甲型肝炎病毒的微生物學(xué)檢驗分析

王旭　李冬梅　馬可佳　江云飛

甲型肝炎病毒的微生物學(xué)檢驗分析

王旭1李冬梅2馬可佳1江云飛1

目的 探討我院甲型肝炎病毒的微生物檢驗現(xiàn)狀，為預(yù)防甲型肝炎提供參考數(shù)據(jù)及臨床診斷提供參考。方法 選取2015年2～8月期間，在我院接受體檢的受檢人員50例，對其檢驗結(jié)果進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果 50例受檢人群中抗HAV-IgM陽性34例，抗HAV-IgM陰性16例。結(jié)論 甲型肝炎（以下簡稱甲肝）是由甲型肝炎病毒引起的，其發(fā)病人群以兒童及青少年為主。甲肝發(fā)病的高峰期是冬春季節(jié)，病程呈自限性，甲肝極少引發(fā)急性重型肝炎，伴隨著全世界滅活疫苗的使用，甲肝的流行已經(jīng)得到十分有效的控制。

甲型肝炎病毒；微生物學(xué)檢驗；檢驗結(jié)果

甲型肝炎病毒（HAV）可引起甲型肝炎，其是甲型肝炎的病原體［1］。甲型肝炎病毒是由Feinslone在1973年首次發(fā)現(xiàn)的，其使用免疫電鏡技術(shù)在肝炎急性期患者糞便中發(fā)現(xiàn)HAV ，并在1979年運用細(xì)胞培養(yǎng)成功得到單獨的甲型肝炎病毒［2］。甲型肝炎病毒歸屬于小核糖核酸病毒科，曾被稱為腸道病毒72型，現(xiàn)屬于肝病毒屬。本研究對甲型肝炎病毒生物學(xué)檢驗進(jìn)行分析，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取2015年2～8月，在我院接受體檢的受檢人員50例，其中男25例，女25例，年齡15～75歲，平均年齡（32.24±8.97）歲，所有受檢人員均抽取外周靜脈血5 ml進(jìn)行檢驗。

1.2檢驗方法

主要采用微生物學(xué)檢驗法，一般情況下不進(jìn)行病原學(xué)的分離檢查，微生物檢查的主要目的為測定病毒抗原及抗體。甲型肝炎病毒感染在早期時可檢測出樣本血清中抗-HAV IgM，其具有出現(xiàn)早、消失快的特點，是HAV新近感染的重要特征。對于甲肝疫苗的接種者，在疫苗注射前后需要檢測中和型抗-HAV［3］。檢測方法為，用能夠在猴胚腎細(xì)胞中引起感染的甲型肝炎病毒株來進(jìn)行接種，用HAV抗體來抑制病變的發(fā)生來測定中和抗體效果。

