香櫞精油體外抗氧化及其抑菌活性研究

劉春菊,牛麗影,*,郁 萌,李大婧,劉春泉

(1.江蘇省農業科學院農產品加工研究所,江蘇南京 210014;2.國家蔬菜加工技術研發專業分中心,江蘇南京 210014)

香櫞精油體外抗氧化及其抑菌活性研究

劉春菊1,2,牛麗影1,2,*,郁 萌1,李大婧1,2,劉春泉1,2

(1.江蘇省農業科學院農產品加工研究所,江蘇南京 210014;2.國家蔬菜加工技術研發專業分中心,江蘇南京 210014)

為了研究香櫞精油的抗氧化性及對細菌、酵母和霉菌的抑菌活性,本文采用體外抗氧化法和瓊脂平板擴散法,研究香櫞精油總還原力,清除DPPH自由基、·OH自由基和H2O2能力,以及對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、黑曲霉的抑制作用。結果表明:香櫞精油的抗氧化能力與質量濃度呈正相關,對DPPH自由基、·OH自由基(IC50值為0.32 mg/mL)和H2O2(IC50值為148 μg/mL)均有一定的清除能力。香櫞精油對霉菌的抑制作用明顯強于酵母與細菌,其中對黑曲霉的抑制效果最顯著(25.39±1.12) mm,對金黃色葡萄球菌抑制最弱(14.04±1.35) mm。最小抑菌濃度在0.31～1.25 mg/mL,且在pH3～8范圍內、溫度80、115、121 ℃及一定時間紫外線照射(20、40、60 min)影響下,對大腸桿菌和釀酒酵母仍保持較強的抑制作用。

香櫞,精油,抗氧化,抑菌

香櫞(CitrusmedicaL.)為蕓香科柑橘屬,是我國傳統觀賞植物及中藥,已有二千余年的栽培歷史。近幾年來,香櫞樹因其觀賞價值與香櫞的怡人香氣,成為蘇浙地區重要的園林樹種,香櫞的產量已達3000 t以上。香櫞具有理氣寬中,消脹降痰之功效,可緩解胃腹脹痛、嘔吐等癥狀[1]。香櫞的果皮富含豐富的精油,占干重的6.5%～9%,主要由萜烯類碳氫化合物及含氧衍生物組成,藥效成分為柚皮苷,精油含量略高于枸櫞[2-3]。

蕓香科柑橘屬類植物為重要的植物精油來源,不僅作為天然的食品添加劑和賦香劑,廣泛應用于飲料、焙烤食品、糖果、冷飲等領域,也是日化、美容等行業應用最廣泛的精油之一。柑橘類精油成分復雜,揮發性強,具有鎮痛、消炎、抗病毒、抗菌和抗氧化等多種生物活性功效[4]。如柚皮精油對亞油酸的過氧化表現出較強的抑制作用[5],葡萄柚精油可有效抑制大腸柑橘、黑曲霉、金黃色葡萄球菌等多個菌種生長,具有廣譜抗菌性[6]。Choi等[7]對34種柑橘精油研究發現其對DPPH自由基清除率在17.7%～64.0%,其中有31種高于同等濃度的水溶性維生素E。基于柑橘類精油的生理活性,其作為藥品原料、功能食品基料及食品添加劑具有廣闊的應用和開發前景,需求將日益增加。因此,本文以自制香櫞精油為對象,研究香櫞精油總還原力、清除自由基能力,以及對黑曲霉、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌及枯草芽孢桿菌的抑菌活性,探討香櫞精油在抗氧化和抑菌抗菌以及食品防腐領域的應用效果,旨在為香櫞精油活性成分的深度開發利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

香櫞 江蘇省靖江市;柑橘 江蘇南京蘇果超市2,2-二苯基-1-三硝基苯肼(DPPH) 美國sigma公司;抗壞血酸(VC)、丁基甲基苯酚(BHT)、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、鐵氰化鉀、三氯乙酸、三氯化鐵、無水乙醇、過氧化氫、七水合硫酸亞鐵、水楊酸、牛肉膏、瓊脂、葡萄糖、氯化鈉、丙酮、氫氧化鈉、鹽酸 分析純;供試菌種:黑曲霉(Aspergillumniger)、釀酒酵母(Saccharmoycescerevisiae)、大腸桿菌(Escherichiacoli,G-)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,G+)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis,G+) 南京師范大學金陵女子學院微生物實驗室;牛肉膏蛋白胨培養基:牛肉膏、蛋白胨、瓊脂(液體培養基不含瓊脂)、水;PDA培養基:酵母浸粉、蛋白胨、葡萄糖、瓊脂(液體培養基不含瓊脂)、水。

