常規藥敏試驗在臨床血液細菌檢驗中的應用價值

馬智龍云南省文山市人民醫院，云南　文山　663000

常規藥敏試驗在臨床血液細菌檢驗中的應用價值

馬智龍
云南省文山市人民醫院，云南文山663000

【摘要】目的:探討兩種藥敏試驗方法對血液細菌檢測的鑒定以及臨床應用價值。方法:選擇280份陽性血液標本進行常規藥敏和直接藥敏的檢查方法，分析鑒定結果。結果:直接法對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌檢測符合率同常規法比較差異無統計學意義(P＞0.05);兩種鑒定法藥敏試驗結果的檢驗敏感性比較差異無統計學意義(P＞0.05)。結論:直接與常規藥敏試驗在臨床血液細菌檢驗中檢出符合率均較高，但是直接藥敏試驗操作簡單、時間相對較短，有助于臨床細菌感染的血液檢測。

【關鍵詞】直接藥敏;常規藥敏;血液細菌檢驗

敗血癥和菌血癥一直是臨床上嚴重威脅患者生命安全的疾病，具有較高的病死率，因此快速準確的進行藥敏試驗與菌種的鑒定對有效開展臨床治療具有重要的意義[1]。近些年來隨著抗菌藥物的濫用造成了各種致病菌耐藥性與敏感性的變遷，如何合理選擇正確的細菌鑒定方法有助于提升對疾病診斷的準確率，藥敏試驗主要是通過血液樣本中細菌對于抗菌藥物的敏感度進行檢測達到對細菌類型的鑒定，常用的方法有常規檢驗和直接藥敏試驗等[2－3]。筆者對比分析了直接藥敏試驗和常規檢驗在血液細菌檢驗中的應用效果，現報告如下。

1　資料與方法

1.1研究對象選取2013年6月至2014年6月我院治療的發熱并全身感染患者300例，其中檢測陽性樣本280份，所有患者均采集血液標本，每人采血30ml，對樣本進行冷藏保存送檢驗科檢查。

1.2檢測方法常規藥敏試驗:采集陽性血樣在麥康凱平板、巧克力平板與血平板接種，16～22h后在溫度35℃、6%二氧化碳孵育后進行革蘭染色，得出結果后選擇合適酶采用Walkaway系統進行藥敏試驗鑒定。

直接藥敏試驗:將樣本放置BACTEC9240系統進行培養檢測，陽性標本使用消毒注射器抽取10ml放入無菌試管分離細菌，以1600r/min離心，6min后收集上清液并以2900r/min離心，經13min后去除上清液，使用PBS洗滌，兩次沉淀后進行重懸。將20μl懸液進行革蘭染色并在顯微鏡下觀察，藥敏試驗第一次使用MH + 6%羊血平板進行，得出結果后選擇適合酶將菌液濃度調為6.0×105cfu/L，接種至NC21綜合板最后進行藥敏試驗與細菌鑒定。一般菌種則在MH平板上接種1～3滴懸液，使用無菌試紙涂抹均勻，然后將其貼到藥敏紙片，采用2005NCCLS標準對敏感度、耐藥性進行評判。

1.3統計學處理應用SPSS l5.0軟件分析，計數資料采用百分比表示，數據對比采取χ2校驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2　結果

2.1280份陽性標本不同鑒定法符合率比較300例患者中陽性標本280份，直接藥敏試驗檢測革蘭陽性菌與革蘭陰性菌檢驗結果符合率為90.37%、86.02%，兩者比較差異無統計學意義(P＞0.05)，詳見表1。

表1　280份陽性標本不同鑒定方法符合率比較(份)

2.2兩種鑒定方法藥敏試驗結果比較采用兩種藥敏試驗方法對革蘭陽性菌和陰性菌檢驗敏感度同常規試驗法比較差異無統計學意義(P＞0.05)，詳見表2。

表2　兩種鑒定方法藥敏試驗結果比較表(份)

3　討論

近年來隨著細菌耐藥性的增加，敗血癥和菌血癥等疾病逐漸增多，血液疾病患者病死率逐年提升，目前在

國外抗生素已經被列為控制使用的藥物，研究顯示抗生素在快速治愈細菌感染的同時會提高該細菌抗藥性，使用藥物的頻率決定了細菌耐藥性的高低[4－5]。大量的臨床試驗證實一旦使用抗菌藥物后有細菌存活，此細菌繁殖的后代具備一定抗藥性，如果再次發生感染所使用抗生素藥量低于前次用量治療效果將不明顯，而加大用量后細菌存活幾率超出原始菌株，這也就大大增加了臨床治療的難度[6]。因此臨床上治療細菌引發疾病如何快速準確鑒定細菌種類成為治療成敗的關鍵，快速的得到檢驗結果可以減少患者等待時間，降低患者病情加重甚至死亡的幾率。

傳統的臨床檢測方法為常規藥敏試驗，通過定性方法進行試驗，通過抑菌環的直徑和抗菌藥物抑菌的濃度負相關進行試驗設計，但是條件要求較高，臨床使用具有一定的局限，而且檢測的時間相對較長，需要等待2 ～3d的時間，而在等待結果的時間只能憑借醫師臨床經驗用藥，治療效果一般。我院對比了直接藥敏法對血液標本的檢測，該方法快速、高效，通過研究顯示總符合率同常規法無明顯差異，同時該方法的檢測時間在10h左右，可以明顯的縮短檢測的時間，降低耗材的使用，操作步驟更簡單，適合臨床血液細菌的檢測[7－8]。本研究顯示，直接法在對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌檢測符合率同常規法比較差異無統計學意義(P＞0.05)。兩種鑒定法藥敏試驗結果的檢驗敏感性比較差異無統計學意義(P＞0.05)。

綜上所述，直接與常規藥敏試驗在臨床血液細菌檢驗中檢出符合率均較高，但是直接藥敏試驗操作簡單、時間相對較短，有助于臨床細菌感染的血液檢測。

參考文獻

[1]程向方，昌建明．支原體培養在治療后復查不同分離培養時間與療效分析[J]．中國誤診學雜志，2011，11(9): 32－33．

[2]張培，王衛文，夏永祥．醫院葡萄球菌的臨床分布及其耐藥性分析[J]．國際檢驗醫學雜志，2011，32(8): 68－69．

[3]李慧．兩種細菌鑒定法在臨床血液檢驗中的應用[J]．現代預防醫學，2011，38(9): 641－642．

[4]陳歡歡，文怡，劉根，等．焰血培養陽性標本直接細菌鑒定和藥敏中應用分離膠試管的方法探討[J]．實用臨床醫藥雜志，2011，15(15): 156 －157．

[5]田月如，阮斐怡，劉紅，等．革蘭陰性菌引起的血培養陽性標本的直接鑒定藥敏試驗[J]．中華微生物學和免疫學雜志，2011，1(3): 220－224．

[6]張茂海．兩種細菌鑒定法在臨床血液檢驗中的應用研究[J]．湖南中醫藥大學學報，2011，31(12): 3－7．

[7]李祖新．臨床血液檢驗中的兩種不同細菌鑒定法應用分析[J]．中外醫療，2013，24(6): 185－186．

[8]歐志方．兩種細菌鑒定法在臨床血液檢驗中的應用分析[J]．當代醫學，2013，2(3): 64－65．

收稿日期:( 2014.11.11)

【文章編號】1007－8517(2015)03－0104－02

【文獻標志碼】A

【中圖分類號】R446.11