通督活血湯抗炎鎮痛作用的實驗研究*

吳　昊，董秋梅

(1.內蒙古醫科大學2013級碩士研究生,內蒙古 呼和浩特 010110; 2.內蒙古醫科大學中醫內科學教研室，內蒙古 呼和浩特 010110)

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·實驗研究·

通督活血湯抗炎鎮痛作用的實驗研究*

吳昊1，董秋梅2

(1.內蒙古醫科大學2013級碩士研究生,內蒙古 呼和浩特 010110; 2.內蒙古醫科大學中醫內科學教研室，內蒙古 呼和浩特 010110)

摘要目的：探討通督活血湯的抗炎、鎮痛作用。方法：采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹實驗,觀察通督活血湯的抗炎作用；采用醋酸致痛及熱致痛模型，觀察通督活血湯的鎮痛作用。結果：通督活血湯可減輕二甲苯致小鼠耳炎癥反應的腫脹度，顯著減少醋酸致痛時小鼠扭體反應數，通督活血湯高、中劑量組可明顯提高熱致痛小鼠的痛閾值，延長抬腳反應時間。結論：通督活血湯具有良好的抗炎、鎮痛作用。

關鍵詞通督活血湯；抗炎；鎮痛；動物；小鼠

通督活血湯是在全國第四批名老中醫臨床經驗與學術思想傳承指導教師、內蒙古地區名老中醫朱宗元教授治療頸椎病的經驗方[1]基礎上，結合臨床治療脊柱關節疾病經驗，加減擬名而成。為進一步明確通督活血湯的藥理藥效，拓展其應用范圍，筆者對該方的抗炎、鎮痛作用進行了實驗研究。

1材料與方法

1.1動物

健康昆明種小鼠200只，雌雄各半，體質量(25±5)g，由內蒙古大學實驗動物研究中心提供,合格證號：SCXK(蒙)2002-0001。

1.2藥品、試劑與儀器

通督活血湯由葛根、桂枝、赤芍、白芍、鹿角膠、片姜黃、桃仁、紅花、川芎、地龍、白芷、雞血藤、威靈仙、水蛭、土鱉蟲、甘草、補骨脂、青風藤、徐長卿組成，由內蒙古醫科大學中醫學院實驗室制備；塞來昔布膠囊，輝瑞制藥有限公司產品，批號 J20120063；頸復康顆粒，河北頸復康藥業集團有限公司產品，批號 Z13022204。冰醋酸(批號20140617)、二 甲 苯 (批 號20140908)，均為分析純，天津市致遠化學試劑有限公司產品。 TE214S型電子天平，北京賽多利斯科學儀器有限公司產品；YLS-6B智能熱板儀，安徽正華生物儀器設備有限公司產品；YLS-Q4型耳腫打孔器，南京便診生物科技有限公司產品。

2方法與結果

2.1統計學方法

2.2抗炎實驗

觀察通督活血湯對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響[2]。將60只小鼠(雌雄各半)隨機分為6組，正常對照組、塞來昔布組(0.03 g/kg)、頸復康組(2.60 g/kg)，通督活血湯高(54.6 g/kg)、中(27.3 g/kg)、低(13.7 g/kg)劑量組，每組10只。各實驗組小鼠每日灌胃給藥1次，正常對照組給等容積蒸餾水，0.04 mL/g，連續7 d。末次給藥后30 min，每只小鼠右側耳廓正、反面均勻涂抹0.02 mL 二甲苯。造模1 h后，將小鼠頸椎脫臼處死，沿耳廓對稱剪下小鼠兩耳，用直徑 8 mm 打孔器在左右耳廓相同部位打孔取材，迅速用電子天平精密稱量，計算小鼠耳廓腫脹度及抑制率。腫脹度(mg)=右耳片質量-左耳片質量。抑制率(%)=(正常對照組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/對照組平均腫脹度×100%。結果見表1。

