乳腺浸潤性導管癌術后組織中轉化生長因子β激活酶1和核因子-κB的表達

劉廣寅 劉 琳 張志勇 崔永興 王 平

(唐山工人醫院乳腺外科，河北 唐山 063000)

乳腺浸潤性導管癌術后組織中轉化生長因子β激活酶1和核因子-κB的表達

劉廣寅 劉 琳1張志勇2崔永興2王 平

(唐山工人醫院乳腺外科，河北 唐山 063000)

目的 檢測乳腺浸潤性導管癌中轉化生長因子β激活酶(TAK)1和核因子(NF)-κB的表達，分析其臨床意義。方法 乳腺浸潤性導管癌并行乳腺癌改良根治手術的57例患者作為觀察組，留取術后蠟塊組織，37例距腫瘤邊緣>3 cm的正常乳腺組織作為對照組，應用免疫組化方法檢測兩組中TAK1和NF-κB的表達。結果 觀察組中TAK1和NF-κB表達的陽性率明顯高于對照組，觀察組中TAK1和NF-κB表達的陽性率與腫瘤的組織學分級、腫瘤的最大徑相關，TAK1表達的陽性率與腫瘤的淋巴結轉移相關，TAK1和NF-κB均與患者的年齡、分子分型無明顯相關性；相關分析顯示TAK1和NF-κB呈正相關性。結論 TAK1和NF-κB高表達對促進腫瘤性病變的形成和進展有一定意義，二者具有正向協同作用。

乳腺浸潤性導管癌；轉化生長因子β激活酶(TAK)1；核因子(NF)-κB；免疫組化

乳腺癌占女性惡性腫瘤的22%，是來源于乳腺導管上皮的惡性腫瘤，可以向周圍鄰近組織浸潤，同時具有明顯的遠處轉移趨向〔1〕。轉化生長因子β激活酶(TAK)1是絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，屬于絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)成員〔2,3〕。TAK1介導的信號轉導通路是應激反應、炎癥反應及腫瘤發生等過程中信號連鎖反應的關鍵調控因子，同時可以使核因子(NF)-κB激活，對腫瘤的進展有重要促進作用〔4〕。本實驗關注乳腺浸潤性導管癌中TAK1和NF-κB的表達特征，分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 我院確診為乳腺浸潤性導管癌并行乳腺癌改良根治手術的57例患者作為觀察組，均為女性，年齡35～78歲，平均55.8歲，留取術后蠟塊組織。均經病理醫師確診，并符合WHO中的診斷標準。37例距腫瘤邊緣>3 cm的正常乳腺組織作為對照組，年齡37～73歲，平均53.4歲。兩組一般資料無明顯差別。

1.2 免疫組化方法檢測TAK1和NF-κB的表達 術后的標本均經甲醛溶液固定，常規取材，石蠟包埋，并切成4 μm的切片進行蛋白的檢測。TAK1和NF-κB的檢測應用免疫組化SP法，二氨基聯苯胺(DAB)顯色，其步驟嚴格按說明書操作，做好質控工作，減少人為誤差。

1.3 免疫組化檢測TAK1和NF-κB的表達 TAK1和NF-κB表達的陽性部位均為細胞質，以染成淡黃-深棕色為陽性，選擇上皮細胞集中的區域進行觀察，選擇5個400倍的視野進行陽性率的計數，取平均值作為最終的評定標準。以陽性率<5%定為陰性，以≥5%定為陽性。

1.4 統計學方法 采用SPSS13.0軟件行χ2檢驗、線性相關分析。

2 結 果

2.1 兩組中TAK1和NF-κB陽性率的比較 兩組TAK1和NF-κB的陽性率差異有統計學意義。見表1。

2.2 觀察組不同臨床特征中TAK1和NF-κB陽性率的比較 觀察組中TAK1和NF-κB表達的陽性率與腫瘤的組織學分級、腫瘤的最大徑相關，TAK1與腫瘤的淋巴結轉移相關，二者均與患者的年齡、分子分型無明顯相關性。見表2。

表1 兩組中TAK1和NF-κB陽性率的比較〔n(%)〕

組別nTAK1NF?κB觀察組5725(43 86)30(52 63)對照組372(5 41)4(10 81)χ2/P值16 2052/<0 000116 9965/<0 0001