FA2104電子分析天平 北京賽多利斯科學儀器公司;TF16-WS臺式高速離心機 長沙湘儀離心機儀器有限公司;HH-8 數顯恒溫水浴鍋 江蘇省榮華儀器有限公司;TU-1810紫外分光光度計 北京普析通用儀器制造有限公司;PB-10 pH計 北京賽多利斯科學儀器公司;722型可見分光光度計 上海棱光技術公司;6 mm打孔器 寧波得力集團;SYQ-DSX-280B型手提式不銹鋼壓力蒸汽滅菌鍋 上海中安醫療器械廠;SW-CJ-2D型超凈工作臺 鄭州宏郎儀器設備有限公司;DNP-9052BS-Ⅲ型電熱恒溫培養箱 上海新苗醫療器械制造有限公司。

1.2 香櫞精油和柑橘精油提取

新鮮的香櫞或柑橘清洗干凈,瀝干外表皮上的水分,將香櫞或柑橘果皮與果肉分離,粉碎香櫞或柑橘果皮至粒度為20 mm左右,按固液比1∶2(w/v)添加3%氯化鈉,水蒸氣蒸餾3 h,油水混合物分層,上層液體即為香櫞或柑橘精油。將精油移入棕色瓶中,加入少許無水硫酸鈉,劇烈振搖至無水分存在于精油中,將處理后精油進行過濾,然后將其置于干凈、干燥的棕色瓶中,于4 ℃冰箱內保存,備用。

1.3 香櫞精油抗氧化能力測定

1.3.1 香櫞精油總還原力測定 用無水乙醇配置10 mg/mL香櫞精油溶液,將其稀釋至質量濃度為0.04、0.08、0.12、0.16、0.20 mg/mL。分別取1 mL上述香櫞精油溶液于試管中,依次加入2.5 mL 0.02 mol/L磷酸緩沖液(pH6.6),2.5 mL 1%鐵氰化鉀溶液,50 ℃水浴20 min后,加入2.5 mL質量濃度10%的三氯乙酸溶液,混勻,1000 r/min離心10 min,取上清液2.5 mL于試管中,加去離子水2.5 mL和0.1%三氯化鐵0.5 mL,混合均勻后,常溫反應5 min,于700 nm波長處測定吸光值[8],VC和BHT為陽性對照,每組平行3次。

1.3.2 DPPH自由基清除能力測定 按照1.3.1稀釋成不同濃度的香櫞精油,分別取各濃度的香櫞精油1 mL與2 mL 2 mmol/L DPPH溶液混勻后,室溫下避光反應15 min,于517 nm下測定吸光值,空白組香櫞精油溶液以無水乙醇代替,并以等體積蒸餾水和無水乙醇混合液為空白調零,VC和BHT為陽性對照[9],每組平行3次。

DPPH清除率(%)=[1-(A1-A2)/A3]×100

式(1)

其中:A1為3 mL樣品溶液與2 mL DPPH溶液;A2為3 mL樣品溶液與2 mL無水乙醇;A3為3 mL蒸餾水與2 mL DPPH溶液。

1.3.3 H2O2清除能力測定 按照1.3.1稀釋成不同濃度的香櫞精油,分別取各濃度的香櫞精油2.5 mL與2.5 mL 10 mmol/L H2O2溶液混合均勻,于230 nm波長下測定吸光值,VC和BHT為陽性對照[10],每組平行3次。

清除率(%)=[1-(A1-A2)/A3]×100

式(2)

其中:A1為2.5 mL樣品溶液+2.5 mL H2O2溶液;A2為2.5 mL樣品溶液+2.5 mL無水乙醇;A3為2.5 mL蒸餾水+2 mL H2O2溶液。

1.3.4 ·OH自由基清除能力測定 按照1.3.1稀釋成不同濃度的香櫞精油,分別取各濃度的香櫞精油1 mL加入含1 mL 8.8 mmol/L H2O2、1 mL 9 mmol/L FeSO4、1 mL 9 mmol/L水楊酸-乙醇溶液反應體系中,最后加入1 mL H2O2啟動反應,于37 ℃下反應30 min,以蒸餾水作為空白,在510 nm下測定吸光值,每組平行3次。

