兩種國產降鈣素原試劑性能比較

岑偉明，梁寶環

(東莞康華醫院，廣東東莞 523080)

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·臨床研究·

兩種國產降鈣素原試劑性能比較

岑偉明，梁寶環

(東莞康華醫院，廣東東莞 523080)

摘要:目的對兩種國產降鈣素原試劑進行準確度及精密度等性能指標的比較，確定兩種試劑的優劣。方法收集臨床標本，分別使用三種試劑進行平行檢測，并記錄結果。采用SPSS 19.0分別進行一元線性歸、秩和檢驗、卡方檢驗來統計兩種國產試劑與進口試劑的臨床定量檢測結果的相關性。結果試劑A與羅氏試劑的整體相關性良好，但兩者結果偏差較小，在3個臨界值下的兩者的診斷結果一致性較好；而試劑B與羅氏試劑的整體相關性良好，但兩者結果偏差較大，試劑B的結果偏高，在臨界值為0.5 ng/mL時，兩者的診斷結果一致性較差。兩者的重復性及批間精密度均符合試劑說明書要求，試劑B比試劑A的精密度略為優秀，但無太大差別。結論試劑A與羅氏試劑的比對結果良好，整體結果比試劑B優秀。

關鍵詞:降鈣素原；性能比對；準確性

降鈣素原(下簡稱PCT)正常情況下由甲狀旁腺C細胞產生，正常情況下含量極低，通常小于0.1ng/ml。當發生嚴重感染并有全身表現時，PCT水平明顯升高，最高可達5 000倍[1]。此時PCT大部分來源于甲狀腺以外器官的巨噬細胞，單核細胞，它們對細菌感染的反應表現為PCT的合成與釋放，因此PCT的升高程度與感染程度成正相關趨勢。在臨床上一般將PCT檢測結果分為4個等級，即<0.5、0.5～2.0、2.0～10.0、≥10.0 ng/mL[2]，根據臨床文獻報道，若患者PCT值≥0.5 ng/mL時，即為陽性閾值[3]。一般認為在呼吸道感染中，PCT>0.5 ng/mL強烈推薦使用抗生素，PCT>0.25 ng/mL可根據情況使用抗菌藥物治療，PCT<0.1 ng/mL停止抗菌藥物治療[4]，PCT對于臨床早期合理應用抗生素有著極其重要的作用；此外，PCT還可以用來判斷治療的有效性、疾病的嚴重程度和預后[5]，故PCT試劑的準確性對臨床的診斷至關重要。

我科檢測PCT采用羅氏電化學發光法(Elecsys BRAHMS PCT，羅氏公司)，有著快速(18分鐘出結果)，結果準確的優勢，但由于需要用到大型精密儀器(羅氏Elecsys E170)，成本昂貴，并且由于種種原因導致無法實現24小時不間斷報告。目前我科考慮轉用國產POCT的試劑以彌補這些劣勢，現在有兩種試劑待選，分別是方法學為熒光素增強免疫化學發光法的試劑A和方法學為免疫熒光層析法的試劑B。現對兩種國產試劑與進口羅氏試劑進行臨床結果比對試驗，以確認試劑的性能是否能滿足要求。

1材料與方法

1.1比對試驗標本來源收集2014年6月26日至2014年7月11日的本院降鈣素原標本95例作為試劑A與羅氏的比對測試標本，同時收集2014年6月20日至2014年7月5日本院的降鈣素原標本120例作為試劑B與羅氏的比對測試標本；采集血清進行檢測。

1.2精密度試驗標本來源收集數份上述血清經過濾混合調配出兩種濃度的血清樣本，經羅氏PCT試劑測定結果為1.72和78.24 ng/mL，每份樣本分裝為21管，其中1管分裝1.5 mL，用作重復性比對試驗；剩余20管每管分裝200 μL，置于-20 ℃冰箱保存。

1.3試劑與儀器羅氏Elecsys BRAHMS PCT試劑，方法為電化學發光法，使用羅氏Elecsys E170全自動電化學發光分析儀進行檢測；試劑A，方法為熒光素增強免疫化學發光法，使用配套儀器進行檢測；試劑B，方法為免疫熒光層析法，使用配套儀器進行檢測。

1.4方法

1.4.1臨床結果比對收集臨床標本，分別使用三種試劑進行平行檢測，并記錄結果。采用SPSS19.0分別統計兩種國產試劑與進口試劑的臨床定量檢測結果的相關性，使用SPSS一元直線回歸分析，以相關系數(r2)>0.95，P<0.05表示其相關性良好；偏差分析采用配對秩和檢驗。應用配對卡方檢驗和Kappa一致性檢查三者的臨床診斷結果的一致性，以卡方檢驗P>0.05，kappa值大于0.75表示一致性較好。以羅氏PCT的結果作為標準，分別計算試劑A與試劑B的PCT檢測結果的相關性和偏差，并分別以0.5、2.0、10.0 ng/mL為臨界值，計算兩種方法的特異性指標。

