組間比較用方差分析，組內用藥前后比較用配對t檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1各組用藥前后血脂水平比較見表1。

2.2各組主動脈壁ICAM-1積分光密度比較見表2。

表1　各組用藥前后血脂水平比較(mmol/L，)

表1　各組用藥前后血脂水平比較(mmol/L，)

注:與正常對照組比較，*P＜0.01，#P＜0.05;與高脂對照組比較，△P＜0.05，P＜0.01;與用藥前比較，□P＜0.05。

組別TC　TG　LDL-C　HDL-C正常對照組用藥前　2.06±0.39　1.34±0.28　0.62±0.15　1.20±0.24用藥后　2.15±0.43　1.35±0.34　0.68±0.26　1.15±0.28高脂對照組用藥前　3.45±0.21*　1.92±0.37*　0.95±0.23*　1.13±0.15用藥后　3.65±0.31*　1.98±0.27*　1.18±0.28*　1.06±0.17低劑量組用藥前　3.40±0.26*　1.85±0.37*　0.91±0.21*　1.15±0.32用藥后　3.46±0.26#　1.78±0.34#　0.95±0.18#△　1.25±0.19高劑量組用藥前　3.47±0.32*　1.88±0.35*　0.94±0.15*　1.16±0.18用藥后　3.10±0.28＊□1.53±0.22#□0.75±0.15□1.45±0.38△

表2　各組主動脈壁ICAM-1積分光密度比較()

表2　各組主動脈壁ICAM-1積分光密度比較()

注:與正常對照組比較，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;與高脂對照組比較，△P＜0.01;與低劑量組比較，#P＜0.01。

組別　n　ICAM-1積分光密度正常對照組10　8.43±1.23高脂對照組　8　20.52±2.79＊＊低劑量組　9　19.03±1.86＊＊高劑量組　9　10.34±1.39＊△#

3　討論

本研究發現，大鼠經高脂飼養后TC、TG、LDL-C水平升高，給予松針提取物治療后，血清TC、TG、LDL-C水平顯著降低，HDL-C水平較用藥前升高。表明松針提取物能顯著改善高脂血癥大鼠的血脂代謝。松針提取物含有多種生物活性物質，原花青素是其主要成分之一。原花青素是一種強抗氧化劑，能夠降低機體的氧化應激水平、抑制LDL-C的氧化修飾［1］，并能改善血脂代謝紊亂，降低血清TC水平［2，3］。其機制可能與原花青素抑制TC和TG合成、并促使其降解和加速其排泄有關。研究發現，原花青素對影響血脂代謝的基因表達有一定調節作用。有研究發現，原花青素能夠下調SREBP2表達，降低糖尿病小鼠血TC水平。Steffensen等［4］發現，原花青素能夠顯著增加肝臟中LXRa基因的表達，從而降低血脂水平。另有研究發現，葡萄籽原花青素能夠通過與膽汁酸相同的通路激活FXR基因，通過上調SHP基因表達以及下調SREBP1的表達降低TG水平［5］。

ICAM-1屬于免疫球蛋白超家族，其表達與慢性炎癥過程密切相關。LDL在血脂增高時進入動脈壁增加，被氧化成為OX-LDL，后者可增加血管內皮細胞ICAM-1的表達［6～8］。研究顯示，原花青素可通過減少血管內皮細胞中ICAM-1的表達，減弱內皮細胞與白細胞之間的相互作用，抑制炎癥性損傷，達到保護內皮細胞的目的［9，10］。王峰等［11］發現，原花青素能夠顯著減少大鼠腦組織中ICAM-1表達。沈凌鴻等［12］發現，原花青素能夠降低急性壞死性胰腺炎大鼠體內炎癥介質ICAM-1水平。本研究發現，高脂血癥組ICAM-1表達較正常對照組明顯升高，給予松針提取物干預治療后ICAM-1表達明顯下降。表明松針提取物能夠抑制ICAM-1表達，抑制炎癥反應，保護血管內皮。

綜上所述，松針提取物在高脂血癥的治療中具有重要作用，高劑量松針提取物對高脂血癥大鼠有降血脂作用，并能降低主動脈壁ICAM-1表達。

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·臨床研究·

收稿日期:( 2015-05-20)

文章編號:1002-266X(2015)34-0030-02

文獻標志碼:A

中圖分類號:R589

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.34.012