桑葚提取液對D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化能力的影響

2016-02-19 01:53:44鄧秀婷李彥彬楊高群徐遠超林秀澄李朝敢

中國老年學雜志 2016年1期

鄧秀婷　羅　姮　李彥彬　楊高群　徐遠超　林秀澄　李朝敢

(右江民族醫學院臨床學院，廣西　百色　533000)

鄧秀婷羅姮李彥彬楊高群徐遠超林秀澄李朝敢1

(右江民族醫學院臨床學院，廣西百色533000)

摘要〔〕目的觀察桑葚提取液對D-半乳糖致衰老小鼠超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量的影響。方法用D-半乳糖建立小鼠衰老模型，同時實驗組分別灌胃給予不同劑量(2.0、4.0、6.0 g·kg-1·d-1)的桑葚提取液，給藥40 d后處死小鼠，取血清及肝臟測定SOD、GSH-Px活性和MDA含量。結果桑葚提取液可以提高小鼠肝臟中的SOD、GSH-Px活性和降低MDA含量。低劑量桑葚提取液提高小鼠血清中的SOD、GSH-Px活性和降低MDA含量的作用較明顯。結論桑葚提取液具有抗氧化延緩衰老的作用。

關鍵詞〔〕桑葚提取液；D-半乳糖；抗氧化；抗衰老

1右江民族醫學院生物化學教研室

第一作者：鄧秀婷(1990-)，女，在讀碩士，主要從事內分泌與代謝病研究。

《本草綱目》中記載，桑葚單食，止消渴，利五臟關節，通血氣，久服不饑，安魂鎮神，令人聰明，變白不老。現代藥理研究也表明，桑葚含有豐富的維生素C、胡蘿卜素、黃酮、硒等物質〔1〕，具有抗衰老、抗氧化、調節免疫、降脂、降血糖的作用〔2〕。抗衰老與自由基的清除有密切關系。隨著年齡的增長，體內過量的自由基可通過氧化作用攻擊細胞膜上的生物大分子引起細胞膜上一系列過氧化反應、DNA突變和生物酶活力下降，最終導致細胞功能受損以至衰老、死亡〔3〕。目前，國內對桑葚的研究多見于心血管系統方面，而對其抗氧化、抗衰老作用方面比較少見。本實驗探討桑葚的抗氧化和抗衰老作用。

1材料與方法

1.1藥品、試劑與實驗動物桑葚干購自國營正規中藥店；超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)測定試劑盒由南京建成生物工程研究所提供；D-半乳糖由上海金穗生物科技有限公司提供；實驗動物為昆明種小白鼠，體重(20±2)g，雌雄兼用，由右江民族醫學院動物實驗中心提供，許可證號為SCXR(桂)2003-0010號。

1.2動物分組、衰老模型的建立及給藥動物適應環境3～4 d后，隨機分成正常對照組、衰老模型組、桑葚提取液低、中、高劑量組，每組10只。除正常對照組外，其余各組動物每只按體重劑量150 mg/kg皮下注射D-半乳糖溶液，每日一次，正常對照組注射等量生理鹽水。同時桑葚提取液低、中、高劑量組動物每只分別按體重桑葚生藥2.0、4.0、6.0 g/kg 給予灌胃，每日1次，衰老模型組與正常對照組給予等量生理鹽水灌胃，連續40 d。實驗過程中每組意外死亡2只。

1.3血清中SOD、MDA、GSH-Px含量的測定從動物眼眶取血，37℃水浴靜置30min， 3 000 r/min離心10 min，分離得血清，參照南京建成生物工程公司試劑盒說明書的方法步驟分別測定血清中SOD、MDA、GSH-Px的含量。

1.4肝臟SOD、MDA、GSH-Px的測定斷椎處死動物，取肝臟，在4℃低溫下操作，用生理鹽水洗除多余血液，濾紙吸收多余水分，天平稱重，用玻璃勻漿器勻漿，用生理鹽水稀釋成10%肝勻漿，3 000 r/min離心10 min，取上清液部分，按試劑盒說明書的方法步驟分別測定肝臟中SOD、MDA、GSH-Px的含量。

1.5統計學處理采用SPSS11.5軟件行方差分析。

2結果

2.1桑葚提取液對D-半乳糖致衰老小鼠血清中SOD、GSH-Px活性和MDA含量的影響與正常對照組比較，衰老模型組、桑葚中劑量組血清SOD活性明顯降低(P<0.01，P<0.05)；而桑葚低、中、高劑量組MDA含量明顯降低(P<0.01)。與衰老模型組比較，桑葚低劑量組血清SOD活性明顯升高(P<0.05)，而桑葚低、中、高劑量組MDA含量明顯降低(P<0.01)。桑葚低、中、高劑量組GSH-Px活性與正常對照組、衰老模型組，無顯著差異(P>0.05)。見表1。

