PAPP-A及VEGF在子癇前期患者血清中的表達及其相關性研究

顧佳士，邱麗華，戴海燕

(1.上海市浦東醫院婦產科，上海201300.；2.上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院婦產科，上海200127)

PAPP-A及VEGF在子癇前期患者血清中的表達及其相關性研究

顧佳士1，邱麗華2，戴海燕1

(1.上海市浦東醫院婦產科，上海201300.；2.上海交通大學醫學院附屬仁濟醫院婦產科，上海200127)

目的觀察子癇前期患者血清中妊娠相關血漿蛋白A(PAPP-A)及血清血管內皮生長因子(VEGF)表達情況，探討其與子癇前期病情嚴重程度的關系。方法選擇2013年1月至2014年12月在上海市浦東醫院門診行常規產前檢查并分娩的子癇前期孕婦60例為子癇前期組，根據病情嚴重程度將其分為輕度子癇前期組30例，重度子癇前期組30例。選取同期行本院門診產前檢查并住院分娩的正常孕婦30例為對照組。分別采用酶聯免疫吸附試驗測定三組孕婦血清中的PAPP-A水平和VEGF的水平，分析其與子癇前期患者病情嚴重程度的關系。結果重度子癇前期組新生兒出生體重[(3.4±0.5)kg]低于輕度子癇前期組[(3.6±1.4)kg]和對照組[(3.7±0.5)kg]，差異均具有統計學意義(P＜0.05)；重度子癇前期組患者血清PAPP-A值、VEGF值和24 h尿蛋白值分別為(900.6±379.0)μg/ml、(7.2±4.2)pg/ml、(2.5±1.2)g/24 h，輕度子癇前期組分別為(783.8±204.7)μg/ml、(5.3±1.4)pg/ml、(1.4±0.3)g/24 h，均分別高于對照組的(592.9±222.9)μg/ml、(4.8±2.8)pg/ml、(0.2±0.1)g/24 h，差異均具有統計學意義(P＜0.05)；重度子癇前期組的血清PAPP-A值和24 h尿蛋白值均高于輕度子癇組，差異具有統計學意義(P＜0.05)；Speraman相關分析顯示，血清PAPP-A值和血清VEGF值呈明顯的正相關(r=0.574，P＜0.05)。結論PAPPA及VEGF均參與了子癇前期的發生及發展。

子癇前期；妊娠相關血漿蛋白-A；血管內皮生長因子；相關性

子癇前期(Preeclampsia，PE)是一種妊娠期特有疾病，初產婦發病率為3%～8%[1]，是導致母胎發病和死亡的重要原因，多發生于妊娠20周后出現的以高血壓、蛋白尿為主要臨床表現的一組臨床癥候群，常伴有多器官損傷及功能紊亂，其病因不明。目前研究證實，子癇前期的發病和絨毛滋養細胞侵蝕不良以及螺旋小動脈重鑄不足導致的胎盤形成不良，致胎盤淺著床，并使合體滋養細胞及細胞滋養細胞長期處于慢性缺血、缺氧狀態密切相關。妊娠相關血漿蛋白-A (Pregnancy-associated plasma protein-A，PAPP-A)是一種妊娠密切相關的大分子糖蛋白，主要由胎盤滋養細胞、蛻膜細胞合成并分泌進入血循環，可以反應滋養細胞缺血缺氧的水平。血管內皮生長因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)是一種糖蛋白，其主要的生物學功能是促進新生血管形成和增加血管通透性，缺氧是促進血管內皮生長因子分泌的重要因素。本研究通過檢測子癇前期患者血清中妊娠相關血漿蛋白A (PAPP-A)及血清血管內皮生長因子(VEGF)表達情況，進一步研究其與子癇前期病情嚴重程度的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2013年1月至2014年12月在上海市浦東醫院門診行常規產前檢查并分娩的子癇前期孕婦60例為子癇前期組，根據病情嚴重程度其分為輕度子癇前期組30例，重度子癇前期組30例。同期在本院門診行產前檢查并住院分娩的正常孕婦30例為對照組。子癇前期診斷標準參考妊娠期高血壓診斷標準[2]。三組受檢者均為單胎，均排除其他妊娠并發癥及合并癥。本研究經過醫院倫理委員會的批準，患者均知情同意。

1.2 研究方法

1.2.1 資料收集采集所有患者的年齡、孕周、孕產次等一般信息，分娩后統計新生兒出生體重。收集所有待測者入院24 h尿量并檢測24 h尿蛋白定量。

1.2.2 標本采集所有的待測者均采集清晨空腹肘部靜脈血5 ml，-4℃冰箱放置1 h后離心10 min，取上層血清放置于-80℃冰箱待測。

1.2.3 PAPP-A及VEGF定量測定采用酶免疫分析法(ELISA)檢測，PAPP-A及VEGF試劑盒均由上海冠泰生物科技有限公司提供并進行檢測，均按試劑盒說明書嚴格操作，樣品及標準品均設雙孔檢驗。

1.3 統計學方法應用SPSS13.0統計軟件進行數據分析，計量數據以均數±標準差(±s)表示，組間比較采用t檢驗；兩變量的相關性采用Spearman相關分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組孕婦的年齡、孕周、新生兒出生體重比較三組孕婦年齡、孕周比較差異無統計學意義；重度子癇前期組新生兒出生體重均低于輕度子癇前期組和對照組，差異具有統計學意義(P＜0.05)；輕度子癇前期組和對照組新生兒出生體重比較差異無統計學意義(P＞0.05)，見表1。

