口服益生菌促進兒童早期齲損再礦化臨床研究

肖梅

（西安邊防學院門診部，陜西西安710108）

口服益生菌促進兒童早期齲損再礦化臨床研究

肖梅

（西安邊防學院門診部，陜西西安710108）

目的探討口服益生菌促進兒童早期齲齒再礦化的作用。方法將2013年12月至2015年1月在我院就診的早期齲損病變患兒49例按隨機數字表法分為試驗組24例和對照組25例，兩組均采用含氟牙膏刷牙，試驗組和對照組分別口服三聯活菌膠囊和安慰劑，3次/d，療程12周，分別在治療前及治療后采用定量光導熒光技術(QLF)觀察熒光輻射率(F)和病損面積(A)。結果治療前試驗組和對照組患兒的F值和A值分別為(7.71±1.92)%、(7.94±2.33)mm2和(0.29±0.38)%、(0.26±0.41)mm2，組間比較差異無統計學意義(P＞0.05)；治療后試驗組和對照組患兒的F值分別下降(-0.81±1.52)和(0.05±0.32)，試驗組優于對照組，差異有統計學意義(P＜0.05)，而A值下降相近，組間比較差異無統計學意義(P＞0.05)。結論口服益生菌有利于早期齲損部位再礦化，但與安慰劑比較暫未見明顯優勢，益生菌種類和療程需要進一步探索。

益生菌；變異鏈球菌；齲齒；再礦化

齲齒(Dental caries)是牙釉質在持續酸性條件下脫礦和再礦化交替進行的化學動力過程，研究證實早期齲變能夠通過脫礦組織的再礦化達到不同程度的“愈合”[1]，因此再礦化成為齲病研究的熱點，目前最主要和最有效的途徑是局部氟化物使用。Hillman等[2]在2007首次提出采用益生菌改變和維持宿主口腔的微生物菌落平衡能有效預防和治療齲齒，后續國外眾多研究證實益生菌療法對學齡前兒童齲齒預防和老年人根部齲變都有肯定的效果，為齲齒等口腔疾病防治提供了新的思路[3-4]，而國內在這方面開展的工作較少。本研究嘗試定量光導熒光技術(Quantitative Light induced Fluorescence，QLF)評價口服益生菌對早期齲變的再礦化效果，為臨床決策提供更充分的依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料招募2013年12月至2015年1月在我院口腔科門診就診的患兒49例，入選標準：①年齡10～17歲，性別不限；②切牙、尖牙或前磨牙牙釉質表面可見早期齲損病變；③患兒監護人了解研究內容，愿意配合隨訪并簽署知情同意書。排除標準：①經常食用含有乳酸桿菌的食品或飲料；②需要定期服用藥物的慢性病患兒；③有煙酒嗜好；④近一周內服用過抗生素。本研究經我院醫學倫理委員會審核并通過，符合標準的患者按隨機數表法分為試驗組24例和對照組25例。

1.2 治療藥物試驗藥為雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、腸球菌三聯活菌膠囊(商品名：培菲康，0.21 g/粒，國藥準字S10950032，上海信誼藥廠有限公司)，0.21 g/片；對照藥為安慰劑，外形、氣味、口感與培菲康一致，但不含有活性成分，由江蘇美通制藥有限公司惠贈。試驗期間所有患兒均采用成人含氟牙膏刷牙，早晚各一次，刷牙后半小時服用藥物，3次/d，治療12周，試驗期間不允許使用其他含氟的藥物或用品。

1.3 效果評價QLF系統(Inspektor公司，荷蘭)，使用QLF儀器的探頭分別對患齒的待檢測區域進行掃描，拍攝所需的圖像并存儲，盲態下由專人使用專用的QLF2.00g分析軟件對病損區進行評價，得出每次檢查的F(熒光輻射率)、A(病損面積)，在治療前和治療12周后分別評價。

1.4 依從性評價患兒入組時均發放168粒試驗藥物，試驗結束時將剩余藥物帶回，根據剩下藥物的15%、25%或50%量評定為“好”、“中”、“差”，同時患兒及其監護人可以隨時與研究者聯系報告不良反應發生情況。

1.5 統計學方法應用SPSS19.0統計學軟件對數據進行分析。計量資料使用“K-S”檢驗作正態性檢驗，符合正態分布的數據以均值±標準差(±s)表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗；非正態性分布數據以中位數(四分位間距)表示，組間比較采用Kruskal-Wallis檢驗；計數資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，均以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 一般情況試驗過程中試驗組和對照組分別有1例和2例患者未按時復診，2例和1例患者QLF圖片質量較差，無法讀取結果，數據均不納入分析。兩組患兒的年齡、性別等人口學資料和病情、依從性等組間比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，見表1。

表1 兩組人口學及病情資料比較（例）

2.2 治療效果治療前兩組患兒的F值和A值比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，治療后試驗組F值明顯下降，前后差值大于對照組，差異有統計學意義(P＜0.05)，而A值治療后組間比較則差異無統計學意義(P＞0.05)，見表2。

表2 兩組治療前后QLF評價(±s)

表2 兩組治療前后QLF評價(±s)

