龍血樹組織培養和快速繁殖

胡如芳 曾建國 吳雪松 周青 賀瓏 周琴 郭逸榴

（吉安市林業科學研究所 江西吉安 341000）

龍血樹組織培養和快速繁殖

胡如芳 曾建國 吳雪松 周青 賀瓏 周琴 郭逸榴

（吉安市林業科學研究所 江西吉安 341000）

本文通過科學的實驗和嚴謹的分析來研究劍葉龍血樹組織培養和快速繁殖。

龍血樹；組織培養

龍血樹（拉丁學名：Dracaena），為百合科、龍血樹屬植物。亞灌木、灌木或喬木。葉長劍形，有短葉柄，葉面常具各種斑點和條紋，葉密生頂枝，約40種，分布于亞洲和非洲的熱帶與亞熱帶地區。我國有5種，產南部，屬國家二級瀕危保護植物。性喜高溫多濕、陽光充足的環境，但對光照的適應范圍較廣，十分耐蔭。生長溫度為15～30℃，一般安全的越冬溫度要在5℃左右，對土壤要求不嚴。龍血樹具有重要的觀賞價值，株形整齊，莖干挺拔，葉形葉色多姿多彩，中、小盆花可點綴書房、客廳和臥室，為現代室內裝飾的優良，名貴觀葉植物。

1 材料和方法

1.1 外植體

在取龍血樹的外植體之前，先對龍血樹的整棵植株進行消毒處理，方法是用1g/L的70％甲基托布津可濕性粉劑水溶液進行噴灑，每隔3d噴一次，看到植株及盆土淋濕為止，連續噴灑3次。選取接種材料為優良的腋芽或頂芽和莖段作為外植體。

1.2 外植體的消毒

外植體采集前控制水分、淋殺菌劑的預處理方法可降低材料的污染率，提高誘導的成功率。把取來的外植體在自來水上沖洗干凈后，在加有少量洗潔精的水中浸泡5min，自來水沖洗20min，再用75％的乙醇浸泡30s，隨后用無菌水沖洗3～4次，再放在飽和漂白粉水中消毒10min，無菌水沖洗4～5次；最后在0.1％升汞中消毒4min，用無菌水沖洗5次。在無菌條件下，借助手術刀，將消過毒的材料（用無菌濾紙吸干水分），切成0.5cm大小備用。

1.3 試驗方法

1.3.1 M S培養基的配方與配制方法

在 實 驗 過 程 中 ， 大 量 元 素 ：KNO3、NH4NO3、MgSO47H2O、KH2PO4、CaCl22H2O，大量元素按照擴大20倍來配制母液。微量元素：MnSO44H2O、ZnSO47H2O、H3BO3、KI、Na2MoO42H2O、CuSO45H2O、CoCl26H2O，微量元素母液擴大100倍。鐵鹽：Na2-EDTA、FeSO47H2O；有機物質：肌醇、甘氨酸、鹽酸硫胺素（VB1）、鹽酸吡哆醇（VB6），鐵鹽和有機物質也是按照擴大100倍來配制母液。

1.3.2 植物生長調節劑的配制

6-BA（母液）：濃度為1mg/mL（溶于少量1mol/L鹽酸后以蒸餾水定容）；NAA（母液）：濃度為1mg/mL（先用少量95％乙醇溶解后以蒸餾水定容）。

2 實驗結果和分析討論

2.1 初代培養

把消過毒后的材料接種于誘導培養基上，外植體培養15d后，外植體邊緣開始萌動出現愈傷組織，長勢快；初代培養30d后愈傷組織為顆粒狀，繼續培養，顆粒狀的組織最終形成叢生的小芽。將叢生的小芽和嫩綠色的愈傷組織轉接到誘導培養基。培養基的配方為：MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.5mg/L的培養基。

2.2 增值、繼代培養基篩選結果

經實驗結果得出結論，培養基中添加不同濃度的6-BA對芽的增殖影響很大，同時還影響芽的分化、增殖、伸長和生長。隨著濃度升高增殖倍數也在增加，芽的長度則表現為隨濃度升高而降低。當6-BA增加的濃度達到一定值，如達到2.5mg/L時，芽的生長開始表現不正常，部分出現玻璃化現象。在接種芽數一定的情況下，隨著6-BA濃度的增加，增殖芽樹在不斷的增加，增殖的倍數也在增加，但是平均的芽長在逐漸的減少。

2.3 根誘導培養基篩選結果

以1/2MS培養基為基本培養基，分別加入NAA 0.5mg/L、IBA 0～1.0mg/L的植物生長調節劑，將增殖獲得的叢生芽剪切成約2cm的莖段，接種于6種不同生根培養基上，每種培養基各接種20瓶，每瓶接種10株。接種約4周開始生根，30d后統計芽苗出根情況。以上培養基都添加蔗糖30.0g/L，瓊脂0.8％，活性炭0.1％，pH5.5。

3 結論

通過用龍血樹的頂芽或腋芽、莖段作外植體，建立了龍血樹的組織培養和再生體系。結果表明：龍血樹腋芽、頂芽或莖段誘導愈傷組織的最佳培養基為MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L，誘導率達95％。選擇MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.2mg/L+30g/L的蔗糖+8g/L瓊脂培養基有利于壯芽；選擇MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.2mg/L+30g/L的蔗糖+8g/L瓊脂培養基有利于芽增殖繼代；培養45d左右，每個外植體分化形成的再生小植株數達8～20個；在1/2MS+IBA 0.4mg/L+NAA 0.2mg/L+活性炭0.1％的培養基中誘導生根效果最好。

[1]靳靜晨，卜 媚，羅雪楓，陳雄進，譚家壯.A tissue culture technique for rapid propagation of Dracaenacambodiana Pierre ex Gagnep.廣西農業科學，2010，41（8）：755～757.

[2]何旭君，劉善輝，馮遠來，林曉萍，張華通.海南龍血樹組織培養快速繁殖技術研究.廣東林業科技，2006，22（1）：22～25.

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2016-11-13