乙肝兩對半定量、乙肝DNA定量與乙肝前S1抗原聯合檢測的臨床意義

王碧玉，黃燕妮

(1.海南省農墾三亞醫院檢驗科，海南 三亞 572000；2.海南醫學院熱帶醫學與檢驗醫學院，海南 海口 570102）

乙肝兩對半定量、乙肝DNA定量與乙肝前S1抗原聯合檢測的臨床意義

王碧玉1，黃燕妮2

(1.海南省農墾三亞醫院檢驗科，海南 三亞 572000；2.海南醫學院熱帶醫學與檢驗醫學院，海南 海口 570102）

目的 探討臨床聯合檢測乙肝兩對半定量、乙肝DNA定量與乙肝前S1抗原（Pre-S1）對乙肝患者的診斷和預后的臨床意義。方法選取2013年1月至2015年1月海南省農墾三亞醫院收治的乙肝患者120例作為研究對象，空腹抽取靜脈血液，采用酶聯免疫吸附法及定量法對乙肝Pre-S1、乙肝兩對半定量檢測，采用熒光定量PCR法對乙肝病毒DNA(HBV-DNA)定量檢測。結果經檢測，乙肝Pre-S1陽性率與HBV-DNA陽性率在不同乙肝兩對半的模式下比較差異均無統計學意義(P＞0.05)；在55例HBeAg陽性患者中，乙肝pre-S1陽性檢出率為81.8% (45/55)，HBV-DNA陽性檢出率為72.7%(40/55)，兩者陽性檢出率比較差異無統計學意義(P＞0.05)。結論臨床選擇乙肝兩對半定量、乙肝DNA定量與乙肝Pre-S1進行聯合檢測，能夠更好地反映乙肝患者的疾病進展與預后，值得臨床推廣應用。

乙型肝炎病毒；乙肝病毒前S1抗原；HBV-DNA；診斷價值

乙型病毒性肝炎又稱乙肝，是機體被乙型肝炎病毒(HBV)感染后引起的疾病。乙型肝炎病毒主要存在于肝細胞中，會對其產生嚴重損害，致使肝細胞發生炎癥、壞死、纖維化等[1]。目前我國乙肝病毒攜帶率約為7.18%[2]，且有三分之一的患者表現為活動性乙型肝炎或肝硬化，因此，對乙肝患者進行早期診斷具有非常重要的意義。臨床上，乙型肝炎病毒共有3對免疫學標記，分別為表面抗原(HBsAg)、表面抗體(HBsAb)；e抗原(HBeAg)、e抗體(HBeAb)；核心抗原(HBcAg)與核心抗體(HBcAb)。但是，核心抗原在血液檢測中通常不會被檢出，因此只有兩對半抗原抗體能夠被檢出，臨床上又稱其乙肝兩對半[3-4]。乙肝病毒復制的另一個指標為前S1抗原，并且乙肝病毒在感染人體后機體最早進行的免疫應答就是針對的前S1抗原，進而該抗原能夠起到早期診斷的作用[5]。本文旨在探討臨床聯合檢測乙肝兩對半定量、乙肝DNA定量與乙肝前S1抗原對乙肝患者診斷和預后的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年1月至2015年1月海南省農墾三亞醫院收治的乙肝患者120例作為研究對象，所有患者均符合全國病毒性肝炎學術會議制定的診斷標準[6]。納入標準：(1)符合全國病毒性肝炎學術會議制定的診斷標準；(2)簽署知情同意書。排除標準：(1)其他原因引起的肝炎疾病；(2)合并惡性腫瘤、血液系統疾病及免疫系統疾病者。120例乙肝患者中，男性68例，女性52例，年齡18～72歲，平均(37.9±7.5)歲。本研究已獲得我院相關倫理委員會的批準與通過，所有受試患者均簽署了知情同意書。

1.2 方法 所有患者在入院后由醫院相關人員進行詳細的個人基本信息及相關病史等情況的記錄，然后進行臨床相關檢查、化驗等，同時根據患者的實際病情給予相應的對癥治療。所有患者在入院后的第2天清晨空腹抽取靜脈血液3 mL，于離心機中進行離心10 min，取上清置于-20℃冰箱備用。乙肝前S1抗原與乙肝兩對半的檢測采用酶聯免疫吸附法及定量法，檢測儀器為Multiskan MK3酶標儀，儀器由美國Abbott公司生產，試劑盒由威海威高生物科技有限公司提供，所有操作步驟按照說明書嚴格進行。HBV-DNA的測定采用熒光定量PCR法，檢測儀器為熒光定量PCR檢測儀，由德國Roche公司生產，試劑盒由深圳匹基生物工程公司提供，所有操作步驟按照說明書嚴格進行。

1.3 診斷標準 HBsAg、HBsAb及HBeAg：標本OD值≥COV為陽性；HBeAb與HBcAb：標本OD值＜COV為陽性[7]。HBV-DNA＞500 copies/ml為陽性。

1.4 統計學方法 應用SPSS17.0統計軟件進行數據分析，計數資料及率的比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 不同乙肝兩對半模式HBV-DNA陽性率與乙肝前S1抗原陽性率的比較 經檢測，乙肝前S1抗原陽性率與HBV-DNA陽性率在不同乙肝兩對半的模式下比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，見表1。

2.2 HBeAg與HBV-DNA、乙肝前S1抗原對乙肝患者的診斷 在55例HBeAg陽性患者中，乙肝前S1抗原陽性檢出率為81.8%，HBV-DNA陽性檢出率為72.7%，乙肝前S1抗原檢出率與HBV-DNA陽性檢出率比較無明顯變化，差異無統計學意義(P＞0.05)，見表2。