組別F值(%)A值(mm2)治療前治療后差值治療前治療后差值試驗組對照組t值P值7.71±1.92 7.94±2.33 6.79±2.54 7.88±2.63 0.87 0.42 -0.81±1.52 0.05±0.32 4.94 0.02 0.29±0.38 0.26±0.41 0.22±0.47 0.23±0.35 1.03 0.38 0.05±0.82 0.01±0.39 2.48 0.13

3 討論

某些致病微生物在口腔中的過度生長往往會導致口腔疾病如齲齒、牙周炎和口臭的發生，其中變異鏈球菌是目前公認的主要致齲菌，該菌不僅具有較強的產酸耐酸性，而且能夠利用蔗糖產生不溶性胞外多糖，進而促進菌落在牙齒表面聚集，形成牙菌斑生物膜，最終導致齲變[5]。隨著益生菌療法在治療胃腸道感染疾病方面的優勢越來越明顯，這種治療方式也逐漸應用到口腔醫學領域，Caglar等[6]研究表明，在3周內連續飲用含有羅伊氏乳桿菌的水或口服羅伊氏乳桿菌片劑均能夠有效地減少試驗對象唾液中的齲齒致病菌變異鏈球菌的數量，進而降低齲病的風險。Campus等[7]的研究也表明，對齲齒高風險的學齡前兒童連續6周服用短乳酸桿菌能減少菌斑的產酸能力和唾液變異鏈球菌的計數，目前證據均支持益生菌可以抑制齲病致病菌的繁殖，從而達到防治齲齒的目的。

早期齲損可出現在牙釉質的表層，肉眼觀察與正常釉質無明顯差異，而且由于早期齲損尚未空洞化，無法進行材料充填，最理想的治療方法是促使組織再礦化[8]。齲損部位再礦化是指已經脫礦的組織內礦物質的重新沉淀并且結晶化，氟離子(F-)能幫助牙釉質羥基磷灰石(HAP)結晶的沉積和生長，提高HAP熱力學穩定性，起到促進礦化和再礦化的效果，而準確和簡便的檢測手段是早期處理的基礎。QLF可以通過探測釉質脫鈣來診斷初期齲，是一種評價未成空洞改變的牙釉質礦物質輕微改變的可靠方法[9]，由于該技術能檢測到亞臨床的改變，有助于縮短研究間期和減少病例樣本量，因此研究費用相應降低。

本研究嘗試性地探索益生菌的補充能否影響牙釉質的礦物質含量，結果表明3個月的益生菌療法有利于促進早期牙釉質齲損部位的再礦化進程，熒光輻射率的改變較安慰劑明顯增加，但病變面積的改變并不顯著，可能與治療時間偏短有關，隨著時間的推移病變面積的大小應會出現變化[10]；也可能與本研究檢驗效能可能不足有關，由于早期招募患者比較困難，本研究樣本量較少，而且兩組均有部分患兒未能按時復診或檢查結果無法讀數，都可能對研究結論產生影響。益生菌在口腔的起效原理目前尚未完全明晰，一般認為其通過細菌素沉淀和競爭性抑制起作用[11]。益生菌的補充有利于控制口腔生物膜的酸性環境，在一定程度上抵消齲齒形成過程中嗜酸菌的過度生長，促進齲齒損傷的牙釉質表面再次礦物質化，同時益生菌對全身的免疫功能調節作用也值得重視，其細胞壁的主要成分是多糖、脂磷壁酸和肽聚糖，是益生菌對宿主發揮其免疫調節作用的物質基礎[12-13]。

益生菌預防和治療齲齒目前尚處于起步階段，還有很多不足之處或疑問同樣值得重視：①合適的益生菌種目前尚未達成共識：合適的益生菌不僅要能夠抑制變異鏈球菌等菌種的生長，還需要具有一定的合成胞外多糖的能力，有助于口腔益生菌的自聚集或與其他微生物聚集，此外對其耐受溶菌酶、過氧化氫和殘留抗生素的能力有一定要求。因此部分學者們傾向于從人體自身篩選出益生菌。Simark-Mattsson等[14]從健康人的口腔中篩選出23株能抑制變形鏈球菌生長的乳桿菌，并指出其中干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)、植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnosus)的抑菌效果最好。我國學者楊娟等[15]自行研究分離出Y29發酵乳桿菌菌株，該菌能夠抑制變異鏈球菌的生長，并有自聚集和與其他口腔微生物共聚集形成生物膜的能力，還可以耐受1.0 mg/ml溶菌酶和140 μg/g過氧化氫，具有很好的應用前景。②如何選擇合適的益生菌載體：在治療口腔疾病中，不僅乳酸菌菌種的選擇很重要，不同類型的治療方法也同樣重要，因為只有使用簡單而實用的治療方法才能更好地預防和治療口腔疾病，如漱口水就是一種較好的選擇，此外牙膏、口香糖等介質為也是目前研究的方向。③盡管益生菌治療齲齒的作用已經得到很多研究證實，但到目前為止美國、歐盟等國仍未對上述作用給予證實批準，臨床上不可將益生菌療法作為齲齒主要或唯一的治療手段，以致延誤病情。

綜上所述，口服益生菌有利于早期齲損部位再礦化，但與安慰劑比較暫未見明顯優勢，益生菌種類和療程需要進一步的研究探索。

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R781.1

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1003—6350（2016）02—0310—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.02.049

2015-08-25)

軍隊齲病防治研究全軍“十五”重點課題2000-2005年（編號：012089）

肖梅。E-mail：xiaomqa@163.com