清除率(%)=[1-(A1-A2)/A3]×100

式(3)

其中:A1為1 mL樣品溶液+1 mL FeSO4溶液+1 mL水楊酸-乙醇溶液+1 mL H2O2溶液;A2為1 mL樣品溶液+1 mL FeSO4溶液+1 mL水楊酸乙醇溶液+1 mL無水乙醇;A3為1 mL蒸餾水+1 mL FeSO4溶液+1 mL水楊酸乙醇溶液+1 mL H2O2溶液。

1.4 香櫞精油抑菌活性測定

1.4.1 菌株活化與菌懸液制備 用滅菌接種環分別挑取細菌(大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌)、酵母菌和黑曲霉菌株于營養瓊脂平板上劃線培養,細菌置于恒溫培養箱37 ℃下培養24 h,酵母菌和黑曲霉分別于28 ℃下培養24 h和48 h。然后挑取單菌落接種于營養瓊脂斜面培養基上擴大培養,繼續按照上面的條件培養,獲得活化菌體。從經過活化的菌體斜面上挑取一環菌體接種于相應液體培養基中,放入恒溫振蕩培養箱培養至對數生長期,分別吸取以上培養菌液,加入無菌水稀釋至菌落數為105～106CFU/mL,備用。

1.4.2 香櫞精油抑菌圈測定 采用紙片瓊脂擴散法測定抑菌活性,使用打孔器將定性濾紙制成直徑為6 mm小圓紙片,高壓滅菌后備用,每個平皿上呈正三角形放置3片濾紙片,每片滴加8 μL精油,濾紙片之間間隔一定距離。以無菌蒸餾水為空白對照,以自制柑橘精油為陽性對照,恒溫培養箱內培養,細菌37 ℃培養24 h,霉菌28 ℃培養48 h,酵母28 ℃培養24 h。測定抑菌圈直徑,重復3次。

1.4.3 最小抑菌濃度(MIC)測定 以丙酮為溶劑,運用紙片瓊脂擴散法和半數稀釋法,將香櫞精油稀釋至不同濃度,吸取9 mL液體培養基與1 mL香櫞精油丙酮溶液混勻,依次得到精油濃度為5、2.5、1.25、0.63、0.31、0.16、0.08 mg/mL的平板培養基。待培養基冷卻凝固后,平板劃線接種[11],按1.4.1所述條件培養,觀察平板上菌體生長情況,每個精油濃度梯度作3組平行實驗,與對照組(菌落正常生長)比較,有菌落生長者為無抑制作用,以完全無菌落生長的最低精油濃度為其最低抑菌濃度,丙酮和無菌水為空白對照。

1.4.4 pH對香櫞精油抑菌活性的影響 采用1 mol/L NaOH溶液和1 mol/L HCI溶液分別將培養基的pH調節為3、4、5、6、7、8,并制備培養平板,建立不同pH梯度的系列培養基,選取大腸桿菌、釀酒酵母為實驗菌,每片載體濾紙片滴加8 μL香櫞精油。大腸桿菌于37 ℃培養24 h,釀酒酵母于28 ℃下培養24 h,測量抑菌圈大小,每組3次重復。

1.4.5 熱處理對香櫞精油抑菌活性的影響 將香櫞精油原液分別置于80、100、121 ℃的環境中,處理30 min,對照組精油樣品置于30 ℃放置30 min;以大腸桿菌、釀酒酵母為實驗菌,采用紙片瓊脂擴散法,測量抑菌圈大小,每組3次重復。

1.4.6 紫外線照射對香櫞精油抑菌活性的影響 將香櫞精油原液分別置于40 W紫外燈管下照射20、30、60 min,以無紫外照射的精油為對照組,選擇大腸桿菌、釀酒酵母為實驗菌,采用紙片瓊脂擴散法,測量抑菌圈大小,每組3次重復[12]。

