瓜氨酸、腸型脂肪酸結合蛋白、腸三葉因子聯合檢測對兒童危重癥急性胃腸損傷的診斷價值

黎小年，謝蔓芳

(海南省婦幼保健院兒科，海南 海口 571100)

瓜氨酸、腸型脂肪酸結合蛋白、腸三葉因子聯合檢測對兒童危重癥急性胃腸損傷的診斷價值

黎小年，謝蔓芳

(海南省婦幼保健院兒科，海南 海口 571100)

目的 探討瓜氨酸、腸型脂肪酸結合蛋白(IFABP)、腸三葉因子(ITF)聯合檢測對兒童危重癥急性胃腸損傷(AGI)的診斷價值。方法選擇2014年9月至2015年8月在我院兒科住院治療的危重癥患兒100例，按患兒是否合并AGI分為觀察組(合并AGI)52例和對照組(未合并AGI)48例。比較兩組患者的瓜氨酸、IFABP、ITF、C反應蛋白(CRP)及降鈣素原（PCT）水平；并分析瓜氨酸、IFABP、ITF與CRP及PCT水平的相關性。結果觀察組患者的瓜氨酸水平顯著低于對照組[(15.08±8.84)μmol/L vs(25.07±12.05)μmol/L]，而IFABP[(1 373.38±410.55)ng/L vs (938.89±503.84)ng/L]、ITF[(14.51±4.90)ng/mLvs(9.79±4.82)ng/mL]、CRP[(60.65±21.08)mg/Lvs(28.12±10.13)mg/L]及PCT[(22.93±10.19)ng/mL vs（5.28±3.08)ng/mL]均顯著高于對照組，差異均有顯著統計學意義(P＜0.01)；瓜氨酸、IFABP及ITF三者聯合檢測對兒童危重癥AGI的診斷價值最高，其中敏感度為98.08%，特異度為95.83%，準確度為97.00%。根據Pearson法分析顯示，瓜氨酸與CRP及PCT均呈負相關(r=-0.661，-0.709；均P＜0.05），而IFABP和ITF與CRP及PCT無明顯相關性(r=0.108，0.201，0.097，0.113；均P＞0.05)。結論瓜氨酸與IFABP和ITF三者聯合檢測對危重癥AGI患兒的診斷具有較高價值，值得在臨床診斷過程中推廣應用。

瓜氨酸；腸型脂肪酸結合蛋白；腸三葉因子；兒童危重癥；急性胃腸損傷；診斷價值

胃腸道作為人類機體中最大的一個細菌庫，其在機體產生缺血及缺氧損傷時常被作為可犧牲器官，在早期時即可發生損傷，導致胃腸道的屏障功能損傷，并致使大量細菌異位，甚至進入血液循環過程中，從而引發醫院感染，并最終形成全身性炎癥反應。危重癥急性胃腸損傷(Acute gastrointestinal injury，AGI)患兒在臨床較為常見，若不盡早發現并進行早期治療，則可能直接危及患兒的生命安全，但目前臨床并無準確及簡便的監測指標以及時發現危重癥患兒的AGI癥狀[1]。國外有報道，瓜氨酸、腸型脂肪酸結合蛋白(Intestinal fatty acid binding protein，IFABP)以及腸三葉因子(Intestinal trefoil factor，ITF)等指標均與機體胃腸道的損傷具有一定的聯系[2]。但相關報道并未涉及三者與危重癥AGI患兒癥狀之間的關系。本文通過分析研究，旨在探索瓜氨酸、IFABP以及ITF三者對危重癥AGI患兒的診斷價值，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年9月至2015年8月在我院住院治療的危重癥患兒100例納入研究。入選標準：(1)年齡1個月～12歲；(2)根據《小兒危重病例評分法》1995年版[3]進行評價的分值＜80分；(3)入院時間＞48 h。排除標準：(1)有原發性胃腸道疾病者；(2)有慢性腎病者；(3)其他嚴重的心、肝等臟器的功能障礙者。按患兒是否合并AGI分為觀察組(合并AGI)52例和對照組(未合并AGI)48例。其中觀察組中男性30例，女性22例；年齡1個月～11歲，平均(5.14±1.03)歲；原發病位置：神經系統33例，呼吸系統15例，其他4例。對照組中男性28例，女性20例；年齡2個月～12歲，平均(5.09±0.98)歲；原發病位置：神經系統30例，呼吸系統13，其他5例。兩組患兒的臨床資料比較差異均無統計學意義(P＞0.05)。本次研究已通過醫院倫理委員會的審批，且所有患兒家屬均已知情同意。

