禽衣原體病及綜合防控措施研究

朱雅寧 （吉林大學動物醫學學院130000）

禽衣原體病及綜合防控措施研究

朱雅寧 （吉林大學動物醫學學院130000）

禽衣原體疾病是一種以鸚鵡熱嗜性衣原體以及流產嗜性衣原體為病原的疾病，主要的癥狀有肺炎、心包炎、氣囊炎等。衣原體能夠寄生在任何年齡段的家禽體內，給養禽業造成難以估量的經濟損失，因此我們必須給予更多的關注和重視，降低其所造成的經濟損失，推動養禽業走向可持續發展道路。

禽衣原體病；人畜共患病；綜合防控

禽衣原體病 (Avian Chlamydiosis，AC)是一種能夠通過接觸在禽類個體中傳播的疾病。本病能引起肺炎、流產、腸炎、腦炎、眼結膜角膜炎或多發性關節炎等多種疾病。國際獸疫局 (OIE)將此病列為二類傳染病。目前已確定有190多種鳥類動物體內存在衣原體，包括雞、鴨、火雞、鴿等。本病在世界范圍均有分布。其中在美國以火雞感染后傳播給人類的案例很多，西歐地區人口感染這種疾病主要是因為鸚鵡等觀賞鳥類傳播的，而在東歐以及當時的蘇聯，主要的病源來自于鴨和火雞。國內針對這種疾病最早的報道可以追溯到上世紀中期，當時研究人員對北京一家養鴨場肺炎員工展開調查，結果表明有14人鸚鵡熱血清呈陽性。家禽衣原體感染造成的危害不但影響家禽的生產性能，而且經垂直傳播途徑危害子代。因此，家禽衣原體病的防治工作相當重要。

1 病原學

鸚鵡熱衣原體是衣原體科 (Chlalmydiaceae)衣原體屬(Chlalmydia)，這種微生物寄生在細胞里面。根據其體積大小，可以將其分為兩種，一種是直徑在0.2～0.5μm之間的原體 (Elementary body，EB)，它是一種最小的原核生物，EB處于感染形態，主要存在于靶柱狀上皮細胞外表和細胞中；另一種是網狀體 (Reticular body，RB)，它是細胞代謝最為活躍的形態，直徑達到0.6～1.5μm之間，以球形或不規則形狀為主，通透性很低。

2 生物學性狀

2.1 基本形態

鸚鵡熱衣原體為革蘭氏陰性，光學顯微鏡下可見，直徑0.3～0.4μm。細胞壁上存在多糖抗原。細胞質中有DNA和RNA，并有不完全的酶系統，在宿主細胞質的空泡內增生，具有特異性包涵體。

2.2 培養特性和生化特性

人工培養衣原體，即把衣原體注入到一周齡雞胚卵黃囊里面，放置在36～37℃溫度環境進行孵育，5～6d后雞胚死亡。此時黃膜里面布滿血液，能夠輕易地剝離下來。部分胚體出現了小的出血口。制成涂抹片后能夠觀察到大量的衣原體。有些胞漿里面能夠發現包涵體。將上述雞胚放置在-70℃溫度環境下，衣原體的壽命超過10年。此外也能在McCoy細胞、鼠L細胞、Hela細胞、Vero細胞、BHK21細胞、BGM細胞、Chan早氏人肝細胞內生長繁殖。

鸚鵡熱衣原體和理化物質接觸后，性質會發生很大的變化，甚至直接死亡。將其置于70%乙醇、2%NaOH、1%HCl等環境下，只需幾分鐘就會徹底喪失感染力，而將其置于0.5%石碳酸或0.1%的福爾馬林中，它會在24h內死亡。相比高溫條件，其對低溫的耐受力更強，在56℃環境下僅能生存5min，在37℃環境下能夠生48h，但在-70℃溫度下其壽命長達10年左右。如果其所處的環境中水分較少，會在5周后死亡。在室溫、陽光條件下生存期不超過6d，紫外線對衣原體有很強的殺滅作用。在水中可存活17d。四環素、氯霉素和紅霉素等抗生素有抑制其繁殖作用。