1.5 數據分析方法

2 結果與分析

2.1 香櫞精油抗氧化能力

2.1.1 香櫞精油總還原力 抗氧化劑是通過自身還原作用,給出電子而清除自由基,還原能力越強,抗氧化性能越強[13]。由圖1可知,香櫞精油、陽性對照BHT和VC的還原能力與質量濃度均呈正相關。當質量濃度為0.4 mg/mL時,VC與BHT的總還原力無顯著差異,香櫞精油還原力低于VC與BHT。當質量濃度大于0.4 mg/mL時,VC與BHT總還原力繼續升高,香櫞精油總還原力增長變緩。質量濃度為1.0 mg/mL時,還原力最大為BHT、其次是VC,還原力最小為香櫞精油。

圖1 香櫞精油的總還原能力Fig.1 Reducing power of Citrus medica essential oil

2.1.2 香櫞精油對DPPH自由基清除能力 DPPH是一種以氮為中心,依靠3個苯環空間排布形成共振穩定性的有機自由基,DPPH的單電子在517 nm處有強吸收,可使其醇溶液呈紫色,而當有自由基清除劑存在時,可與其單電子配對而使吸收逐漸消失,醇溶液褪色程度與其接受的電子數呈量效關系,因而可用分光光度計快速檢測自由基清除劑的抗氧化能力[14-15]。

由圖2可知,香櫞精油、BHT和VC均有清除DPPH自由基的能力,且香櫞精油和VC在測量的質量濃度范圍內,清除DPPH自由基能力與質量濃度呈正相關。而VC對DPPH自由基的清除率則一直維持較高水平,均在90%以上,BHT次之。3種測試樣品中,香櫞精油清除DPPH自由基的能力最弱,在最高濃度10 mg/mL時,清除率為26.1%,VC對DPPH自由基清除率為96.12%。

圖2 香櫞精油清除DPPH自由基能力Fig.2 DPPH radical scavenging capacities of Citrus medica essential oil

2.1.3 香櫞精油對·OH自由基清除能力 ·OH自由基是自然界中僅次于氟的氧化劑,具有極強的得電子能力,可對機體造成各種氧化損傷,從而引發細胞病變,導致各種疾病及加速機體衰老。而通過抗氧化劑的清除作用,可減輕或減少因·OH引發的各種疾病與損傷[16]。

由圖3可知三種樣品對·OH自由基的清除能力隨質量濃度增加而增大,質量濃度較低時,BHT與香櫞精油清除能力較強,但隨質量濃度增加,清除率增大趨勢變緩;VC對·OH自由基的清除率幾乎呈線性關系,增速較快。當質量濃度小于0.2 mg/mL時,BHT的清除能力最強,其次為香櫞精油,最后為VC;當質量濃度大于0.2 mg/mL時,VC清除率繼續快速升高,BHT及香櫞精油對自由基清除能力增長不顯著(p>0.05)。當質量濃度為0.5 mg/mL時,VC、BHT和香櫞精油對·OH的清除率分別為88.34%、62.62%和53.78%。香櫞精油、VC與BHT清除·OH自由基的IC50值為0.32、0.19、0.22 mg/mL。

圖3 香櫞精油對·OH自由基清除能力Fig.3 ·OH scavenging activity of Citrus medica essential oil

2.1.4 香櫞精油對H2O2清除能力 H2O2是一種活性氧,是有氧代謝氧化還原反應產生的中間產物之一,體內過多氧自由基可損傷細胞結構,導致機體產生多種疾病。由圖4可知,香櫞精油、BHT和VC對H2O2的清除能力與質量濃度呈正相關,不同抗氧化劑質量濃度與H2O2清除率呈量效關系。質量濃度為0.2 mg/mL時,BHT對H2O2的清除率最高為67.23%,其次為VC,清除率為62.55%,最后為香櫞精油,清除率為53.02%。香櫞精油、VC與BHT清除H2O2的IC50值為148、95、46 μg/mL。

圖4 香櫞精油對H2O2的清除能力Fig.4 H2O2 scavenging activity of Citrus medica essential oil

2.2 香櫞精油抑菌活性

2.2.1 香櫞精油抑菌圈直徑大小 抑菌圈實驗結果判定標準為:抑菌圈直徑大于15 mm為高度敏感、10～15 mm為中度敏感,7～9 mm為低度敏感、無抑菌圈者為不敏感[17]。

