DEK和Ki-67表達對伊立替康治療轉移性結直腸癌的預測價值

邢維山孔繁勇王 研林黎娟，*

（1 丹東市第一醫院腫瘤科，遼寧 丹東 118000；2 遼東學院醫學院分子醫學研究室，遼寧 丹東 118003）

DEK和Ki-67表達對伊立替康治療轉移性結直腸癌的預測價值

邢維山1孔繁勇2王 研2林黎娟1，2*

（1 丹東市第一醫院腫瘤科，遼寧 丹東 118000；2 遼東學院醫學院分子醫學研究室，遼寧 丹東 118003）

目的 探討DEK和Ki-67蛋白表達對伊立替康治療轉移性結直腸癌療效的預測價值。方法 44例轉移性結直腸癌（CRC）術后患者，給予伊立替康+5-FU+亞葉酸治療；免疫組化檢測其DEK和Ki-67蛋白表達情況。結果 44例患者中DEK和Ki-67表達明顯相關；DEK和Ki-67陽性表達的患者化療后總有效率分別明顯低于陰性者；DEK和Ki-67陽性患者中位生存時間也均明顯低于陰性表達者。結論 DEK和Ki-67檢測對伊立替康治療轉移性CRC具有較好的預后預測價值。

DEK；Ki-67；伊立替康；CRC；轉移性；預測

結直腸癌（CRC）是常見的惡性腫瘤之一，全球年發病例數超萬［1-2］。DEK和Ki-67均是衡量腫瘤增殖活性的癌基因；有研究表明，DEK和腫瘤的化療抵抗明顯相關，而Ki-67被認為是判斷結直腸癌化療療效及預后的重要指標［3］。伊立替康為主的治療方案對晚期CRC的生存期有明顯改善，使其成為治療轉移性的CRC的關鍵藥物［4］。本研究旨在探討DEK和Ki-67蛋白對伊立替康治療轉移性結直腸癌療效的預測價值。

1　材料與方法

1.1一般資料：收集丹東市第一醫院2010年1月至2015年5月的確診為轉移性CRC的患者44例，男性32例，女性12例，年齡27～81歲；直腸癌19例，結腸癌25例。轉移部位有肝臟、肺、骨、盆腔、腎上腺和淋巴結等。所有患者術前均未經放療和化療，有可測量的病灶，治療前肝、腎和骨髓功能正常，所有患者隨診18個月。

1.2用藥方案：第1天鹽酸伊立替康180 mg/m2和亞葉酸300 mg/m2持續靜脈滴注，第l～5天5-FU 600 mg/m2靜脈滴注，4周重復1次，共使用6個周期?；熐笆褂酶窭弓傊雇?，白細胞低于3×109/L時，使用重組人粒細胞集落刺激因子治療，腹瀉時用易蒙停或奧曲肽治療。用藥后每周觀察血常規和肝、腎功能及胃腸道不良反應等。

1.3免疫組化SP法進行免疫組化檢測：組織蠟塊消除內源性過氧化物酶，3%過氧化氫溶液和甲醇室溫下孵化15 min，0.01 mol/L檸檬酸鈉緩沖20 min的抗原修復。DEK（美國BD）和ki-67（丹麥Dako）抗體4 ℃過夜后二抗體孵化30 min，DAB顯色，蘇木精復染，中性樹膠封固。DEK和Ki-67均為核表達。陽性細胞數＜5%示為陰性，陽性細胞數≥5%為陽性。

1.4療效評定：采用RECIST1.0標準進行療效評定［5］。目標病灶消失為完全緩解（CR）；基線病灶長徑總和縮小≥30%為部分緩解（PR）；基線病灶長徑總和增加≥20%或出現新病灶為疾病穩定（PD）；基線病灶長徑總和有縮小但未達PR或有增加但未達PD為疾病進展（SD）。CR+PR計算有效率。

1.5統計學分析：利用SPSS17.0統計學分析，計數資料以%表示，組間比較采用t檢驗，采用Spearman進行相關性分析，以P＜0.05為差異顯著。

2　結 果

2.1DEK和Ki-67在轉移性CRC中的表達及其相關性：免疫組化結果顯示，21例CRC組織呈DEK陽性表達，23例呈陰性表達，17例呈Ki-67陽性表達，27例呈陰性表達；Spearman相關性分析結果顯示，44例CRC組織中DEK和Ki-67蛋白表達呈明顯相關性（P=0.011）。

