白番紅花球莖提取物對小鼠急性毒性的實驗研究

楊元華1劉　靜1韓汝春1陳媛媛1孫　艷2周冬梅2?！￠?1.新疆伊寧衛生學校，新疆　伊寧　835000; 2.新疆伊犁州友誼醫院，新疆　伊寧　835000

白番紅花球莖提取物對小鼠急性毒性的實驗研究

楊元華1劉靜1韓汝春1陳媛媛1孫艷2周冬梅2牛榕2
1.新疆伊寧衛生學校，新疆伊寧835000; 2.新疆伊犁州友誼醫院，新疆伊寧835000

【摘要】目的:觀察白番紅花球莖提取物對小鼠的急性毒性反應，評價其安全性，為其新藥開發和臨床安全用藥提供理論依據.方法:采用急性毒性實驗方法，對小鼠ig不同濃度(88. 80、93. 86、99. 20、104. 86、111. 00g/kg)的白番紅花球莖提取物，觀察并記錄小鼠的活動和毒性反應;采用改良寇氏法計算白番紅花球莖提取物對小鼠ig的半數致死量(LD50)和95%的可信區間.結果:白番紅花球莖提取物對小鼠7d內ig的LD50為100. 46g/kg，其95%的可信區間為91. 42～109. 50g/kg.結論:白番紅花球莖提取物有較小的毒性，該結果為其藥效學實驗和臨床應用提供了科學依據.

【關鍵詞】白番紅花球莖;急性毒性;半數致死量

Acute Toxicity of the Crocus Alatavicus Regel et Sem Sativus Corms Extract on Mice

YANG Yuan-hua1，LIU Jing1，HAN Ru-chun1，CHEN Yuan-yuan1，SUN Yan2，ZHOU Dong-mei2，NIU Rong2

1. Xinjiang Yining health school，Yining 835000，China;

2. Xinjiang Yili Prefecture friendship hospital，Yining 835000，China

Abstract:Objective To observe acute toxicity of the Crocus alatavicus Regel et Sem sativus corms extract in mice，evaluate its safety，provide a theoretical basis for new drug research and clinical safety of medication．Methods To record its activity and toxicity in mice by Acute toxicity test method，The mouse ig with different concentrations(88. 80、93. 86、99. 20、104. 86、111. 00g/kg)of Crocus alatavicus Regel et Sem sativus corms extract; Using Karber method modified to calculate Crocus alatavicus Regel et Sem corms extract on mice ig median lethal dose(LD50)and 95% confidence intervals．Results Crocus alatavicus Regel et Sem sativus corms extract on mice 7d ig LD50is 100. 46g/kg，Its 95% confidence interval 91. 42～109. 50g/kg．ConclusionCrocus alatavicus Regel et Sem sativus corms extract had lower toxicity，It provide a scientific basis for pharmacodynamic experimental and clinical applications．

Key words:Crocus alatavicus Regel et Sem sativus corms; Acute toxicity; Median lethal dose

白番紅花(Crocus alatavicus Regel et Sem)是鳶尾科番紅花屬的多年生草本植物，主要分布在新疆伊犁地區各縣的山坡上(海拔1200～3000m)，物產資源豐富.白番紅花球莖是白番紅花的地下球莖，又稱土馬錢子，是哈薩克族民間常用藥物，在民間主要是搗碎放入馬奶子中服用，用于治療風寒濕痹、跌打腫痛、腰腳無力等疾病.目前該藥的文獻記載很少，只是對白番紅花的植物形態有所描述[1－3]，對白番紅花球莖提取物毒性研究未見報道.本實驗對白番紅花球莖提取物進行了小鼠灌胃急性毒性研究[4－6]，為其進一步藥效學實驗提供理論依據.

1　材料與儀器

1. 1藥材白番紅花球莖采于新疆伊犁察布查爾錫伯自治縣海拔1500米的山坡上，經新疆維吾爾自治區藥品檢驗所主任藥師劉勇民鑒定為鳶尾科番紅花屬多年生植物白番紅花的球莖.藥材晾干，粉碎成粗粉備用.

1. 2動物昆明小鼠，SPF級，雌雄各半，18～22g，由新疆醫科大學動物實驗中心提供，許可證號: SCXK(新)2003－001，雌性未產無孕，自由攝食和飲水，室溫保持18 ～22℃，相對濕度40%～70%，實驗前適應3d.