1.2 AGI診斷標準[4](1)嘔吐；(2)胃潴留；(3)腹瀉；(4)消化道出血；(5)下消化道麻痹；(6)異常的腸鳴音；(7)腸擴張等癥狀。

1.3 檢測方法 所有患兒在入院24 h采集其橈動脈血4 mL，不同采血管保存后在室溫下靜置約30 min，4℃下行10 min的3 000 r/min離心，取上層血清置于-80℃下保存待測。利用高效液相色譜法對血清瓜氨酸水平進行檢測，將血清樣品經甲醇沉淀蛋白，再高速冷凍并離心，而后提取血清瓜氨酸，待自動衍生化之后通過超高效液相色譜實施分離，因瓜氨酸及內標正纈氨酸和血清樣品內其他物質在色譜柱保留性質差異而形成分離，所得化合物順序通過熒光檢測器，于230 nm的激發波長及450 nm的發射波長位置存在熒光吸收，相關信號得以記錄。計算信號響應強度強弱以檢測瓜氨酸濃度水平。利用ELISA法測定血清IFABP及ITF水平，相關試劑盒均購于深圳的晶美公司。按照試劑盒說明實施標準品稀釋和加樣，洗滌、顯色和終止，利用酶標儀檢測各孔的OD值，按標準品濃度水平和對應OD值算出曲線回歸方程，使用OD值在方程中計算對應ITF及IFABP濃度水平。

1.4 研究方法 比較兩組患兒的瓜氨酸、IFABP、ITF、CRP及PCT水平，將2012年歐洲危重病醫學會對AGI的定義作為診斷金標準[5]，比較相關指標在兒童危重癥AGI中的診斷價值，分析相關指標與CRP及PCT水平的相關性。

1.5 統計學方法 應用SPSS20.0統計軟件分析進行數據分析，計數數據比較采用χ2檢驗，計量數據以均數±標準差(±s)表示，組間比較采用t檢驗，以Pearson法進行相關性分析。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患兒入院時的瓜氨酸、IFABP、ITF、CRP及PCT水平比較 觀察組患兒的瓜氨酸水平顯著低于對照組，而IFABP、ITF、CRP及PCT水平顯著高于對照組，差異均有顯著統計學意義(P＜0.01)，見表1。

表1 兩組患兒入院時瓜氨酸、IFABP、ITF、CRP及PCT水平比較(±s)

表1 兩組患兒入院時瓜氨酸、IFABP、ITF、CRP及PCT水平比較(±s)

組別觀察組對照組t值P值例數52 48瓜氨酸(μmol/L) 15.08±8.84 25.07±12.05 4.752 0.000 IFABP(ng/L) 1373.38±410.55 938.89±503.84 4.743 0.000 ITF(ng/mL) 14.51±4.90 9.79±4.82 4.850 0.000 CRP(mg/L) 60.65±21.08 28.12±10.13 9.704 0.000 PCT(ng/mL) 22.93±10.19 5.28±3.08 11.520 0.000

2.2 相關指標在兒童危重癥AGI中的診斷價值 瓜氨酸、IFABP及ITF三者聯合檢測對兒童危重癥AGI的診斷價值最高，其中敏感度為98.08%，特異度為95.83%，準確度為97.00%，見表2。

表2 相關指標在兒童危重癥AGI中的診斷價值（%）

2.3 相關指標與CRP及PCT水平的相關性 根據Pearson法分析相關性可知，瓜氨酸與CRP及PCT均呈負相關(P＜0.05)，而IFABP和ITF與CRP及PCT無明顯相關性(P＞0.05)，見表3。

表3 相關指標與CRP及PCT水平的相關性(r值)

3 討 論

AGI主要是由危重癥患者因急性疾病所引發的一種胃腸功能障礙。國外有報道指出，AGI是多臟器功能不全(衰竭)等癥狀的關鍵誘因，其可加重其他相關器官損傷程度，并加速疾病的進展，致使危重癥患者的病死率上升，嚴重危害患者健康[6-7]。因此，盡早發現危重癥患者尤其是患兒的AGI癥狀對后續治療及預后的改善具有重要意義。但由于當前相關檢查手段缺乏簡便有效的實驗室診斷指標，尋找診斷價值較高的指標成為了重要課題。近年來，國外相關報道表明，瓜氨酸、IFABP以及ITF均可在一定程度上反映患者的胃腸損傷情況，具有潛在的診斷價值，但并無報道深入地分析三者聯合檢測對于胃腸損傷的應用價值[8]。

