中藥中三萜酸類成分的研究進展

李富欣 孫丹丹 閆雪生*

（1 山東中醫藥大學，山東 濟南 250355；2 山東省中醫藥研究院，山東 濟南 250014）

中藥中三萜酸類成分的研究進展

李富欣1孫丹丹2閆雪生2*

（1 山東中醫藥大學，山東 濟南 250355；2 山東省中醫藥研究院，山東 濟南 250014）

目的 對中藥中三萜酸類成分近十年的研究概況進行綜述。方法 通過查閱近10年來關于三萜酸成分研究的文獻，對三萜酸類成分的結構分類、提取分離、含量測定、藥理作用等進行歸納綜述。結果 中藥中三萜酸類化合物多數為四環三萜酸和五環三萜酸，具有廣泛的生理活性。結論 三萜酸類化學成分在中藥中分布廣泛，并且具有廣闊的應用前景,亟待開發。

三萜酸；結構分類；提取分離；含量測定；藥理作用

三萜酸類化合物在中草藥中分布很廣，在山楂、枇杷葉、茯苓等中藥中都含有三萜酸成分。三萜酸是以游離態存在的酸性三萜類化合物，具有免疫調節、護肝、抗炎、抗病毒、降血糖等活性[1]。近10年來國內關于三萜酸成分研究論文達百余篇，現將其結構分類、理化性質、提取分離、含量測定和藥理作用研究進展綜述如下。

1 三萜酸的結構分類

目前已發現的三萜酸類化合物多數為四環三萜酸和五環三萜酸。五環三萜酸類成分在藥用植物中較為常見，結構上分為4類，分別是烏蘇烷型、齊墩果烷型、羽扇豆烷型和木栓烷型。其中烏蘇烷型的代表性化合物為熊果酸（UA）和科羅索酸（CA）；齊墩果烷型的代表為齊墩果酸（OA）和甘草酸（GA）；羽扇院型的代表為樺木酸（BA）、2，3-羥基白樺酸；木栓烷型的代表為南蛇藤素。

2 三萜酸的提取和分離純化

2.1 三萜酸的提取工藝：目前，用于三萜酸的提取方法主要有:溶劑回流提取法、超聲波輔助提取法、微波輔助提取法等。

2.1.1 溶劑回流提取法：溶劑回流提取法系指用乙醇等揮發性有機溶劑浸提，加熱浸提液，揮發性溶劑先流出后被冷凝，重新流回進出器中浸提藥材，這樣循環往復，直至有效成分回流浸提完全的方法。乙醇加熱回流提取是傳統的中藥提取方法，但此法提取溫度高，加熱時間長，提取效率低。王逸萍[2]等用山楂中總三萜酸作為考察指標，采用正交試驗對山楂提取條件進行優選：藥材用8倍80%的乙醇提取，提取時間1.5 h，提取率達94.03%。

2.1.2 超聲波輔助提取法：超聲波提取法是利用超聲波強大的機械作用、熱效應、空化作用等增加物質分子的運動頻率和速度以及溶劑穿透力，從而使藥材有效成分浸出率提高。張方[3]等采用超聲法提取茯苓中三萜類化合物，在溫度為25 ℃，頻率為25 kHZ，確定茯苓中三萜類化合物的最佳提取工藝為：用20倍量的乙酸乙酯提取3次，每次30 min。

2.1.3 微波輔助萃取法：微波輔助萃取系指利用微波對中藥與適當的溶劑的混合物進行輻照處理，從而在短時間內提取中藥中有效成分的一種新方法。黃秀香[4]等采用正交實驗，考察溫度、時間、氫氧化鈉濃度、固液比4個因素的影響，得出微波提取時最佳工藝是以16倍量的3%氫氧化鈉溶液作提取劑，在溫度為92 ℃條件下提取10 min。微波提取具有提取率高，提取速率快，提取溫度低，能量消耗小，安全可靠無污染等特點，用于中草藥的提取應用前景廣闊。

2.2 三萜酸的分離純化：目前用于三萜酸的分離純化方法主要是大孔樹脂吸附法，指將中藥提取液通過大孔樹脂，吸附其中的有效成分，再經洗脫回收，除掉雜質的一種純化方法。袁懷波[5]等以體積分數為70%的乙醇為洗脫劑，上樣液的pH值為6，采用AB-8大孔吸附樹脂對木瓜三萜酸進行分離純化效果最優，產品的洗脫率達89.33%，純度達36.51%。

三萜酸的分離純化方法還有酸堿沉淀法、活性炭吸附法、重結晶法、硅膠柱色譜法等，但是這些方法應用較少，主要還是以大孔樹脂吸附法為主。

3 三萜酸的含量測定

3.1 比色法：周巧霞[6]等選用熊果酸為對照品，采用比色法測定山楂生藥及總三萜酸含量，得出高氯酸1.0 mL，5%香草醛-冰醋酸溶液0.4 mL，60 ℃水浴15 min，冰浴冷卻，加冰醋酸5.0 mL搖勻，在548 nm處測定，效果最佳。該比色法操作簡便，吸收值穩定，并且干擾小。

3.2 分光光度法：黃秀香[7]等利用在高氯酸的條件下香草醛-冰醋酸與三萜酸的反應測定總三萜酸，5%香草醛-冰醋酸0.4 mL，高氯酸0.6 mL，水浴溫度60 ℃，水浴加熱時間為10 min，是熊果酸測定的最佳條件，在550 nm下有一個較好的吸收值，結果總三萜酸在2.53～13.14 Lg/mL呈良好的線性關系，測定樣品回收率為99.07%，該法簡便、快速、靈敏。