圖5為各供試菌種產生抑菌圈圖,同時由表1可知,香櫞精油對黑曲霉、釀酒酵母、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌均有較強的抑制作用,其抑菌圈直徑分別為(25.39±1.12)、(17.25±1.09)、(16.59±0.80)、(16.19±1.73) mm,都大于15 mm,屬于高度敏感,對金黃色葡萄球菌抑菌直徑為(14.04±1.35) mm屬于中度敏感。對五種供試菌而言,香櫞精油對霉菌的抑制作用強于細菌和酵母。與實驗室自制柑橘皮精油對照比較可知,香櫞精油與柑橘精油抑菌活性有極顯著差異(p<0.01),香櫞精油對霉菌的抑制能力明顯強于柑橘精油,抑制酵母菌能力略低于柑橘精油,而抑制細菌能力則隨菌種不同有所差異。

表1 香櫞精油對供試菌種的抑菌圈測定效果

注:“-”為無抑菌圈出現,不同小寫字母表示同列差異顯著(p<0.05),不同大寫字母表示同行差異極顯著(p<0.01)。

2.2.2 香櫞精油的最低抑菌濃度(MIC) 由表2可知,香櫞精油對黑曲霉、釀酒酵母、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的最低抑菌濃度分別為0.31、0.63、1.25、1.25、1.25 mg/mL。香櫞精油對黑曲霉與釀酒酵母的抑制作用較強。

植物精油成分較為復雜,其抑菌活性主要是由于一些低分子量物質的存在,如酚類、萜烯類和醛酮類物質。這些物質的單體已經被證實具有很好的抑菌效果[18],另外,許多在精油中含量較低的成分,如α-蒎烯、β-蒎烯、萜品烯、異松油烯等,也被證實對精油抑菌活性有很重要的作用[19]。

作為香櫞精油中含量最高的成分檸檬烯,有報道表明,檸檬烯對大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、和黑曲霉都具有較好的抑制效果,具有廣譜抗菌性[20-21];對面包酵母、啤酒酵母和黑曲霉的抑制作用甚至強于苯甲酸鈉和山梨酸鉀等化學防腐劑,但檸檬烯對金黃色葡萄球菌抑制效果較差[22],這與本實驗結果保持一致。

酚類物質也是植物精油抗菌的主要活性成分之一,香櫞精油中含有少量香芹酚,它可使細胞膜中的蛋白質變性,并與細胞膜中的磷脂反應破壞細胞膜的滲透性,破壞細胞膜上的磷脂雙分子層的同時,攻擊破壞其酶系統,抑制細菌保護酶的活性,還可導致細胞脂質和蛋白質損失,從而抑制微生物的生長[23]。

表2 香櫞精油最低抑菌濃度(MIC)測定效果

注:“+”有菌落生長,“-”無菌落生長。

表3 香櫞精油在不同pH條件下的抑菌效果

注:同行不同字母表示差異顯著(p<0.05),圖4、圖5同。

表4 熱處理對香櫞精油抑菌活性的影響

表5 紫外線照射對香櫞精油抑菌活性的影響

2.2.3 pH對香櫞精油抑菌活性的影響 香櫞精油在不同pH條件下對實驗菌種大腸桿菌與釀酒酵母的抑制效果見表3。香櫞精油對大腸桿菌的抑制作用隨pH升高,先增強后又減弱,在pH=5與pH=6時,抑菌圈大小無顯著差異(p>0.05),均大于15 mm,對大腸桿菌抑制能力屬高度敏感。在整個pH范圍內,抑菌活性較為穩定,均保持于高度或中度敏感,pH為5時,抑菌圈直徑最大,為(16.66±1.15) mm。對釀酒酵母的抑制,在pH為5時達到最強,抑菌圈直徑為(17.21±1.10) mm;在pH為3時,抑菌圈最小,直徑為(11.85±0.61) mm。酵母菌為喜酸菌種,在pH4～5的酸性環境下可以較好生長,而香櫞精油,在pH4～8范圍內對酵母菌保持較強的抑制能力,抑菌圈直徑均大于15 mm,屬高度敏感抑制。

2.2.4 熱處理對香櫞精油抑菌活性的影響 熱處理前后香櫞精油對大腸桿菌和釀酒酵母的抑菌效果見表4,香櫞精油在80、115、121 ℃下處理30 min后,仍保持高度抑菌敏感性。

香櫞精油在121 ℃處理后,抑制大腸桿菌及釀酒酵母活性最高,精油抑菌活性雖上下波動,對供試菌種卻始終保持高度敏感;當處理溫度為121 ℃時,香櫞精油對大腸桿菌及釀酒酵母菌的抑菌圈為最大,抑菌圈直徑分別為(16.85±0.96) mm和(17.57±1.41) mm,且與對照組無顯著性差異,表明精油具有較好的抑菌熱穩定性。