2.3 毒性

鸚鵡衣原體可在其眾多宿主動物中引起廣譜疾病，典型癥狀有高熱、惡寒、頭痛、咳嗽等。從癥狀上來看，和感冒、呼吸道疾病有很多相同之處，因此容易發生誤診。

3 衣原體流行情況

上世紀60～70年代，歐美禽衣原體大范圍傳播，給養禽業帶來了嚴重的經濟損失。國內針對這種疾病最早的報道可以追溯到上世紀中期，當時研究人員對北京一家養鴨場肺炎員工展開調查，結果表明有14人鸚鵡熱血清呈陽性。2001年，劉棋及其研究小組從廣西采集1568份雞血清并對其衣原體抗體進行檢測，結果表明呈陽性比例達到了20.66%。2003年，京津地區爆發了一場大規模肉雞呼吸道疾病，石巖及其研究小組對此次疫情中的病雞的血清進行檢測，結果表明，10～30%的肉雞血清呈衣原體陽性。2004年，北京某賽鴿養殖場發生了大規模的傳染疾病，大量賽鴿出現結膜炎、鼻炎等癥狀。在過去的幾年間，人們對衣原體的危害有了更加全面的認識，相關的研究成果也逐漸豐富起來。

4 衣原體診斷技術研究進展

4.1 光學顯微鏡檢查

在無菌環境下收集病料，比如血液、患有相關疾病的內臟、流產胎兒、分泌物等，制片并通過Gimenez進行染色處理，包涵體里面的原生小體 （EB）經過染色后變成紅色、紫紅色，網狀體 （EB）變成藍綠色。對病理組織切片進行觀察，能夠看到的組織細胞胞漿李曼的包涵體，形狀以圓形為主，也有部分呈不規則形。

4.2 雞胚分離法

取樣品懸液0.2～0.5ml，接種到6～7日齡的雞胚卵黃囊中，放置在39℃環境下孵育。3～10d后死亡的雞胚卵黃囊血管達到充血狀態。在無菌狀態下，將雞胚卵黃囊取出并涂片，顯微鏡下觀察，如果存在很多衣原體原生小體的話，就能夠進一步確定。

4.3 血清學診斷方法

4.3.1 間接血凝試驗 (IHA)

通過高純度的衣原體對綿羊紅細胞處理后，進行動物血清衣原體抗體的檢測，這種方法即IHA。IHA的優勢在于檢測效率高、敏感性好。

4.3.2 酶聯免疫吸附試驗 （ELISA）

用ELISA檢查衣原體脂多糖 （LPS）抗原，可以揭示出各種衣原體是否存在。不過考慮到LPS和部分革蘭氏陰性菌的表位是一致的，因此會因為交叉反應導致假陽性問題。要解決這一問題，可以采取含有特異性單克隆抗體的ELISA試劑盒，不過這又會導致敏感性降低的問題。

4.4 熒光PCR方法

已被廣泛用于鸚鵡熱衣原體的外膜主要蛋白基因的檢測和多形態膜蛋白基因的檢測，使用PCR技術在特異性方面的表現令人滿意，不過如果要達到敏感性要求，必須對樣品進行前PCR處理，以獲得短的DNA片段進行擴增，或用套式PCR擴增，可以提高本方法的敏感度。

5 天津地區禽衣原體綜合防控措施研究

5.1 合理選場

在確定養殖場所時，必須兼顧養殖禽類和人的雙方安全。在設計和建造養殖場時，必須建造環保處理系統，布置消毒設備。

5.2 建立嚴格的防疫消毒制度

應用比較廣泛的消毒液主要是5%來蘇兒溶液、3%NaOH溶液、10%漂白粉溶液等。對圈舍進行大范圍的消毒，一旦發現疑似病例，馬上對一定區域內實施重點消毒處理，采取滅蚊、蠅、鼠措施。

5.3 定期監測

繁殖用禽類必須全部接受檢測，隨機抽取10%進行檢測。一旦發現衣原體陽性檢測結果，或者是疑似病例，馬上采取隔離措施并淘汰，避免傳染。

5.4 藥物預防和治療

最常用的藥物是四環素和土霉素，在感染早期，連續5d以上投給大劑量的四環素，可使疫病得到控制。在精液中發現衣原體的種雞，應以治療量四環素連續投藥3～4d，間隔5d再重復一個療程。

6 討論

禽衣原體防控工作是畜牧業實現長期穩定健康發展的重要保障。我們要實施以監測、防控為主的綜合措施，不斷探索符合天津實際的動物疾病防治體系，為疫病的有效防治創造更好的條件，逐步實現重點疫病從控制到消滅的目標。

天津市農業科技成果轉化與推廣項目 （201204040）。

朱雅寧 （1982-），女，獸醫師，本科，主要從事動物疫病實驗室檢測工作。

雷連成。