表1 不同乙肝兩對半模式HBV-DNA陽性率與乙肝前S1抗原陽性率的比較[例（%）]

表2 HBeAg與HBV-DNA、乙肝前S1抗原對乙肝患者的診斷[例（%）]

3 討 論

在感染性疾病中乙型肝炎感染呈現出世界性流行，全球不同地區乙型肝炎感染的流行強度存在較大差異，乙型肝炎在我國具有較高的發病率，據相關報道顯示，我國目前乙肝感染率高達7%以上[8]。據世界衛生組織報道，全球每年約有100萬人死于HBV感染引發的肝硬化、肝衰竭等疾病[9]。乙型肝炎病毒主要存在于肝細胞中，在肝細胞中定居復制，其中肝功能異常是乙肝患者發病時的常見表現，乙型肝炎的肝外損傷主要是由免疫復合物導致，通過使血清樣發生病變，進而免疫復合物于血管壁及關節腔滑膜處進行沉積，同時使補體得到激活[10-11]。為了延緩乙肝病毒對肝細胞的損害，因此臨床上對乙肝患者進行早期診斷，并及時給予患者相應的治療方案對患者預后具有非常重要的意義。

乙肝病毒主要是由環狀雙鏈DNA、DNA聚合酶、核心抗原及e抗原共同合成，其中檢測患者是否患有乙肝傳染性最為有效的指標之一即為檢測血清中的HBV-DNA。因此，通過檢測乙型肝炎患者血清中的抗原、抗體是一種能夠達到預防該疾病受到感染的重要方式。目前臨床上診斷HBV感染的最直接，且特異性強、靈敏度高的指標即為HBV-DNA的檢測，其中HBV-DNA檢測呈陽性則表明HBV復制，具有傳染性。病毒復制越厲害，傳染性越強，則HBV-DNA越高[12-13]。在病毒侵入肝細胞過程中，乙肝前S1蛋白起到了非常重要的作用，病毒附著于肝細胞上之后，其中最容易受到介導、感染以及影響的部分即為乙肝S前區S1蛋白的氨基酸(AA)21～47片段，該完好區域只要受到變異病毒的接觸就會具有傳染性[14]。機體內含有乙肝前S1蛋白主要于Dane顆粒與管型顆粒上，在病毒感染、裝配、復制以及刺激機體產生免疫反應等方面，乙肝前S1蛋白均起到非常重要的作用[15-16]。此外，在人體中，前S區的前S抗原也是最早出現在血清中的抗原，因此，當血清中檢測出乙肝前S1蛋白陽性，這就表示患者的HBV已經受到了感染，并且病毒已經成功進行了復制。臨床上，乙型肝炎病毒共有3對免疫學標記，分別為表面抗原(HBsAg)、表面抗體(HBsAb)；e抗原(HBeAg)、e抗體(HBeAb)；核心抗原(HBcAg)與核心抗體(HBcAb)。但是，核心抗原在血液檢測中通常不會被檢出，因此只有兩對半抗原抗體能夠被檢出，臨床上又稱其乙肝兩對半。其中HBeAb表示乙肝病毒復制活躍，具有較強的傳染性，通過與其進行密切接觸則具有較大被傳染的可能性[17]。

本研究中，在不同乙肝兩對半的模式下乙肝前S1抗原陽性率與HBV-DNA陽性率比較差異無統計學意義(P＞0.05)，這就表明兩種方法都能夠準確的對HBV-DNA與乙肝前S1抗原的陽性情況進行檢測，HBV-DNA與乙肝前S1抗原都能夠對HBV的復制情況進行真實反映。在55例HBeAg陽性患者中，乙肝前S1抗原陽性檢出率為81.8%，HBV-DNA陽性檢出率為72.7%，乙肝前S1抗原檢出率與HBV-DNA陽性檢出率比較差異無統計學意義(P＞0.05)，這就表明無論HBeAg陽性還是陰性，都有可能存在病毒的復制。與目前臨床報道較為一致[18]。

在本次臨床監測中，對于乙肝患者血清中的HBV-DNA檢測采用熒光定量PCR方法，該方法的優勢在于具有較高的特異性以及敏感性，且其檢測準確性與對患者前S1抗原及兩對半進行檢測的ELISA比較要高。在本文研究中，在不同乙肝兩對半的模式下，乙肝前S1抗原陽性率與HBV-DNA陽性率比較差異無統計學意義，但HBV-DNA診斷出的陽性率還是略高。然而，熒光定量PCR檢測的方法成本與技術難度都比較高，目前只能常見于我國的一些大中型醫院。我國是乙肝發生率較高的國家，很多地區醫療條件非常有限，因此，在一些條件受到限制的地區可采用ELISA方法進行乙肝檢測，該方式操作較為簡單，成本較低，且其檢測的特異性與敏感性與PCR相比差異并無統計學意義，能夠被廣大基層醫院應用推廣[19]。但是，對于一些有醫療條件的地區，本文認為可結合上述幾種方法進行共同檢測，這樣能夠有效的提高檢測的準確性，使臨床誤診率有效降低。因此，社區相關衛生組織應加強相關知識的宣教，加強相關疾病的保健指導，從根本上改變空巢老人對保健知識的認知，加強對保健知識科學性的思想認識。

綜上所述，臨床選擇乙肝兩對半定量、乙肝DNA定量與乙肝前S1抗原進行聯合檢測，能夠更好地反映乙肝患者的疾病進展與預后情況，值得臨床進一步推廣應用。

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R512.6+2

B

1003—6350（2016）07—1182—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.07.055

2015-10-28)

黃燕妮。E-mail：6163162@qq.com