劉 磊,孔德光
(1.山東省濰坊市峽山區王家莊街道獸醫站,山東 濰坊 262115;
2.山東省安丘市畜牧局,山東 安丘 262100)
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豬痢疾的癥狀與實驗室診斷及防治
劉磊1,孔德光2
(1.山東省濰坊市峽山區王家莊街道獸醫站,山東 濰坊 262115;
2.山東省安丘市畜牧局,山東 安丘 262100)
摘要:豬痢疾是由豬痢疾密螺旋體引起豬的一種以血痢為主的腸道傳染病。主要特征為大腸黏膜發生嚴重的黏液性、出血性和壞死性炎癥。在自然條件下僅豬發生,尤以2~4月齡的斷奶仔豬最易感染,其他畜禽未見感染發病。主要通過消化道感染和傳播,本病尚無疫苗應用,以預防為主。發病時,應用抗生素治療。
關鍵詞:豬;痢疾;診斷;防治
1臨床癥狀
最急性病豬無明顯癥狀而突然死亡,是豬群開始暴發本病的預兆。最急性病豬往往突然死亡,急性病程1~2天,慢性病豬病程1~2周[1]。急性病豬精神差,食欲減退,糞便較硬且表面附有條狀黏液,隨后體溫升高至40.5~41.0℃左右,糞稀如水樣,嚴重者糞內充滿黏液和血液,有的混有膿液或脫落的黏膜碎片,病畜渴欲增加,糞便惡臭,腹部凹陷,起立無力,逐漸消瘦,最后極度衰弱而死。慢性病例病情較輕,下痢,糞中黏液及壞死組織碎片較多,血液較少,病期較長。
2實驗室檢驗
2.1病原學檢查
直接鏡檢:取新鮮糞便(含黏液)或直腸拭子,或刮取病變的結腸黏膜直接抹片,干燥,火焰固定,用結晶紫或稀釋堿性復紅染色3~5min,水洗,吸干。鏡檢時每份樣品應制作2張,油鏡觀察每片最少10個視野。豬痢疾密螺旋體的菌體長度為6~8μm,呈2~5個疏螺旋狀,兩端尖銳。當多數視野中至少出現3~5個類似上述的菌體,可判為假定病豬。
組織切片鏡檢:按常規將病變大腸制成石蠟切片,用結晶紫或姬姆薩染色鏡檢。若在黏膜表面特別是在腺窩處見到聚集不同數量的類似豬痢疾密螺旋體菌體,多時密集如網狀,可作初步判斷。
分離培養和鑒定:①材料準備:采取新鮮糞便、大腸內容物或大腸病變黏膜,不要冰凍,立即分離培養。糞便、直腸拭子可置于0.5mL(0.01mol/L、pH值7.2)的磷酸鹽緩沖液中,密封后0~4℃保存,3天內處理完畢。兩端結扎的結腸段,0~4℃可保存5~7天。分離培養基(胰胨大豆血液瓊脂)的配制:胰胨15g,植物蛋白胨5g,氯化鈉5g,瓊脂15g,蒸餾水1000mL,pH值7.3左右。使用前加入鹽酸壯觀霉素400μg/mL和5%脫纖馬血或牛血。②操作方法:將病料進行直接劃線接種于培養基,置厭氧培養器內42℃加以培養,每隔4~6天檢查1次,共檢查2~4次。病原性豬痢疾密螺旋體呈完全溶血(強β溶血)。溶血區呈條狀或一端稍尖的橢圓形斑點(與其他細菌在菌落周圍形成圓形溶血區有明顯不同),一般不見菌落。當培養條件適宜時,可見到云霧狀菌苔。經鏡檢發現豬痢疾密螺旋體典型形態時,可在無雜菌的溶血區挑取一小塊瓊脂,劃線接種于新培養基上,37℃培養,每隔2天移植1次,一般移植2~4次即可獲得純培養。③致病性測定:致病性測定需用10代以內的菌種,10代以上的菌種毒力逐漸減弱。將血液瓊脂平皿上的菌體用生理鹽水沖洗,低速離心去瓊脂。取2周齡小豬2頭,保持饑餓48h。全身麻醉后手術使結腸暴露,先注入200~400mL滅菌生理鹽水,用于將腸內容物向后推移。每隔5~10cm將腸作一道雙重結扎,一般可結扎6~10個腸段,每段間隔2cm,不要損傷血管。每個腸段注入5mL菌液(含5億個菌),另留一腸段注入5mL生理鹽水作為對照。另一頭實驗豬也接種相同的菌株和菌量,但腸段接種的內容物前后順序與第一頭相反。縫合腹腔,禁食,經48~72h剖檢。如接種腸段滲出液增多(3~7mL),內含黏膜、纖維素或血液,黏膜腫脹、充(出)血,抹片鏡檢有大量的密螺旋體菌,則判為致病菌株。1頭豬可同時測定5~9個菌株。
2.2微量凝集試驗
試驗方法。材料準備:V型孔微量板、微量加樣器、磷酸鹽緩沖液(pH值7.2)、兔血清等。抗原由指定單位供應。試驗方法:先將被檢血清用含有1%兔血清的磷酸鹽緩沖液作10倍稀釋,于56℃滅能30min。然后在微量板上每排第一、二孔每孔加入10倍稀釋被檢血清50μL,第二至六孔每孔加入磷酸鹽緩沖液液50μL。從第二孔開始血清作倍比稀釋至第五孔(稀釋倍數為160倍),最后棄去50μL混合液。每孔加50μL抗原。第六孔為抗原對照。設陰、陽性血清對照。輕微振蕩后,置38℃中,經18~24h后觀察結果。
結果判定:根據反應板底部凝集(呈盾狀)或不凝集(呈圓點狀)判定凝集滴度。血清效價判定,以引起50%菌體凝集的血清最高稀釋度表示。
3防治措施
預防本病目前尚無推廣應用的疫苗。若豬群一旦發生本病,如數量較少時,除采取嚴格消毒處理糞便外,可根據情況急宰或淘汰病豬。病豬糞便污染的場地、周圍環境、圈舍等,可用1%氫氧化鈉或2%來蘇爾消毒。如發病較多時,可用抗生素藥物進行治療,如對發病豬群全群投服痢菌凈,按0.5~1.0mg/kg飼料比例拌料喂服,連用10天[2]。病豬和同群豬內臟作工業用或銷毀,肉尸經高溫處理后出場,豬皮消毒后利用,脂肪煉制后可食用。
參考文獻:
[1] 孟凡祥.豬痢疾的診治[J].現代農業科技,2010(15),367-368.
[2] 李勇生.豬痢疾的診斷與防治[J].畜牧獸醫雜志,2008(5),107.
文章編號:2095-9737(2016)01-101-01
中圖分類號:S858.28
文獻標識碼:B
作者簡介:劉磊(1977-)男,山東安丘人,大專,助理獸醫師。
收稿日期:2015-09-28