2.2DEK和Ki-67表達與治療效果的相關性：44例轉移性CRC患者經藥物治療后，CR 6例，PR 17例，PD 15例，SD 6例，總有效率為52.3%（23/44）。21例DEK陽性表達的CRC患者化療后總有效率為38.1%（8/21），明顯低于DEK陰性表達的患者65.2%（15/23）；同樣Ki-67陽性表達的CRC患者化療的總有效率23.5%（4/17）也明顯低于陰性表達者70.4%（19/27）。以上結果說明DEK和Ki-67蛋白對CRC的化療療效有預測價值。

2.3DEK和Ki-67蛋白表達與治療后生存期的關系：44例轉移性CRC患者治療后的中位生存時間為（7.81±5.21）個月，其中，DEK陽性患者為（6.43±3.94）個月，DEK陰性患者為（9.33±3.62）個月，前者總生存期明顯低于后者（P=0.033）；Ki-67陽性患者為（6.78±3.49）個月，Ki-67陰性患者為（9.47±4.36）個月，前者總生存期明顯低于后者（P=0.038）。

3　討 論

盡管有了先進的化、放療技術輔助手術切除治療，CRC患者生存質量及5年生存率仍很低。鹽酸伊立替康是喜樹堿衍生物，相比喜樹堿有較高的水溶性，可在體內代謝為具有生物活性的7-乙基-10-羥基喜樹堿，具有廣譜抗腫瘤活性。1996年，伊立替康在美國首次獲批用于治療5-FU難以控制的轉移性CRC，隨后獲批為聯合5-FU/LV治療轉移性CRC的一線藥物。臨床試驗表明，伊立替康為主的治療方案對轉移性CRC患者的生存期有明顯改善，使其成為治療轉移性的CRC的關鍵藥物。

原癌基因DEK是一個新發現的DNA拓撲結構調節因子，為高度保守的可磷酸化的核蛋白，優先表達于增殖活躍的惡性細胞［6］。該基因在多種惡性腫瘤中過表達，對腫瘤的發生、發展及抗藥性具有明顯的作用。作為能夠結合多種染色質、具有多重功能的細胞因子，DEK可能在細胞中因其干擾作用而導致嚴重的不良反應。增殖標記抗原Ki-67是增殖細胞在G1、G2和M階段表達的基因，常常被用作腫瘤擴散和攻擊性的標記，對CRC患者的預后有重大影響；Ki-67也是衡量腫瘤增殖活性的判斷大腸癌患者化療療效及預后的重要指標。在本項研究中發現，DEK在轉移性CRC組織的表達與Ki-67之間呈正相關。

研究顯示，伊立替康聯合5-FU/亞葉酸鈣治療31例轉移性大腸癌中直腸癌患者有效率41.67%，結腸癌患者有效率27.78%。我院采用伊立替康聯合5-FU/亞葉酸本方案治療44例轉移性CRC患者的有效率為52.3%，其治療效果更為明顯；另外，DEK與Ki-67陽性患者中位生存時間均高于陰性患者，前者總生存率均明顯低于后者。因此，DEK和Ki-67在伊立替康治療轉移性CRC具有較好的預后預測價值。

［1］Lin L，Piao J，Gao W，et al.DEK over expression as an independent biomarker for poor prognosis in colorectal cancer［J］.Bmc Cancer，2013，13（3）：771.

［2］萬德森.結直腸癌流行病學與預防［J］.中國中西醫結合外科雜志，2011，17（1）：3-7.

［3］Guillemette C，Lévesque é，Rouleau M.Pharmacogenomics of Human Uridine Diphospho-Glucuronosyltransferases and Clinical Implications［J］.Clin Pharmacol Therapeut，2014，96（3）：324-339.

［4］Loupakis F，Cremolini C，Masi G，et al.Initial therapy with FOL FOXIRI and bevacizumab for metastatic colorectal cancer［J］.N Engl J Med，2014，371（17）：1609-1618.

［5］陳耐華.RECIST1.1標準和RECIST1.0標準對大腸癌肝轉移療效評價的比較［J］.中國當代醫藥，2015，22（32）：63-65.

［6］王璇，黃紹輝，於麗喬，等.DEK原癌基因與口腔鱗狀細胞癌的關系［J］.上?？谇会t學，2014，23（1）：75-79.

R735.3+7

B

1671-8194（2016）26-0106-02