本文通過檢測危重癥AGI患者的瓜氨酸、IFABP以及ITF等指標的含量水平，結果發現，觀察組的瓜氨酸水平顯著低于對照組，而IFABP、ITF、CRP及PCT水平顯著高于對照組，提示存在AGI的危重癥患者機體瓜氨酸、IFABP、ITF、CRP及PCT等水平均出現明顯異常。原因在于瓜氨酸屬于非蛋白質氨基酸，其以谷氨酰胺作為前體物質，正常時可在小腸黏膜的上皮內獲得特異性合成，在危重癥患者產生胃腸損傷后，經小腸黏膜合成并進至血液循環的瓜氨酸含量明顯下降。IFABP特異性存在于機體腸黏膜纖毛中，可參與到長鏈脂肪酸的攝取和轉運，以及代謝等過程。若腸黏膜受損，致使通透性變大時則可被釋放進血液，導致濃度水平上升[9]。ITF通常可在胃腸道中得到大量表達，尤其在小腸絨毛的杯狀細胞基底膜處，其可保護與修復腸道上皮，在腸黏膜發生缺血及缺氧損傷后，ITF的水平隨之上升。而CRP是非特異性的一種急性炎癥標志物，PCT是診斷及監測細菌感染和炎癥程度的重要指標，二者均可較好地呈現患者的胃腸道炎癥情況，因此在危重癥AGI患兒中明顯上升。本文根據Pearson法分析相關性可知，瓜氨酸與CRP及PCT均呈負相關(r=-0.661，-0.709；均P＜0.05)。而IFABP和ITF與CRP及PCT無明顯相關性。這提示胃腸炎癥程度越重的患者，其胃腸黏膜的損傷癥狀越重，則血清瓜氨酸水平的下降亦越明顯，因此，將瓜氨酸與IFABP和ITF聯合監測危重癥AGI患兒的癥狀具有可行性。

此外，本文研究發現，瓜氨酸、IFABP及ITF三者聯合檢測對兒童危重癥AGI的診斷價值最高，其中敏感度為98.08%，特異度為95.83%，準確度為97.00%。提示三者聯合檢測能夠更加準確地診斷出兒童危重癥AGI。原因在于瓜氨酸與IFABP和ITF均可較好地監測患兒的胃腸損傷變化，三者聯用具有優勢互補的作用，從而避免了單用某一種指標可能具有的誤診或漏診等狀況的發生。IFABP可在早期時反映出胃腸損傷的情況，但隨著患者疾病的進展，其監測價值有待進一步研究[10-13]。ITF雖可胃腸功能變化的影響，亦可在其他器官受損時發生變化。因此，三者聯合檢測獲得的結果更加準確。

綜上所述，瓜氨酸與IFABP和ITF三者聯合檢測對危重癥AGI患兒的診斷具有較高價值，值得在臨床診斷過程中推廣應用。

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Diagnosis value analysis of combined detection of citrulline,intestinal fatty acid binding protein and intestinal trefoil factor for critically ill children with acute gastrointestinal injury.

LI Xiao-nian,XIE Man-fang.Department of Pediatrics,Maternal and Child Health Hospital of Hainan Province,Haikou 571100,Hainan,CHINA

ObjectiveTo discuss diagnosis value of combined detection of citrulline,intestinal fatty acid binding protein(IFABP),intestinal trefoil factor(ITF)for critically ill children with acute gastrointestinal injury(AGI).MethodsA total of 100 cases of critical illness children in Department of Pediatrics in our hospital for treatment were included in the study from September 2014 to August 2015.According to whether the patients had AGI or not,the patients were divided into observation group(AGI,n=52)and control group(without AGI,n=48).The levels of citrulline, IFABP,ITF,C-reactive protein(CRP)and calcitonin gene-related peptide(PCT)were compared between the two groups, and correlations between the levels of citrulline,IFABP,ITF and CRP,PCT were analyzed.ResultsThe levels of citrulline in the observation group were significantly lower than those in the control group[(15.08±8.84)μmol/L vs(25.07± 12.05)μmol/L],and the levels of IFABP,ITF,CRP and PCT in the observation group were significantly higher than those in the control group[(1 373.38±410.55)ng/L vs(938.89±503.84)ng/L,(14.51±4.90)ng/mL vs(9.79±4.82)ng/mL, (60.65±21.08)mg/L vs(28.12±10.13)mg/L,(22.93±10.19)ng/mL vs(5.28±3.08)ng/mL].The differences were statistically significant(P＜0.01).Diagnostic value of combined detection of citrulline,IFABP and ITF for critically ill children with AGI were the highest,with the sensitivity of 98.08%,specificity of 95.83%and the accuracy of 97.00%.Pearson correlation analysis showed that citrulline was negatively correlated with CRP and PCT(r=-0.661,-0.709,P＜0.05). There was no significant correlation between ITF,IFABP and CRP and PCT(r=0.108,0.201,0.097,0.113,P＞0.05).ConclusionCombined detection of citrulline,iFABP and ITF has good application value in critically ill children with AGI and is worthy to be popularized in clinical diagnosis.

Citrulline;Intestinal fatty acid binding protein(IFABP);Intestinal trefoil factor(ITF);Critically ill children;Acute gastrointestinal injury(AGI);Diagnostic value

R725.7

A

1003—6350（2016）12—1948—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.12.017

2015-11-17)

黎小年。E-mail：66765088@qq.com