表2 觀察組不同臨床特征中TAK1和NF-κB陽性率的比較〔n(%)〕

臨床特征nTAK1NF?κB組織學分級 Ⅰ級60(0．00)1(16 67) Ⅱ級4018(45 00)20(50 00) Ⅲ級117(63 64)9(81 82) χ2/P值6 4559/0 03966 9827/0 0305腫瘤最大徑 <4cm267(26 92)8(30 77) ≥4cm3118(58 06)22(70 97) χ2/P值5 5693/0 01839 1653/0 0025淋巴結轉移 無3712(32 43)19(51 35) 有2013(65 00)11(55 00) χ2/P值5 5923/0 01800 0693/0 7923年齡 <55歲3816(42 11)19(50 00) ≥55歲199(47 37)11(57 89) χ2/P值0 1425/0 70580 3167/0 5736分子分型 管腔A型258(32 00)10(40 00) 管腔B型1910(52 63)13(68 42) Her?2亞型84(50 00)5(62 50) 基底細胞亞型53(60 00)2(40 00) χ2/P值2 6733/0 44484 1325/0 2475

2.3 觀察組中TAK1和NF-κB表達的相關性 TAK1和NF-κB有正相關性(r=0.48,P=0.034 1)。

3 討 論

在乳腺癌發生與發病的分子生物學機制中，較多基因和通路參與其中〔5〕，MAPK和NF-κB信號通路是最重要的二條〔6〕。MAPK信號轉導通路是一條廣泛存在于各種細胞內的信號轉導途徑，由一組絲/蘇氨酸蛋白激酶組成，以MAPKKK-MAPKK-MAPK級聯反應的方式相繼磷酸化激活，將細胞外信號轉導至細胞內及細胞核中，調控細胞周期和基因的表達〔7,8〕。研究顯示TAK1蛋白主要通過MAPK級聯反應模式調控MAPKs活性來影響細胞的生物學行為，生理狀態下，活化的MAPKs可以調控細胞生長、分化、凋亡，促進胚胎發育和維持組織內環境的穩定，在病理狀態下可以參與腫瘤尤其是炎癥相關性腫瘤的發生和發展〔9,10〕。TAK1不是一個單純的促癌或抑癌蛋白，在不同的條件下，可以扮演多種角色〔11〕。NF-κB可能與TAK1有較多的協同作用。有研究認為NF-κB可以被各種各樣的被認為對宿主有潛在危害的刺激因子所激活，進而引起炎癥、免疫反應及腫瘤形成〔12,13〕。也有觀點認為NF-κB可以通過誘導細胞因子來調節免疫反應及黏附分子，進而導致白細胞被招募到炎癥的部位〔14〕。NF-κB信號通路也被證實在細胞進程中具有重要作用，如細胞增殖和細胞耐藥等〔15,16〕。

本實驗提示TAK1和NF-κB表達增加可以促進腫瘤的生長過程，此時腫瘤的異型增生明顯，失控性增生也加強，腫瘤細胞生長活躍，細胞繁殖旺盛，腫瘤體積增大〔17〕。本結果提示TAK1和NF-κB表達增多時可以使腫瘤的分級更高，細胞的分化更差。由于乳腺癌的分級是通過腺管形成、核多形性和核分裂計數的評估進行評定的，因此二者高表達與較少的腺管形成、較明顯的核的多形性及較多數的核分裂象相關。TAK1表達增多可以促進腫瘤的淋巴道播散，腫瘤的遷移能力增強，在周圍組織和其他器官的定植能力提高，進而形成轉移灶〔18,19〕。分子分型是與治療和預后直接相關的因素，尤其是高HER-2表達的患者和三陰乳腺癌患者，而本實驗并未發現二者與分子分型的關系，二者與腫瘤治療和預后的關系有待證實。TAK1激活是腫瘤壞死因子和白細胞介素誘導的NF-κB信號激活的一個重要步驟，并且腫瘤壞死因子受體相關因子(TRAF)6介導的TAK1的K34殘基上的K63-連接的多聚泛素化與轉化生長因子通路中的TAK1的活化有關〔20,21〕，因此，二者協同性的相互作用涉及的基因和蛋白因素可能更多。

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〔2015-03-20修回〕

(編輯 苑云杰)

劉廣寅(1975-)，男，碩士，副主任醫師，主要從事乳腺癌研究。

R734

A

1005-9202(2016)24-6159-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.24.054

1 唐山工人醫院營養治療科 2 唐山工人醫院病理科