注:與正常對照組對比,*P<0.05,**P<0.01。

由表1可知：與正常對照組對比，塞來昔布組、頸復康組和通督活血湯高、中、低劑量組小鼠耳腫脹度降低，差別有統計學意義(P<0.01或P<0.05)。頸復康組耳腫脹度>通督活血湯高劑量組>塞來昔布組,但差別無統計學意義(P> 0.05 )。通督活血湯高、中、低劑量組之間耳腫脹度兩兩對比，差別均有統計學意義(P<0.01)。結果顯示:通督活血湯高、中、低劑量組均對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有抑制作用(P<0.01或P<0.05)。 表明：通督活血湯具有明確抗炎作用，但存在量效關系，其中高劑量療效最優，與塞來昔布、頸復康的抗炎作用相當。

2.3鎮痛實驗

2.3.1扭體法[2]

60只小鼠的分組及給藥方法同2.2。末次給藥后30 min,每只小鼠給予 6 g/L醋酸溶液0.2 mL腹腔注射，觀察并記錄各小鼠首次扭體時間(潛伏期)及20 min內扭體次數,計算扭體反應抑制率。結果見表2。

注:與正常對照組對比,*P<0.05,**P<0.01。

由表2可知：與正常對照組對比，塞來昔布組、頸復康組和通督活血湯高、中、低劑量組小鼠扭體潛伏期延長，扭體次數減少，差別有統計學意義(P<0.01或P<0.05)。通督活血湯中劑量組扭體次數>通督活血湯高劑量組>頸復康組>塞來昔布組,但差別無統計學意義(P>0.05)。通督活血湯高、中、低劑量組之間潛伏期和扭體次數兩兩對比，高低組間有統計學意義(P<0.05)，高中、低中組之間對比均無統計學意義(P>0.05)。結果顯示:通督活血湯高、中、低劑量均能減少醋酸所致小鼠扭體反應次數(P<0.01或P<0.05)。表明：通督活血湯對醋酸所致小鼠有鎮痛作用，但存在量效關系，其中高劑量療效最優，高、中劑量與塞來昔布、頸復康對醋酸致痛的鎮痛作用相當。

2.3.2熱板法

參照文獻[2]方法進行。將智能熱板儀加熱至(55.0±0.5) ℃ ,取小鼠1只放在熱板儀上，按“開始”鍵記錄時間，自放入熱板儀至出現舔后足所需的時間(s)作為該鼠的痛閾，凡舔足時間<5 s,或者>30 s,或者跳躍者棄之不用。取合格的60只小鼠進入下一步實驗，分組及給藥方法同2.2。重復測定正常痛閾值,取兩次正常痛閾平均值作為給藥前痛閾值,末次給藥后分別測量并記錄第15 min、30 min、60 min、90 min、120 min各小鼠舔后足所需時間。結果見表3。

注:與正常對照組對比，*P<0.05,**P<0.01。

由表3可知：給藥前各組小鼠熱板痛閾值差別無統計學意義。給藥后各組小鼠熱板痛閾值較給藥前、各給藥組給藥后各時間點小鼠熱板痛閾值較正常對照組痛閾值,均有不同程度地延長。與正常對照組對比，塞來昔布組、頸復康組和通督活血湯高、中劑量絕大多數時間點鎮痛閾值均有明顯提高，表現出明顯鎮痛作用(P<0.01或P<0.05)；通督活血湯低劑量組在60min、90min時對熱刺激所致小鼠疼痛有明顯抑制作用(P<0.05)，其余時間鎮痛作用不明顯。結果顯示:通督活血湯各劑量均能不同程度地延長小鼠熱板痛閾時間,延長抬腳反應時間。表明：通督活血湯對熱致痛小鼠有鎮痛作用，但存在量效關系，其中高劑量療效最優。隨著給藥時間的延長，通督活血湯作用效果持久性也比較好。