1.4.2精密度(1)重復性比對：使用兩種國產試劑分別對高低兩個濃度的混合血清進行測定20次重復測定，計算兩種試劑的精密度，按兩者試劑說明書要求，不精密度應小于等于10%；(2)批間精密度比對：使用兩種國產試劑分別對兩個濃度的混合血清進行測定測定，每天測定1次，測定20 d，計算兩種試劑的批間精密度，按兩者試劑說明書要求，不精密度應小于等于15%。

2結果

2.1線性關系分析從臨床結果驗證整體數據所得的線性回歸方程來看，試劑A與羅氏的PCT檢測數據有線性關系，回歸方程為Y=0.805X+0.495(r2=0.975、P<0.05)，提示兩者相關性良好，無統計學上的顯著差異；試劑B與羅氏的PCT檢測數據也存在線性關系，回歸方程為Y=1.705X-0.027(r2=0.983、P<0.05)，提示兩者相關性良好，無統計學上的顯著差異。秩和檢驗的結果中，試劑A與羅氏兩者數值偏差較小，Z值為-0.960，P=0.337>0.05提示兩者的偏差無統計學意義；試劑B比羅氏結果偏高，Z值為-9.195，P=0.000<0.05提示兩者的偏差較大，統計學上有顯著性差異。

2.2一致性分析以羅氏PCT的結果為標準，試劑A的PCT檢測結果在3個臨界值下的P值分別為0.375、0.500、1.000；Kappa值分別為0.894、0.939、1.000；提示兩種試劑盒對臨床診斷具有較好的一致性。而試劑B的PCT檢測結果在3個臨界值下的P值分別為0.000、0.125、1.000；Kappa值分別為0.787、0.848、1.000；提示兩者在臨界值為0.5 ng/mL時，兩者的診斷結果一致性較差，而臨界值在2和10 ng/mL時，兩者的診斷結果一致性較好。

2.3重復性試驗計算得出試劑A的低濃度水平的不精密度為5.29%，而試劑B的不精密度為4.03%；而試劑A的高濃度水平的不精密度為2.18%，而試劑B的不精密度為2.21%，兩者的重復性結果均符合試劑說明書要求，而本次試驗中低濃度水平試劑B的重復性比試劑A結果略為優秀，高濃度水平則幾乎一致。

2.4批間精密度試驗計算得出試劑A的批間不精密度為9.94%，而試劑B的批間不精密度為9.12%；而試劑A的高濃度水平的批間不精密度為4.34%，而試劑B的批間不精密度為3.42%，兩者的批間精密度結果均符合試劑說明書要求，而本次試驗中高濃度水平試劑B的重復性比試劑A結果略為優秀，低濃度水平則幾乎一致。

3討論

PCT由于可以及時準確地反映患者機體受細菌感染的情況來指導臨床用藥，另一方面可以起到及時停止用藥，減輕患者經濟負擔的作用，有著重要的臨床價值及社會效益。因此，檢測結果準確性顯得非常的重要，必須合理選擇正確的試劑。目前檢驗科檢測PCT常用的化學發光法試劑大都需要大型的進口精密儀器及配套進口試劑，使用和儀器維護成本昂貴，增加患者的經濟負擔，而且其對檢驗場所環境、操作人員均有著較為嚴格的要求，故很難達到臨床快速檢測的要求。因此國產POCT試劑應運而生，其成本低廉，簡易輕便的操作特性使其可以實現床旁檢測，可以大大縮短的臨床標本的周轉時間(TAT)，滿足臨床的需求。但由于POCT往往采用的是半自動的儀器分析，需要人工手動進行前處理、加樣及反應，結果十分容易受到人員因素影響，而且由于種種原因目前國產試劑質量良莠不齊，為保證結果質量，在投入使用前必須進行性能驗證，結果合格才能開始使用。

本文使用了兩種國產試劑分別與進口試劑進行平行檢測，從結果中可以發現試劑A與羅氏試劑的整體相關性良好，但兩者結果偏差較小，在3個臨界值下的兩者的診斷結果一致性較好；而試劑B與羅氏試劑的整體相關性良好，但兩者結果偏差較大，試劑B的結果偏高，在臨界值為0.5 ng/mL時，兩者的診斷結果一致性較差，在PCT結果濃度較低時，容易造成誤診，誤導臨床用藥，產生不良后果。兩者的精密度試驗比對結果均能滿足試劑說明書要求，相對來說試劑B的精密度要比試劑A要略為優秀，但二者并無太大差別。從整體上來說，試劑A與羅氏試劑的比對結果良好，整體結果比試劑B優秀，且試劑及儀器的維護成本較低，在一定程度上既滿足了臨床快速檢測的需求，同時在較大程度上降低了檢驗費用，減輕了患者負擔，有較大的臨床應用價值。

參考文獻

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[3]常春，姚婉貞，陳亞紅，等．血清降鈣素原對慢性阻塞性肺疾病加重期患者下呼吸道細菌感染的診斷價值[J]．北京大學學報:醫學版，2006，38(4)：389-392．

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(收稿日期：2016-01-05)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.08.039

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)08-1108-02