HPLC-DAD測定不同時期安吉白茶中EGCG的含量

北 拉，蒲首丞，孫梅好

（浙江師范大學化學與生命科學學院，浙江金華 321004）

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HPLC-DAD測定不同時期安吉白茶中EGCG的含量

北 拉，蒲首丞，孫梅好

（浙江師范大學化學與生命科學學院，浙江金華 321004）

摘 要：文章采用HPLC-DAD對不同時期安吉白茶葉中的表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）的含量變化進行分析。采用AgilentC18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5μm），流動相：甲醇︰水（2%乙酸）15︰85；流速：1.0 ml/min；檢測波長：276 nm；柱溫：35℃。結果是EGCG線性范圍為0.304～3.040μg，相關系數R2=0.999 9，平均回收率100.21%，RSD為1.04%。該方法精密度、準確度好，穩定性高，能簡便、快速。

關鍵詞：HPLC-DAD 安吉白茶 表沒食子兒茶素沒食子酸酯 含量

安吉白茶（AnjiwhiteTea），為山茶科（Theaceae）茶屬（Camellia）雙子葉木本植物。現代研究表明白茶中的EGCG成分具有顯著的抗氧化、抗腫瘤、抗突變和心血管疾病等作用。文章通過對明前和明后兩種不同生長期的白茶EGCG含量的測定，為以白茶為原料制備EGCG單體和EGCG提取物的茶葉加工企業提供實驗依據。

1　材料與方法

1.1材料

（1）主要研究對象。安吉白茶（安吉采集和炒制）。

（2）主要試劑。表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCE）（上海源葉公司，含量：98%），甲醇為色譜純試劑，其它試劑均為分 析純。實驗用水艾柯超純水。

（3）主要儀器。Agilent1260型高效液相色譜儀（Agilent公司），電子分析天平（賽多利斯），恒溫水浴鍋（精宏公司），真空干燥箱（天呈），RA-25AA旋轉蒸發儀（上海亞榮）。

1.2方法

（1）色譜條件色譜柱為AgilentC18色譜柱（4.6 mm×150 mm，5μm），流動相：甲醇︰水（2%乙酸）15︰85；流速：1.0 ml/min；檢測波長：276 nm；柱溫：35℃。

（2）對照品溶液的制備精密稱取經真空干燥24 h處理后的15.2 mg表沒食子兒茶素沒食子酸酯對照品，置于100 ml容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，搖勻，即得對照品溶液，于冰箱中低溫保存備用。表沒食子兒茶素沒食子酸酯濃度為152 μg/ml。

（3）供試品溶液的制備分別準確稱取樣品約1.0 g，置于500 ml平底燒瓶中，加水100 ml80℃水，置85℃水的水浴中加熱回流1 h，共水浴加熱回流兩次，經過濾收集濾液，最后減壓濃縮濾液，定容至50 ml容量瓶中，搖勻，0.45μm微孔濾膜過濾，取續濾液待測。

2　結果與分析

2.1目標組分的確定

按照1.2項色譜條件下，對照品溶液和供試品溶液分別進樣10μl，DAD檢測器檢測分析，在波長為276 nm下是EGCG的最大吸收，DAD檢測器檢測記錄儲存200～400 nm的所有色譜，對照品與2種白茶樣品的EGCG的保留時間都在8.5 min。

2.2流動相的選擇

測定EGCG含量流動相為甲醇︰水系統和甲醇︰水（2%乙酸）系統，進行對比試驗發現兩個系統都能使EGCG分離開來（分離度R＞1.5），甲醇︰水系統中EGCG嚴重拖尾，而甲醇︰水（2%乙酸）系統中EGCG峰形比較好，故選擇甲醇︰水（2%乙酸）15︰85為該測定方法的流動相系統。

2.3線性關系考察

精密吸取上述對照品溶液分析，進樣量分別為2、4、6、8、12、16、20μl，測其峰面積，以標準溶液的進樣量X（μg）為橫坐標，以峰面積Y（s）為縱坐標作圖，得到線性回歸方程為Y=854.160X-20.854，相關系數為R2=0.9999，表明EGCG在0.152～3.040μg范圍內與峰面積之間具有良好的線性關系。

2.4精密度試驗

精密吸取配制的對照品溶液10μl進樣，依上述色譜條件測定，重復進樣5次，測定EGCG峰面積，RSD為1.6%，結果表明精密度良好。

2.5穩定性試驗

分別取配制的2種供試樣品溶液10μl，于0、2、4、6、8、10 h進樣測定，各重復進樣6次，測定目標組分的含量，以考察供試品溶液的穩定性，10 h內早白茶和晚白茶樣品EGCG組分RSD分別為2.1%、2.8%。結果表明供試品溶液在10 h內基本穩定。

2.6加樣回收試驗

精密稱取已知含量的白茶樣品6份，分別精密加入一定量EGCG對照品，按供試品溶液制備方法制備樣品溶液，依上述色譜條件測定含量，結果顯示該方法具有較高的準確度。

2.7樣品中EGCG含量的測定

分別取1.3.2項配制的2種供試品溶液10μl，按1.2項色譜條件進樣測定，每樣重復進樣3次，求峰面積均值，按外標法計算其含量，早白茶中EGCG的含量為：81.28 mg/g，RSD為0.59%；晚白茶中EGCG的含量為：62.71 mg/g，RSD為0.97%

3　結論

采用該法對早白茶（明前主采茶期）和晚白茶（明后采茶末期）中的EGCG進行了含量分析，實驗結果表明早白茶EGCG的含量為：81.28 mg/g，含量較高；晚白茶EGCG含量：62.71 mg/g，比早白茶含量低，但含量比較高。該測定白茶中EGCG含量的方法操作簡單，重現性好，分析結果準確可靠，可用于白茶的質量控制。

參考文獻

［1］ 于淑池，劉暢，王乘慧，等.安吉白茶茶多酚的抗氧化活性研究.時珍國醫國藥，2012，23（5）：1 184～1 187

［2］ 謝文鋼，邵濟波，韓楠，等.安吉白茶的研究進展.福建茶葉，2011，33（6）：4～7