李虹瑾,李國江,沙萬里,牛 偉,張秀峰,姜 成
(1.吉林農業大學,長春 130033;2.吉林農業科技學院動物科技學院/預防獸醫學吉林省重點實驗室,吉林 132101)
鼻腔噴霧給藥防治豬萎縮性鼻炎的效果研究
李虹瑾1,李國江2※,沙萬里2,牛 偉2,張秀峰2,姜 成2
(1.吉林農業大學,長春 130033;2.吉林農業科技學院動物科技學院/預防獸醫學吉林省重點實驗室,吉林 132101)
從豬萎縮性鼻炎的病豬鼻腔內分離和純化病原菌,通過藥敏試驗篩選出對豬萎縮性鼻炎病原菌敏感的藥物,并通過鼻腔噴霧給藥、肌肉注射給藥和拌料給藥的方法防治豬萎縮性鼻炎。結果表明:通過鼻腔噴霧給藥的豬平均日增重顯著高于拌料組和肌肉注射組(P<0.01)。說明鼻腔給藥,藥物可直接作用于患部,療效迅速,方便快捷,是防治豬萎縮性鼻炎的最佳給藥途徑。
豬萎縮性鼻炎;肌肉注射;拌料給藥;鼻腔噴霧給藥;防治
豬萎縮性鼻炎是由支氣管敗血波氏桿菌和產毒素巴氏桿菌引起的慢性接觸性呼吸道傳染病。它以鼻炎、鼻中隔扭曲、鼻甲骨萎縮和病豬生長緩慢為特征,臨床表現為噴嚏、流鼻涕、鼻塞、鼻出血、顏面部的變形或歪斜。哺乳仔豬感染本病后不但導致嚴重的鼻甲骨損害和萎縮性病變,還能引起全身鈣代謝障礙,導致仔豬生長發育緩慢,飼料利用率降低,料肉比升高[1]。同時還增加感染其它呼吸道疾病的可能性,引起呼吸道疾病的爆發流行,給養豬業造成巨大的經濟損失。
豬萎縮性鼻炎的傳染源主要是患病豬和帶菌豬,傳播方式主要通過空氣傳播。萎縮性鼻炎在豬群中以水平方式傳播,一般呈地方性流行或散發,任何年齡的豬都可以感染本病,但以仔豬和保育豬最易感。誘發本病發生的因素很多,如圈舍通風不良,陰冷潮濕,空氣污濁,飼養密度過大,飼料中的營養缺乏,特別是飼料中的蛋白質、維生素(主要是VA和VD)、微量元素(特別是鈣和磷)缺乏,容易誘導本病的發生。
對豬萎縮性鼻炎的防控目前主要通過加強飼養管理、疫苗接種和藥物防治三方面。加強飼養管理主要通過制定科學合理的飼養管理措施,提供全價的營養供給、舒適的環境衛生條件等,從而使豬萎縮性鼻炎得到確實而有效的控制[2-3];疫苗接種主要是根據豬場的實際情況選擇一種合適的疫苗進行接種;藥物防治主要通過藥敏試驗選出一種最敏感的藥物,制定合理的抗生素防治方案。本試驗主要進行鼻腔噴霧給藥防治豬萎縮性鼻炎的效果研究。
1.1 試驗材料
1.1.1 試驗動物 隨機抽取英白品種30頭健康無萎縮性鼻炎癥狀的英白哺乳仔豬和40頭有淚斑的英白保育豬作試驗豬,均由吉林農業科技學院畜牧場提供。
1.1.2 培養基及試劑 本試驗采用的培養基為實驗室自制。新生牛血清(北京燕生政博生物科技有限責任公司,批號(Lot.No)100419);細菌微量生化反應管(杭州天和微生物試劑有限公司,批號為120213)。
1.1.3 試驗藥品 痢特靈(批號為20110802),磺胺嘧啶鈉(批號為110604),硫酸慶大霉素注射液(批號為20111012),硫酸慶大霉素(批號為2011050101),土霉素原粉(批號為110708),注射用硫酸鏈霉素(批號為20120103),卡那霉素(批號為20110819),諾氟沙星(批號為20111011),四環素(批號為20111102)。
1.2 試驗方法
1.2.1 藥敏紙片的制作 按照紙片法藥敏試驗抑菌環判斷標準中的藥物濃度來制作土霉素、磺胺嘧啶鈉、慶大霉素、卡那霉素等7種藥物的藥敏紙片,然后置于干燥箱內37℃低溫干燥,干燥后密封置4℃冰箱保存備用。
1.2.2 病料提取 將豬保定后,用75%的酒精棉將豬的鼻鏡徹底消毒。用無菌棉簽插入病豬的兩側鼻腔深部采取鼻腔分泌物,然后立即將鼻拭子裝入內有改良馬丁肉湯培養基的小試管中,送往實驗室做細菌分離鑒定。
1.2.3 細菌分離鑒定 (1)病原菌分離培養:將含有病料的改良馬丁肉湯培養基置于震蕩恒溫箱中37℃震蕩培養24h后,在無菌的條件下用鉑金耳取上述培養液將其劃線接種在血瓊脂培養基上[4],37℃恒溫箱中培養24h。然后分別挑取可疑菌落接種在血清培養基、麥康凱培養基和痢特靈麥康凱培養基進行純培養[5]。一種細菌在血瓊脂培養基上培養24h后,生長成淡灰白色、邊緣整齊、表面光滑、閃光的露珠樣的小菌落。在麥康凱培養基上不生長。另一種細菌在血瓊脂培養基上培養24h后,出現溶血現象,在血清培養基上生長成圓形隆起,光滑閃光的奶樣的小菌落,在麥康凱培養基上菌落無色或微紅,周圍有紅圈,在含有痢特靈的麥康凱培養基上菌落呈茶色,中心較厚,呈茶黃色[6-7]。挑取兩種疑似菌落,分別做美蘭染色和革蘭氏染色。鏡下觀察,美蘭染色二者均為兩極濃染的小桿菌,革蘭氏染色二者均是呈兩極濃染的革蘭氏陰性的小桿菌。(2)生化試驗:將以上純化的病原菌分別接種于細菌微量反應管中[8-9],進行生化鑒別試驗。結果顯示:一種細菌能分解葡萄糖、甘露醇、蔗糖,產酸不產氣,不能分解乳糖和麥芽糖,觸酶、氧化酶、鳥氨酸脫羧酶、吲哚為陽性,尿素酶、甲基紅、V-P為陰性,鑒定為巴氏桿菌;另一種細菌不能分解碳水化合物,觸酶、尿素酶、谷氨酸脫羧酶、硝酸鹽還原、檸檬酸鹽利用為陽性,氧化酶為弱陽性,吲哚為陰性,鑒定為支氣管敗血波氏桿菌。見表1、表2。