3討論

頸椎病屬中醫學“痹癥”范疇[3]，過去多發于中老年人，而現在由于工作、生活方式的改變，發病率逐年升高，且發病年齡呈現年輕化趨勢，已成為人類嚴重的公共衛生健康問題之一[4]。中醫學認為年老體衰，陽氣虧虛，督脈氣血虧虛，失于溫煦，脈絡瘀阻；或者長期的不良坐姿等導致頸項部氣血瘀阻不通,日久正衰,腠理空虛,風寒濕邪乘虛而入,血脈凝滯不通,內外相搏,痹阻督脈,督陽受損而發為頸椎病諸癥。通督活血湯方中葛根甘寒生津、辛涼解肌，可疏通太陽經脈之氣，鼓舞津液循經布達，引藥直達頸項，緩解經脈拘攣；桂枝辛溫祛風,又擅溫經通脈；二藥合用, 調和營衛、舒筋緩急治療頸項脊背強痛效果顯著。白芍苦酸微寒，入肝經，可柔肝止痛、養血斂陰，以補為功。赤芍功能涼血散瘀，以瀉為用，與白芍為對，一散一補,既散瘀止痛,又補血養筋。鹿角膠溫通督脈，補命門，大補精髓，最能補精生血而益元陽，補骨脂溫腎助陽，二藥合用以補腎固督。片姜黃苦、辛溫，功能破血行氣，通經止痛，與葛根相配，善行疏通脊背之肌肉筋脈。桃仁、紅花活血化瘀,兼能止痛。川芎活血行氣，同時與白芷引藥上行。蟲類藥地龍、水蛭、土鱉蟲長于破血逐瘀、通絡止痛。雞血藤行血補血，與威靈仙、青風藤、徐長卿共用能溫經通絡、驅風散邪、活血止痛。甘草酸甘化陰，緩急止痛。諸藥合用，共奏補腎固督、活血通絡止痛之功。

本實驗所用對照藥物塞來昔布是目前治療骨關節病最常用的止痛藥，與傳統非甾體抗炎鎮痛藥相比，大大降低了患者的胃腸道不良反應[5]，但也有研究顯示服用塞來昔布的患者發生心血管疾病的危險性增加，臨床上有較多副作用和禁忌癥。本實驗顯示：塞來昔布對不同小鼠抗炎、鎮痛作用個體差異性較通督活血湯大；此外，在小鼠熱致痛實驗中，其療效持久性未及通督活血湯。本實驗所用另一對照藥物頸復康是臨床最常用于治療頸椎病的中成藥。本實驗顯示：其與通督活血湯高劑量抗炎、鎮痛作用相當，而通督活血湯用藥更加安全，重在通督活血，改善恢復督脈 “陽脈之海”的作用，臨床無論頸椎病還是其他脊柱關節病，只要辨證為腎督虛瘀者即可應用。

本研究結果顯示：通督活血湯能明顯抑制二甲苯致小鼠耳腫脹炎性反應，減少醋酸所致疼痛小鼠扭體次數，延遲小鼠首次扭體時間，提高小鼠熱刺激下的痛閾值，對不同刺激引起的疼痛均有良好的鎮痛效果。通督活血湯高、中劑量與塞來昔布、頸復康的抗炎、鎮痛作用相當。結果表明：通督活血湯有明顯的抗炎、鎮痛效果作用，且抗炎、鎮痛作用呈現一定的量效關系。此為該方藥的臨床應用與推廣提供了客觀依據。

4參考文獻

[1]楊巧芳，楊荔勇，董秋梅,等.朱宗元教授治療頸椎病經驗[J].中華中醫藥學刊，2010,28(10)：2057-2058.

[2]徐叔云,卞如濂,陳修,等.藥理實驗方法學[M].3 版.北京:人民衛生出版社,2002: 882-915.

[3]董秋梅，楊巧芳，郝華.朱宗元循經論治頸椎病臨床經驗探析[J].上海中醫藥雜志，2012，46(7)：64-65.

[4]Hori M, Tsutsumi S, Yasumoto Y, et al.Cervical Spondylosis:Evaluation of microstructural changes in spinal cord white matter and gray matter by diffusional kurtosis imaging[J]. Magn Reson Imaging,2014，32(5):428-432.

[5]周翔，區品中. 塞來昔布對膝骨性關節炎的療效及副作用觀察[J].藥物流行病學雜志, 2002, 11(5):228-229.

(編輯陶珠)

文章編號:1001-6910(2016)01-0063-03

中圖分類號:R285.5

文獻標志碼:B

doi:10.3969/j.issn.1001-6910.2016.01.27

通信作者：董秋梅，醫學博士，教授，博士研究生導師，d.qium@163.com

* 基金項目：內蒙古自治區研究生科研創新資助項目(S20141013205)

收稿日期：2015-04-24；修回日期：2015-09-18