2　結(jié)果

50例受檢人群，抗HAV-IgM陽性34例，占68%，抗HAVIgM陰性16例，占32%。

3　討論

甲肝患者及亞臨床感染者是甲型肝炎病毒的主要傳染源，在通常情況下甲型肝炎病毒伴隨患者的糞便排出體外。HAV的污染渠道主要是攜帶病毒的糞便通過污染水源、食物、食具、海產(chǎn)品等來進(jìn)行傳播，進(jìn)而造成病毒的散發(fā)性流行［6］。甲型肝炎病毒可以在被污染的水源、食物、海產(chǎn)品中存活數(shù)月或更久時間。在甲型肝炎發(fā)病后的第二周開始，伴隨著腸道中的抗-HAV IgA以及血清中抗-HAV IgM/IgG的產(chǎn)生，患者的糞便中將不會再排出病毒。甲型肝炎病毒的感染均為急性感染，目前尚未發(fā)現(xiàn)持續(xù)性的感染病例［7］。甲型肝炎病毒主要經(jīng)過口腔侵入人體，首先在唾液腺內(nèi)或口咽部進(jìn)行增殖，然后在局部淋巴結(jié)與腸黏膜中大量的增殖，而后入侵到血液中形成病毒血癥，最后侵犯肝臟。因為甲型肝炎病毒在細(xì)胞培養(yǎng)過程中的增殖速度緩慢，不會直接造成顯著的細(xì)胞損害，所以其致病的機制除病毒的直接作用以外，引起肝組織損害中的免疫應(yīng)答也起到一定的作用。無論是甲型肝炎的隱性感染還是顯性感染，人體都可產(chǎn)生抗-HAV IgA及抗-HAV IgM/ IgG，抗-HAV IgA多出現(xiàn)在急性期與恢復(fù)早期；抗-HAV IgM/IgG多出現(xiàn)在恢復(fù)后期，抗體可以在如人體內(nèi)維持存在多年，使機體對病毒的再次感染具有一定的免疫力［8］。因為水源經(jīng)口傳染及糞便污染飲食是甲型肝炎病毒的主要傳播方式，因此預(yù)防甲肝的主要方式是加強飲食業(yè)衛(wèi)生管理、衛(wèi)生宣教工作及水源的保護(hù)。甲型肝炎患者食具、衣物及床單要認(rèn)真消毒，排泄物要妥善的處理。目前的研究表明，肌肉注射丙種球蛋白可以對甲型肝炎有一定的被動免疫預(yù)防作用；在甲型肝炎的潛伏期時，肌肉注射丙種球蛋白可以減輕臨床癥狀。

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Microbiological Examination of Hepatitis A Virus

WANG Xu1LI Dongmei2MA Kejia1JIANG Yunfei11Clinical Laboratory，Prevention and Control Center of Heilongjiang Provincial Land Reclamation Bureau of Disease， Harbin Heilongjiang 150090， China，2School of Municipal and Environmental Engineering， Harbin Institute of Technology， Harbin Heilongjiang 150090， China

Objective To investigate the present situation of hepatitis A virus in our hospital， and provide reference data for the prevention of hepatitis A and provide reference for clinical diagnosis. Methods From February 2015 to August， 50 patients

physical examination in our hospital， and the results were analyzed retrospectively. Results 34 cases of anti HAV-IgM positive， 16 cases of anti HAV-IgM negative. Conclusion Hepatitis A （hereinafter referred to as hepatitis） caused by hepatitis A virus. The incidence of people main were children and adolescents. The peak of the incidence of hepatitis A is in winter and spring， and the course is selflimiting， hepatitis a rarely cause acute severe hepatitis， with the use of live vaccine inactivated whole world， the epidemic of hepatitis A has been very effective control.

Hepatitis A virus， Microbiological examination， Test results

R186

A

1674-9308（2016）14-0029-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.14.017

1黑龍江省農(nóng)墾總局疾病預(yù)防控制中心檢驗科，黑龍江 哈爾濱 150090；2哈爾濱工業(yè)大學(xué)市政環(huán)境工程學(xué)院，黑龍江 哈爾濱150090

1.3生物學(xué)性狀

1.3.1形態(tài)與結(jié)構(gòu)甲型肝炎病毒為直徑約27 nm的球形顆粒，其大小、形態(tài)與腸道病毒相仿，衣殼無包膜呈立體對稱。HAV耐熱性遠(yuǎn)高于腸道病毒，在60℃狀態(tài)下可以保持1 h不被滅活，并對酸處理、乙醚有一定的抵抗力［4］。

1.3.2培養(yǎng)特性甲型肝炎病毒的易感動物群體，在經(jīng)過靜脈注射或口腔接觸后可使易感動物發(fā)生肝炎。甲型肝炎病毒在潛伏期及急性期的早期可以隨糞便排出，恢復(fù)期的血清中能夠檢驗出甲型肝炎病毒的抗體。甲型肝炎病毒可以在包括傳代恒河猴胚腎細(xì)胞、原代狨猴肝細(xì)胞、人胚肺二倍體細(xì)胞、肝癌細(xì)胞株等多種的細(xì)胞內(nèi)增殖。HAV病毒增殖是非常緩慢的，白細(xì)胞的釋放也是十分緩慢的，其不會引起細(xì)胞的裂解［5］。因此，甲型肝炎病毒的分離通常需要數(shù)周或更久的時間，并且較難大量的獲取病毒。