表1 三組孕婦在年齡、孕周、新生兒出生體重的比較(±s)

表1 三組孕婦在年齡、孕周、新生兒出生體重的比較(±s)

注：與對照組比較，aP＜0.05；與輕度子癇前期組比較，bP＜0.05。

組別重度子癇前期組輕度子癇前期組對照組新生兒出生體重(kg) 3.4±0.5a3.6±1.4 3.7±0.5例數30 30 30年齡(歲) 25.5±1.5 24.5±2.1 23.5±3.3孕周37.8±0.6 38.4±1.6 39.5±0.4

2.2 三組孕婦血清PAPP-A、VEGF和24 h尿蛋白比較重度子癇前期組和輕度子癇前期組患者血清PAPP-A值和24 h尿蛋白值均高于對照組，差異具有統計學意義(P＜0.05)。重度子癇前期組和輕度子癇前期組患者血清VEGF值比較差異無統計學意義(P＞0.05)，見表2。

表2 三組孕婦在血清PAPP-A，VEGF，24 h尿蛋白比較(±s)

表2 三組孕婦在血清PAPP-A，VEGF，24 h尿蛋白比較(±s)

注：與對照組比較，aP＜0.05；與輕度子癇前期組比較，bP＜0.05。

組別例數PAPP-A(μg/m)VEGF(Pg/ml)尿蛋白(g/24 h)重度子癇前期組輕度子癇前期組對照組30 30 30 900.6±379.0a783.8±204.7b592.9±222.9 7.2±4.2a5.3±1.4 4.8±2.8 2.5±1.2a1.4±0.3b0.2±0.1

2.3 血清PAPP-A和血清VEGF的相關性Speraman相關分析顯示，血清PAPP-A值和血清VEGF值呈明顯的正相關，相關指數為r=0.574，P＜0.05。

3 討論

3.1 PAPP-A和子癇前期之間的關系PAPP-A是一種相對分子量為800×103的大分子糖蛋白化合物，其結構是由等比例的兩個分子量為200×103～250× 103的亞基與兩個嗜酸粒細胞的主要堿性蛋白前體組成，通過二硫鍵結合而成的大分子化合物(PAPPA/ ProMBP)[3]。其生物學作用主要通過作用于胰島素樣生長因子軸(IGF Axis)而發揮生物學作用。IGF Axis由胰島素樣生長因子(IGF)、胰島素樣生長因子結合蛋白(IGFBPs)及IGFBPs的水解蛋白共同構成[4-5]。PAPP-A是IGFBP的蛋白水解酶。IGFBP經裂解后釋IGF。在缺氧的環境下，IGF可以和平滑肌細胞上的胰島素樣生長因子受體結合發生信號的傳導，促進血管平滑肌細胞的遷徙、增殖和分化，導致血管內皮的增生和狹窄，大量的炎性細胞的釋放，內皮細胞的遷移和毛細血管網的重塑[6]，進而導致子癇前期的發生。Bersinger等[7]研究表明，子癇前期患者妊娠早中期血清PAPP-A水平降低，其測定了孕17周時子癇前期患者血清PAPP-A水平，與對照組相比明顯減少。而董旭東等[8]研究表明孕早中期血清PAPP-A明顯高于血壓正常組。對于孕晚期血清PAPP-A的變化，目前的研究多數認為子癇前期患者孕晚期血清PAPP-A的數值較正常組偏高，而且隨著病情的加重，其濃度也逐漸上升，由此推測血清PAPP-A可以作為判斷病情嚴重程度的指標之一[9]。我們的研究表明，在孕晚期子癇前期患者血清PAPP-A數值明顯高于血壓正常組，而且重度子癇前期組明顯高于輕度子癇前期組，重度子癇前期組24 h尿蛋白定量明顯高于輕度子癇前期組和對照組，重度子癇前期組新生兒出生體重明顯小于輕度子癇前期組和對照組，提示血清PAPP-A數值可以反應孕晚期子癇前期病情嚴重程度。