表1　桑葚提取液對D-半乳糖致衰老小鼠血清SOD、

與正常對照組比較：1)P<0.05，2)P<0.01；與衰老模型組比較：3)P<0.05，4)P<0.01，下表同

2.2桑葚提取液對D-半乳糖致衰老小鼠肝臟中SOD、GSH-Px活性和MDA含量的影響與正常對照組比較，衰老模型組肝臟SOD、GSH-Px活性明顯降低(P<0.05、P<0.01)；桑葚低、中、高劑量組肝臟SOD活性也明顯降低(P<0.05、P<0.01)；桑葚高劑量組肝臟MDA含量、GSH-Px明顯降低(均P<0.05)。與衰老模型組比較，桑葚低、中劑量組肝臟SOD的活性明顯升高(P<0.01、P<0.05)，而桑葚高劑量組MDA含量明顯降低(P<0.05)，桑葚低、中、高劑量組肝臟GSH-Px的活性明顯升高(P<0.01、P<0.05)。見表2。

表2　桑葚提取液對D-半乳糖致衰老小鼠肝臟SOD、

3討論

當今醫學技術研究抗衰老機制中，自由基學說與線粒體DNA損傷學說占主要地位。自由基學說認為，在人體中不斷產生自由基并存在有效的自由基清除系統，使自由基維持在正常水平。一旦這種平衡打破，過剩的自由基經常發生一系列的氧化反應，最終使細胞膜的功能受損，細胞活力下降，造成組織器官功能衰退，從而使機體進入衰老狀態〔4〕。由此可見，清除自由基，抗氧化對于延緩衰老有明顯作用。

桑葚中含有大量的維生素C、硒、胡蘿卜素、黃酮等天然抗氧化成分，并具有提高免疫力，抗氧化，降血糖、降血脂的作用。這些作用可能與桑葚中富含的黃酮、維生素C有關。有文獻報道〔5〕，維生素C具有減輕氧化損傷，保護mtDNA和氧化呼吸酶活力的作用，并借助此發揮抗氧化延緩衰老的功效。而黃酮類化合物則通過抑制脂質過氧化，提高抗氧化酶系統活性而間接產生抗自由基的作用〔6〕。

研究表明，D-半乳糖致衰老動物模型能夠模擬動物老化過程，能使SOD、GSH-Px活性下降、MDA含量增加〔7〕。SOD因其能分解氧自由基，被稱為人體的“清道夫”。GSH-Px主要依靠其還原作用，從而起到保護生物酶免受過氧化物損害的作用。MDA是脂質氧化分解的產物，其生成的多少可以間接地反映組織損傷程度〔4〕。所以測定SOD、GSH-Px、MDA有助于了解機體內衰老的情況。

本次實驗結果表明，桑葚提取液具有提高血清和肝臟中SOD、GSH-Px活性、降低MDA含量的作用。桑葚低劑量治療組在提高SOD、GSH-Px活性方面比桑葚中、高劑量治療組可能要好一些，而在降低MDA含量方面，桑葚高劑量治療組可能要好一些。從實驗結果還可以看出，SOD、GSH-Px活性的增高和MDA含量的降低與桑葚提取液的劑量大小還沒有表現出明顯的量-效關系，桑葚提取液的劑量與抗氧化、抗衰老的效果之間的關系仍有待進一步實驗研究。

綜上，桑葚提取液具有一定抗氧化、延緩衰老的作用。目前國內對桑葚多數局限在藥理作用的研究上，并未投入實際的生產應用中，如果能將其藥用價值與保健價值相結合，桑葚的價值就能在更開闊的領域中得到發揮。

參考文獻4

1郭長江，韋京豫，楊繼軍，等.66種蔬菜、水果抗氧化活性的比較研究〔J〕.營養學報，2003；25(2)：204-7.

2金杰，李志西，張鋒，等.桑葚醋提取物抗氧化性的研究〔J〕.中國釀造，2005；151(1)：20-2.

3童坦君，張宗玉.衰老機制及其學說〔J〕.生物科學進展，2007；38(1)：14-7.

4王桔紅，謝宗平.衰老機理及抗衰老研究進展〔J〕.河西學院學報，2003；2(2)：94-6.

5高志清，海春旭，王鵬，等.維生素C對D-半乳糖致亞急性衰老小鼠模型的影響〔J〕.中國老年學雜志，2007；27(4)：634-8.

6陸蓓，葉靜靈，徐曉虹，等.柑桔黃酮對D-半乳糖衰老模型抗氧化作用〔J〕.中藥新藥與臨床藥理，2006；17(5)：343-6.

7雷鳴，朱祖建.D-半乳糖致衰老的研究進展〔J〕.解剖科學進展，2011；17(1)：83-5.

〔2014-04-17修回〕

(編輯安冉冉/曹夢園)

通訊作者：李朝敢(1963-)，男，教授，主要從事中草藥抗衰老作用研究。