表1 細菌生化試驗鑒定結果

表2 細菌生化試驗鑒定結果
1.2.4 藥敏試驗 選出7種常用于治療豬萎縮性鼻炎的藥物[10],分別是慶大霉素、卡那霉素、四環素、土霉素、磺胺嘧啶鈉、諾氟沙星、鏈霉素,通過藥敏試驗選出一種最敏感的藥物。見表3。

表3 巴氏桿菌和支氣管敗血波氏桿菌藥敏試驗結果
由表3可知,該場豬萎縮性鼻炎的病原菌對慶大霉素最為敏感,所以,選用慶大霉素作為該場防治豬萎縮性鼻炎的藥物。
1.2.5 預防試驗 (1)試驗動物分組:隨機選取7日齡、體重接近、無豬萎縮性鼻炎癥狀的英白仔豬30頭,按照仔豬的耳號順次平均分為三組,每組10頭。Ⅰ組、Ⅱ組為試驗組,Ⅲ組為空白對照組。(2)給藥方法:應用篩選出的最敏感藥物慶大霉素進行預防試驗,Ⅰ組通過鼻腔噴霧給藥,首先將豬的頭部固定,鼻鏡消毒后將100mL噴霧器的噴頭對準仔豬的鼻孔,稍稍與鼻中隔呈一定角度噴霧給藥,每側鼻孔噴2次(噴霧器每噴6次約為1mL,20mg)。噴藥后將仔豬的頭稍稍抬高約1min,連用7d。Ⅱ組肌肉注射給藥,一次劑量10mg/kg體重,每天2次,連續用藥7d。Ⅲ組不給藥,作對照組。(3)觀測指標:①試驗期間觀察試驗仔豬有無淚斑,并作好記錄。②仔豬試驗前后分別稱體重,同時觀測各組飼料消耗量,并作好記錄。
1.2.6 治療試驗 (1)試驗分組:選取30日齡,體重接近,有淚斑的英白仔豬40頭。隨機分成四組,每組10頭,Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ組為試驗組,Ⅶ組為對照組,分欄飼養。(2)給藥方法:應用篩選出的最敏感藥物慶大霉素進行治療試驗,Ⅳ組通過鼻腔噴霧給藥,方法與Ⅰ組相同,給藥劑量增至每側鼻孔噴4次。Ⅴ組通過肌肉注射給藥,方法與Ⅱ組相同,給藥劑量增至一次劑量20mg/kg體重,每天2次,連續用藥7d。Ⅵ組通過拌料給藥,按0.05%的比例添加。Ⅶ組不給藥,作對照組。(3)觀測指標:仔豬試驗前、后分別稱體重,同時觀測各組飼料消耗量,并做好記錄。
2.1 預防試驗結果
7d后觀察到鼻腔噴霧給藥組有1頭仔豬發現有淚斑。肌肉注射組有3頭仔豬發現有淚斑,對照組有6頭仔豬發現有淚斑。各組飼料消耗無顯著差異(P>0.05)。預防試驗各組仔豬飼料消耗無顯著差異,增重結果見表4。