3.2 VEGF和子癇前期之間的關系VEGF是由8個外顯子、7個內顯子組成的單一基因，全長14 kD，定位于染色體6p21.3[10]。VEGF參與了許多生理性和病理性的血管生成，在缺氧的環境下時，其表達也明顯增強。基礎研究表明，VEGF一方面促進基質金屬蛋白酶(MMP)的表達，MMP反過來可以加強VEGF誘導血管內皮細胞遷徙的作用。另一方面，VEGF還可促進纖溶酶原激活劑及其蛋白質分解酶的釋放，降解毛細血管基底膜，促進內皮細胞遷移和趨化，誘使血管內皮細胞侵入，進一步形成新生血管[11]。基礎研究表明，VEGF參與了胎盤血管的構成與重鑄過程，呂曉娟等[12]測定大鼠子癇前期模型中血清和胎盤中VEGF的表達，結果表明：子癇前期大鼠血清和胎盤中VEGF的表達均明顯低于正常對照組。而劉建國等[13]檢測了妊娠期高血壓組和對照組孕晚期孕婦中血清VEGF表達情況顯示，子癇前期組血清VEGF的表達高于于對照組，隨子癇前期病情加重，VEGF水平呈上升趨勢，提示孕婦血清中的VEGF的上升和子癇前期的發病及病情進展相關。我們的研究顯示在孕晚期子癇前期組患者血清中的VEGF明顯高于血壓正常組，與劉建國等[13]的研究結果一致。但是重度子癇前期組和輕度子癇前期組血清VEGF比較差異無統計意義，提示VEGF并不能作為判斷子癇前期病情嚴重程度的參考指標。

3.3 PAPP-A和VEGF的關系胎盤血管重鑄障礙是子癇前期發生發展的重要機制之一，而缺血缺氧及血管內皮的損傷是導致胎盤血管重鑄障礙的重要原因。PAPP-A可以反應滋養細胞缺血缺氧的水平，而VEGF其主要功能是促進新生血管形成和增加血管通透性。目前已有研究顯示，血清PAPP-A和VEGF聯合檢測對妊娠相關疾病診斷具有一定的參考價值[14]。我們的研究顯示血清PAPP-A值和血清VEGF值之間呈明顯的正相關(r=0.574，P＜0.05)，進一步提示了PAPPA及VEGF均參與了子癇前期的發生及發展，同時胎盤淺著床導致的缺血缺氧，促進血管內皮生長因子分泌從而導致了胎盤血管異常增生和重鑄，進一步加重了子癇前期病情的發展。

本研究通過檢測重度子癇前期、輕度子癇前期和對照組患者血清中的PAPP-A和VEGF水平發現PAPPA及VEGF均參與了子癇前期的發生及發展，而且血清PAPP-A和VEGF之間呈正相關。孕婦血清PAPP-A數值可以反應孕晚期子癇前期病情的嚴重程度。

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Serum changes of pregnancy-associated plasma protein-A,vascular endothelial growth factor and theircorrelation in preeclampsia.

GU Jia-shi1,QIU Li-hua2,DAI Hai-yan1,1.Department of Gynaecology and Obstetrics, Shanghai Pudong Hospital,Shanghai 200399,CHINA;2.Department of Gynaecology and Obstetrics,Renji Hospital,School of Medicine,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200127,CHINA

ObjectiveTo investigate the serum changes of pregnancy-associated plasma protein-A(PAPP-A), vascular endothelial growth factor(VEGF)in patients with preeclampsia,and to analyze their correlation with the severity of disease.MethodsFrom January 2013 to December 2014,90 pregnant women who had prenatal examinations and delivered in the Department of Obstetrics,Shanghai Pudong Hospital were recruited,including 60 patients with preeclampsia(PE group)and 30 healthy pregnant women(control group).The 60 patients with PE were divided into severe PE group(n=30)and mild PE group(n=30)according to the severity of the disease.Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)was used to determine the serum concentrations of PAPPA-A and VEGF.The correlations between the expression of serum PAPPA-A,VEGF and the severity of the disease were analyzed.ResultsThe newborn birth weight of the severe PE group[(3.4±0.5)kg]were less than that of the mild PE group[(3.6±1.4)kg]and control group[(3.7± 0.5)kg],and the differences were statistically significant(P＜0.05).The serum levels of PAPPA-A,VEGF and 24 hours urinary protein in the severe PE group[(900.6±379.0)μg/ml,(7.2±4.2)pg/ml,(2.5±1.2)g/24 h]and the mild PE group [(783.8±204.7)μg/ml,(5.3±1.4)pg/ml,(1.4±0.3)g/24 h]were significantly higher than those in the control group [(592.9±222.9)μg/ml,(4.8±2.8)pg/ml,(0.2±0.1)g/24 h],P＜0.05.The serum level of PAPPA-A and the 24 hours urinary protein in the severe PE group were higher than those in the mild PE group(P＜0.05).Spearman′s correlation analysis showed that the serum level of PAPPA-A was positively correlated with the serum concentration of VEGF(P＜0.05). ConclusionPAPPAand VEGF are involved in the occurrence and development of preeclampsia.

Preeclampsia(PE);Pregnancy-associated plasma protein-A(PAPP-A);Vascular endothelial growth factor(VEGF);Correlation

R714.24+5

A

1003—6350（2016）02—0226—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.02.018

2015-08-20)

上海市浦東新區衛計委青年科技項目(編號：PW2013B-10)；上海市浦東新區衛計委重點學科資助項目(編號：PWZX2014)；上海市青年醫師培養資助計劃項目

戴海燕。E-mail：daihaiyan@hotmail.com