2.2.5 紫外線照射對香櫞精油抑菌活性的影響 紫外線照射20、40、60 min,香櫞精油對大腸桿菌和釀酒酵母的抑菌活性見表5。從表5中可看出,紫外照射40 min時,對釀酒酵母抑制能力最強,抑菌圈直徑為(17.59±1.36) mm,照射20 min時,對大腸桿菌抑制能力最強,抑菌圈直徑為(16.77±1.43) mm,照射40 min時處理組香櫞精油抑制大腸桿菌活性與對照組相比無顯著差異(p>0.05)。抑菌圈大小仍都保持在15 mm以上,仍屬于高度敏感范圍內。可確認,一定時間范圍內紫外線照射對香櫞精油的抑菌活性無顯著影響,說明香櫞精油在一定時間范圍紫外線照射影響下,抑菌性能保持穩定。

3 結論

采用體外抗氧化模型及紙片瓊脂擴散法,研究香櫞精油的抗氧化及抗菌活性。發現香櫞精油的抗氧化能力與質量濃度呈正相關,對DPPH自由基、·OH自由基(IC50值為0.32 mg/mL)和H2O2(IC50值為148 μg/mL)均有一定的清除能力。香櫞精油對黑曲霉、釀酒酵母、大腸桿菌、金黃葡萄球菌和枯草桿菌的最小抑菌濃度(MIC)分別為0.31、0.63、1.25、1.25、1.25 mg/mL。香櫞精油對霉菌的抑制作用明顯強于酵母與細菌,其中對黑曲霉的抑制效果最顯著,且在pH5～7范圍、溫度80～121 ℃及紫外線照射20～40 min條件下,對大腸桿菌和釀酒酵母仍保持較強的抑制作用(抑菌圈直徑(15 mm)。

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Study on antioxidant and antibacterial activities of essential oils fromCitrusmedica

LIU Chun-ju1,2,NIU Li-ying1,2,*,YU Meng1,LI Da-jing1,2,LIU Chun-quan1,2

(1.Institute of Agricultural Products Processing,Jiangsu Academy of Agricultural Sciences,Nanjing 210014,China; 2.National Vegetable Processing Technology R&D Sub-centers,Nanjing 210014,China)

The objective was to study the antioxidant activities and the antibacterial activities to bacteria,yeasts and molds of essential oil fromCitrusmedica. The antioxidant activities of essential oil fromCitrusmedicawere evaluated based on the method of vitro antioxidant and agar diffusion. The results for the antioxidant capacity of essential oil fromCitrusmedicaincreased with the increasing concentration,there were scavenging capacity on DPPH free radicals,·OH free radicals(IC50=0.32 mg/mL)and H2O2(IC50=148 μg/mL). The antimicrobial activity and its stability of the essential oils against five species of microorganisms(Escherichiacoli,Staphylococcusaureus,Bacillussubtilis,Saccharomycescerevisiae,Aspergillusniger)were discussed by the disc diffusion method. The essential oils showed inhibition zones against all microorganisms tested. The data indicated thatAspergillusnigerwas the most sensitive microorganism tested with the largest inhibition zone(25.39±1.12) mm,andStaphylococcusaureusexhibited the smallest inhibition zone(14.04±1.35) mm. Minimum inhibitory concentrations ranged from 0.31～1.25 mg/mL. At the certain range of pH(3～8),temperature(80,115,121 ℃)and ultraviolet rays(20,40,60 min)impact compared with the control,essential oil fromCitrusmedicaremained relatively stable antimicrobial properties. The essential oil displayed a broad antimicrobial spectrum and exerted a strong antimicrobial effect against five strains tested.

Citrusmedica;essential oil;antioxidant;antibacterial

2016-06-13

劉春菊(1979-)，女，碩士，助理研究員，主要從事果蔬加工與質量控制研究，E-mail：cjliu0306@163.com。

*通訊作者:牛麗影(1977-)，女，博士，副研究員，主要從事果蔬加工研究，E-mail:liying.niu@hotmail.com。

公益性行業(農業)科研專項經費項目(201503142)。

TS201.2

A

1002-0306(2016)24-0000-00

10.13386/j.issn1002-0306.2016.24.000