表4 7~28日齡仔豬增重情況
2.2 治療試驗結果
治療試驗各組仔豬飼料消耗無顯著差異,增重情況見表5。

表5 30~61日齡仔豬增重情況
2.3 數據分析
根據表4、表5的結果,通過方差分析,表明預防試驗和治療試驗中鼻腔噴霧給藥組的平均增重顯著高于其他試驗組(P<0.01)。
3.1 濫用抗菌素會產生嚴重的耐藥現象
本研究中,對分離到的產毒素巴氏桿菌和支氣管敗血波氏桿菌[11-12],用慶大霉素、卡那霉素、四環素、土霉素、磺胺嘧啶鈉、諾氟沙星、鏈霉素等7種抗菌素進行藥敏試驗。結果發現土霉素、磺胺嘧啶鈉、諾氟沙星、鏈霉素表現明顯耐藥。經調查得知,該豬場平時經常使用這幾種抗菌素,造成了致病菌的耐藥。因此,豬場要根據藥敏試驗有針對性地選用抗生素防治疾病。
3.2 科學的給藥方法決定防治效果
試驗結果表明,鼻腔噴霧給藥組仔豬平均增重明顯高于對照組及其他給藥組(P<0.01)。分析認為,鼻腔噴霧給藥,藥物直接到達病變部位發揮作用,確保了到達患部的藥物濃度,藥效迅速確實。而注射及拌料給藥,要經過消化吸收入血液并輸送至患部的過程,降低了藥物的效果。
3.3 豬傳染性萎縮性鼻炎是危害養豬業的“隱形”殺手
豬萎縮性鼻炎很少引起豬的死亡,但卻能明顯影響豬的生長發育,降低飼料的利用率,造成巨大經濟損失。然而這種“隱形”的損失往往被養殖者忽視,導致經濟效益下降。因此,必須加強對豬萎縮性鼻炎的防控工作。
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責任編輯:吳艷玲
Effective Research of Prevention and Treatment of Swine Atrophic Rhinitis with Nasal Spray
LI Hongjin1,LI Guojiang2,SHA Wanli2,NIU Wei2,ZHANG Xiufeng2,JIANG Cheng2
(1.Jilin Agriculture University,Changchun 130033;2.Jilin Agricultural Science and Technology University School of Animal Science and Technology/Key Lab of Preventive Veterinary Medicine in Jilin Province,Jilin 132101)
Pathogens were separated and purified from nasal cavity of the sick pigs from swine atrophic rhinitis.The methods of nasal spray,muscle injection,mixing materials with drugs were explored in this study. The results showed that average daily gain was significantly higher than others by nasal spray(P<0.01).Nasal spray was the best method for the prevention and control of swine atrophic rhinitis.
pig atrophic rhinitis;muscle injection;mixing materials with drugs;nasal spray;prevention and treatment
S858.28
A
2016-08-13
吉林省教育廳重點項目資助(2010243);吉林省科技廳發展計劃項目(20150623004TC)
李虹瑾(1989-),男,吉林省榆樹市人,吉林農業大學2016級預防獸醫學碩士研究生,研究方向:預防獸醫學。
※為本文通訊作者