1. 3儀器電子天平; RE－2000A旋轉蒸發儀(上海亞榮生化儀器廠); SHZ－D(Ⅲ)循環水式真空泵(上海衛凱儀器設備有限公司衛凱);電熱恒溫水浴鍋(北京永光明醫療儀器廠);注射器;小鼠灌胃器等.

2　方法

2. 1藥物制備稱取白番紅花球莖粗粉100g，加1000ml 60%的乙醇于水浴上加熱回流2h，過濾，提取2次，合并濾液，于旋轉蒸發儀上濃縮至無醇味，得濃縮液54ml(每毫升濃縮液相當于1. 85g生藥)備用，用時再用蒸餾水配成相應濃度.

2. 2急性毒性實驗預試驗找出藥物對小鼠的最大不致死量Dn為88. 80g/kg和最小全致死量Dm為111. 00g/kg，共分5組，求出組間比r為1. 057;正式試驗:選取昆明小鼠50只，雌雄各半，隨機分成5組，每組10只，給藥前12h均禁食不禁水，分別按照預試驗結果88. 80、93. 86、99. 20、104. 86、111. 00g/kg藥物劑量，依次給5組小鼠灌胃一次，連續觀察并記錄7d內出現的中毒癥狀、死亡情況，并對死亡小鼠立即解剖，肉眼觀察記錄主要損害的器官及病理變化情況，最后根據各組動物死亡數，計算出小鼠口服白番紅花球莖提取物的半數致死量(LD50)和95%的可信區間.

3　結果

3. 1一般癥狀觀察白番紅花球莖提取物隨劑量的升高，小鼠表現為安靜、活動減少、飲食減少，未死亡小鼠觀察4 ～6d基本恢復正常.中毒死亡的小鼠主要在72h內，中毒死亡的小鼠外觀主要表現為嘴、鼠尾、眼球等處發紫;解剖后發現胃腸脹氣，肝臟發黑.

3. 2 LD50測定小鼠ig白番紅花球莖提取物，隨劑量增大死亡率增加，各劑量組小鼠死亡狀況見表1，根據改良寇氏(Karber)法計算半數致死量(LD50)為100. 46g/kg，其95%可信區間為91. 42～109. 50g/kg.

表1　白番紅花球莖提取物對小鼠急性毒性實驗死亡率的影響

4　討論

急性毒性實驗是藥物安全性評價的第一步，為全身給藥的毒性研究內容之一，它可以為今后長期毒性實驗、特殊毒性實驗和藥效學實驗等研究的劑量選擇和指標設計提供參考依據.本次急性毒性實驗的結果小鼠ig白番紅花球莖提取物的LD50為100. 46g/kg，其95%可信區間為91. 42 ～109. 50g/kg，如按白番紅花球莖生藥、藥理實驗中動物間和動物與人體間的等效劑量換算[7]，相當于成人(60kg)用669. 7g生藥量，而該藥材在民間最高用量為9g，則相當于成人用量的74倍，根據化學物質的急性毒性分級標準，該藥材屬低毒藥材.由于該藥材有一定毒性，因此在哈薩克族民間使用時一定要注意適應癥、劑量、療程等，以防毒性反應的發生.

參考文獻

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[2]劉勇民．維吾爾藥志(下冊)[M]．烏魯木齊:新疆科技衛生出版社，1999: 253．

[3]中國科學院中國植物志編輯委員會．中國植物志(第十六卷第一分冊)[M]．北京:科學出版社，1985: 122．

[4]徐淑云，卞如濂，陳修．藥理實驗方法學[M]．3版．北京:人民衛生出版社，2002．

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[7]黃繼漢，黃曉暉，陳志揚，等．藥理實驗中動物間和動物與人體間的等效劑量換算[J]．中國臨床藥理學與治療學，2004，9(9): 1069．

組別n凋亡率

注:與對照組比較，*P＜0. 05，＊＊P＜0. 01.

收稿日期:( 2014. 12. 10)

作者簡介:楊元華(1969－)，男，高級講師，主要從事藥理學教科研工作.

基金項目:伊犁哈薩克自治州科技計劃項目(YZ201201032).

【文章編號】1007－8517(2015)05－0023－02

【文獻標志碼】A

【中圖分類號】R285. 5