3.3 高效液相色譜法：HPLC分析范圍廣、速度快、分離效能高，是最常見的三萜酸類成分分析方法。李保明[8]等使用HPLC測定靈芝子實體中9種三萜酸，采用Alltima C18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），流動相為乙腈-0.04%甲酸溶液，檢測波長254 nm，流速1.0 mL/min，柱溫15 ℃，得出該方法可行、重復性好，可定量測定靈芝中三萜酸的含量。

除了以上3種方法外，還有毛細管電泳法、薄層掃描法、氣相色譜法等方法測定藥用植物中的三萜酸成分。

4 三萜酸的藥理作用

4.1 降血糖降血脂作用：洪曉華[9]等觀察女貞子三萜酸對實驗性糖尿病大鼠的治療作用，結果顯示女貞子三萜酸能明顯降低血糖和三酰甘油，改善糖耐量，對血清胰島素、糖化血清蛋白、膽固醇等影響不明顯，因此女貞子三萜酸降血糖作用較強，對血脂具有一定的調節作用。

4.2 抗腫瘤作用：腫瘤的形成是多步驟、多因素、多基因突變的，許多化學致癌物能誘發和促進腫瘤形成。枇杷葉中的烏蘇酸具有廣泛的生物學效應，抗腫瘤作用突出，它對多種致癌物有抑制作用，并且對多種惡性腫瘤細胞有明顯誘導分化和細胞毒及抗血管形成作用，近年來，其防癌抗癌作用引起了廣泛關注，有望成為低毒有效的新型抗癌藥。

4.3 抗炎、抗菌、抗病毒作用：葛金芳[10]等用枇杷葉三萜酸（50，

150，450 mg/kg）給大鼠灌胃給藥，降低了慢性支氣管炎（CB）大鼠支氣管肺泡灌洗液（BAL F）中白細胞總數，并且中性粒細胞和肺泡巨噬細胞比例明顯上升；降低了CB大鼠支氣管黏膜炎癥的浸潤程度，減少了支氣管內的分泌物，減輕了支氣管黏膜的上皮細胞脫落情況，抑制了支氣管黏膜上皮細胞增生，使支氣管內徑、通氣量增大。實驗表明枇杷葉三萜酸一定程度上可以改善慢性支氣管炎，其對CB的治療作用可能與其平衡細胞因子產生、調節機體免疫有關。

4.4 免疫調節及保肝作用：李春雨[11]等從茯苓總提取物中分離提取出單體化合物茯苓酸，觀察到茯苓酸具有抗排斥作用，認為茯苓酸可以從多個環節抑制急性排斥反應。中藥茯苓酸的出現為進一步研究開發茯苓，進而從中藥中篩選出低不良反應的具有明確免疫抑制作用的免疫抑制劑奠定了良好的基礎。枇杷葉中的齊墩果酸具有解毒、護肝的作用，可以有效的保護CCl4引起的急慢性肝炎損傷[12]。三萜酸類化合物是一類在中藥材中廣泛分布，并具有多種生物活性的天然產物，具有很高的藥用價值，其構效關系的研究及其開發利用值得我們進一步深入探討。近年來，由于各種提取技術、分離技術以及測定技術等分析手段的迅速發展，使三萜酸類化合物的研究取得了可喜的進展，但我們仍需要多方努力，共同挖掘出該類化合物巨大的藥用潛能。

[1] 李宏楊,劉國民,劉飛,等.熊果酸及五環三萜同類物的研究進展[J].湖南工業大學學報,2009,23(5):18-21.

[2] 王逸萍,徐智勇.山楂中總三萜酸提取工藝優選[J].中華中醫藥學刊,2007,25(4):774-775.

[3] 張方,陳平.超聲提取茯苓中三萜類成分的工藝研究[J].武漢工業學院學報,2013,32(4):5-10.

[4] 黃秀香,林翠梧,陳麗芬,等.微波提取毛老虎莖中總三萜酸的正交實驗研究[J].中藥材,2008,31(1):123-125.

[5] 袁懷波,江力,陳宗道.大孔樹脂分離純化木瓜總三萜酸的研究[J].食品與機械,2007,24(4):80-82.

[6] 周巧霞,張經碩,顧明,等.測定山楂及提取物總三萜酸的含量[J].中國野生植物資源,2004,23(5):43-44.

[7] 黃秀香,袁霞,林翠梧,等.分光光度法測定毛老虎莖中三萜酸的總含量[J].時珍國醫國藥,2007,19(2):297-298.

[8] 李保明,古海鋒,李曄,等.HPLC測定不同產地靈芝中9種三萜酸[J].中國中藥雜志,2012,37(23):3599-3603.

[9] 洪曉華,于魏林,李艷榮,等.女貞子提取物總三萜酸降血糖作用的實驗研究[J].中國中西醫結合雜志,2003,23(S1):121-123.

[10] 葛金芳.枇杷葉三萜酸的抗炎免疫作用及對慢性支氣管炎的治療作用與機制研究[D].合肥:安徽醫科大學,2004.

[11] 李春雨,劉宏宇,張國偉,等.茯苓酸抗大鼠心臟移植急性排斥反應的實驗研究[J].中國胸心血管外科臨床雜志,2010,17(2):139.

[12] 郭 宇,吳松吉,樸惠善.枇杷葉的化學成分及藥理活性研究進展[J].時珍國醫國藥,2006,20(6):928-929.

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1671-8194（2016）34-0022-02