李 樂,郝志香
(1.新鄉市動物衛生監督所,河南 新鄉 453000;2.新鄉市動物疫病預防控制中心,河南 新鄉 453000)
一起豬偽狂犬病的診斷與防治
李 樂1,郝志香2
(1.新鄉市動物衛生監督所,河南 新鄉 453000;2.新鄉市動物疫病預防控制中心,河南 新鄉 453000)
豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病毒(Pseudorabiesvirus,PRV)引起的豬的急性傳染病。該病在豬呈爆發性流行。引起妊娠母豬流產、死胎,公豬不育,新生仔豬的大量死亡,育肥豬呼吸困難、生長停滯等。本病廣泛分布于世界各地。近年來,隨著我國集約化、規模化養豬業的發展,從國外引進種豬較多,使我國豬偽狂犬病呈多發趨勢,發病區域不斷擴大,且病勢日益惡化,有多個省市均有報道。它以種豬的嚴重繁殖障礙、仔豬的腦脊髓炎—腹瀉、豬的呼吸道綜合征和生長發育受阻等臨床形式表現,給養豬業造成了巨大的經濟損失。2016年3月新鄉縣某豬場發生疑似豬偽狂犬病,通過系統的調查診斷,確診為豬偽狂犬病。
豬偽狂犬??;診斷;防治
發病早期多以懷孕母豬流產和死胎為先兆,近三分之一的妊娠母豬在預產期前兩周前發生流產,產出死胎,青年母豬和空懷母豬出現返情而屢配不孕或不發情,飲食欲正常,體溫不高;新生仔豬第1 d表現正常,從第2 d開始發病,體溫升高41~41.5℃,出生3~5 d是死亡高峰期,死亡率80%以上,同時,發病仔豬表現出共濟失調、頭頸歪斜、轉圈運動等神經癥狀,怕冷,呼吸困難,嘔吐,拉稀,一旦發病,突然死亡;兩周齡以內的仔豬感染該病后,病情極嚴重,發病死亡率100%,仔豬突然發病,體溫上升達41℃以上,精神極度委頓,發抖,運動不協調,痙攣,嘔吐,腹瀉等;斷奶后的仔豬主要表現為呼吸困難,體溫39~41℃,主要表現為神經癥狀,拉稀,嘔吐等,嚴重影響豬只的發育生長,發病率在30%以下,死亡率在16%以下,如果拉黃色稀糞時,常以死亡為轉歸;成年豬一般為隱性感染,出現咳嗽、打噴嚏等呼吸系統癥狀。
剖解流產胎兒發現全身彌漫性出血,頭部水腫,腦膜出血,脾臟出血或壞死,膀胱出血,全身淋巴結腫大,周邊出血,肺、心外膜、腎臟有針尖狀出血點。死亡仔豬除上述病理變化外,腦脊液、胸腹腔液、心包液顯著增多,肝、脾表面可見大量針尖到米粒大小的灰白色病灶,胃腸黏膜卡他性或出血性炎癥,扁桃體充血、水腫,有少量出血點,喉頭出血,肺淤血、水腫,心肌松軟。
3.1 樣品采集與處理
采集解剖死亡豬后的組織(脾、肺、肝、腎、扁桃體及腹股溝淋巴結)樣品2份,加入少許PBS液稀釋研磨,在-70℃反復凍融3次后,4℃ 12 000 rpm離心5 min,取上清置-20℃保存備用。
3.2 核酸提取
核酸提取采用RNA/DAN純化試劑盒(購自紀元亨),具體操作方法如下:取已處理樣品,加入裂解液600 μL,充分顛倒混勻,室溫靜置3~5 min;將液體吸入吸附柱中,13 000 rpm離心30 s;棄去收集管中的液體,加入600 μL洗液,13 000 rpm離心30 s,重復一次;棄去收集管中液體,13 000 rpm空柱2 min,以除去殘留液;將吸附柱移入新的1.5 mL離心管中,向中央加入洗脫液25~50 μL,室溫靜置1 min,13 000 rpm離心30 s,離心管中的液體即為病毒核酸模板。
3.3 豬偽狂犬病毒熒光PCR鑒定
豬偽狂犬病毒(PRV)熒光PCR鑒定采用豬偽狂犬病毒(PRV)核酸擴增試劑盒(PCR-熒光探針法),購自廣州維伯鑫生物科技有限公司,檢測方法及判定標準按照試劑說明書進行。對兩份病料提取的模板及陽性質控和陰性質控進行熒光PCR擴增后,得到的結果見圖1。根據結果(圖1)可以看出,兩份病料均為豬偽狂犬病毒陽性。

圖1 臨床組織樣品熒光PCR鑒定PRV結果
根據實驗室診斷結果,可以確診該豬場是由豬偽狂犬病毒感染引起的發病和死亡。
5.1 陽性豬場的防治
陽性豬場及時隔離病豬,立即對全場未發病豬只全部進行基因缺失弱毒疫苗的緊急接種,提供保護,3日齡內仔豬每頭注射1頭份,種豬每頭注射2頭份,對控制疫情起到了較好效果。
5.2 陰性豬場的防治
陰性豬場調入豬規范檢疫方可引入,為避免因引種帶入病原的風險,提倡自繁自養;實施封閉式管理,豬場大門口來往人員、車輛的嚴格控制與消毒,控制生產一線人員外出,嚴格細化回場后的消毒凈化工作,謝絕場外人員進入生產區參觀;實行單一性飼養;建立健全符合本場實際的免疫程序,嚴格本病的免疫接種的操作規程,選用高效優質基因缺失滅活疫苗,使易感豬群始終得到有效保護,后備種豬基礎免疫后,于配種前1個月,肌肉注射1頭份,妊娠母豬產前4周,肌肉注射1頭份,生產公豬每6個月,肌肉注射1頭份,;建立健全和貫徹落實獸醫防疫規章制度;制度化檢測,逐步淘汰,建立無偽狂犬病的種豬群和豬場。
豬偽狂犬病流行呈上升趨勢,控制與凈化豬偽狂犬病是需要采取綜合防制措施,其中正確地進行免疫接種是一個最有效的方式。要規范的引種,嚴謹的生物安全措施,引種時加強檢疫措施,定期血清監測與病豬的果斷淘汰,科學的免疫程序,良好的飼養管理以及優質高效的基因缺失疫苗的合理應用等。國內研制成功偽狂犬的常規弱毒疫苗、滅活疫苗以及基因缺失疫苗,能有效地防止狂犬病。目前基層主要注意對高致病性豬藍耳病、豬瘟、豬丹毒等傳染病的防疫,而對豬偽狂犬病的防疫有所松懈。建議根據本地疫情情況,加強防疫。消毒是殺滅病原、防止疫情蔓延的有效手段。
(編輯:李善祥)
S858.28
B
1006-799X(2016)22-0064-02
李 樂(1987-),男,河南新鄉人,助理獸醫師,主要研究方向為動物及動物產品檢疫。