蒙醫五味甘露浴對佐劑性關節炎大鼠5—HT、DA、NE的影響

張麗霞　水玲　陳英松

【摘 要】 目的：觀察蒙醫五味甘露浴對佐劑性關節炎大鼠下丘腦中五-羥色胺（5-HT）、多巴胺（DA）、去甲腎上腺素（NE）含量的影響。方法：將40只雄性SD大鼠隨機分為正常對照組、模型組、來氟米特組和五味甘露浴組，每組10只。除正常對照組外，其余各組大鼠進行造模，在無菌條件下將大鼠右后足趾部注射0.1ml的CFA（完全弗氏佐劑）致炎，正常對照組注射同劑量的生理鹽水。造模后第3d，對藥浴組進行1次/d，30min/次的治療，連續藥浴治療15d[溫度為（40±2）℃]。同樣的方法，對正常對照組和模型組做溫水浴治療作為對照。來氟米特組以0.17g/kg劑量灌胃進行治療15d。采用ELISA法檢測大鼠5-HT、DA、NE的含量。結果：與正常對照組相比，模型組5-HT、DA、NE的含量明顯升高（P<0.05），五味甘露浴組、來氟米特組與模型組比5-HT、DA、NE的含量明顯降低（P<0.05），差異有統計學意義，蒙醫五味甘露浴組與來氟米特組比，5-HT、DA、NE的含量明顯降低，但差異無統計學意義（P>0.05）。結論：蒙醫五味甘露浴可能通過調節AA大鼠5-HT、DA、NE的含量，對AA起到抗炎、鎮痛作用。

【關鍵詞】 蒙醫五味甘露浴；AA大鼠；神經遞質

【中圖分類號】R291.2 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2015）22-0009-02

蒙醫五味甘露藥浴由小白蒿，水柏枝、麻黃各，杜鵑葉、刺柏五種藥物組成，是蒙醫臨床外治法中的重要療法之一，目前廣泛運用于臨床。其不僅具有悠久的歷史和獨特的理論，同時具有毒副作用小、療效明顯、簡便易行、臨床應用廣范等特點。蒙醫五味甘露浴在臨床上治療類風濕關節炎（rheumatoid arthritis，RA）方面具有非常顯著的療效，未發現毒副作用。本研究采用CFA誘導的佐劑性關節炎（adjuvant arthritis，AA）模型大鼠，檢測治療前后5-HT、DA、NE含量的變化，探討蒙醫五味甘露浴的抗炎及鎮痛機制。

1 材料

1.1 實驗動物、藥物與試劑 取4～6周齡清潔級雄性SD大鼠[SCXK（軍）2012-0004] 40只，體重180～200g，由北京實驗動物科技有限公司提供，進行3d適應性飼養，自由飲水和攝食。

完全弗氏佐劑（CFA， Sigma公司產品），五-羥色胺（5-HT）、多巴胺（DA）、去甲腎上腺素（NE），ELISA檢測試劑盒，北京新亞太生物科技有限公司提供，批號分別為：DZE30326、DZE30237、DZE30587；蒙醫五味甘露浴劑，國家蒙藥制劑中心內蒙古自治區中蒙醫醫院中心制劑室提供（批號：720121110）。來氟米特，由蘇州長征-欣凱制藥有限公司提供（國藥準字號：H20000550）。

1.2 儀器 80-2式離心機由金壇市化城敏科實驗儀器廠提供；特制浴療器等。

2 方法

2.1 動物分組與造模 將正常雄性SD大鼠隨機分為正常對照組、模型組、來氟米特組和五味甘露浴組，每組10只。對模型組、來氟米特組、五味甘露浴組大鼠進行造模。在無菌條件下給予大鼠右后足趾注射0.1ml的CFA（內含0.1℅滅活結核桿菌）致炎[1]，正常對照組注射同劑量的0.9%的生理鹽水，之后針眼處涂抹紫藥水。

2.2 治療方法 正常對照組：造模后第3天，對該組進行1次/d，30min/次的治療，連續溫水浴治療15d[溫度為（40±2）℃]。治療方法：在長50cm、寬30cm、高20cm的半透明塑料容器中加入溫度為（40±2）℃的清潔飲用水1000ml，將大鼠的四肢和尾部浸泡在溫水中，治療結束后用清潔毛巾擦拭干凈后放入鼠籠中。

模型組：治療方法與正常對照組相同。

來氟米特組：造模后第3天開始來氟米特灌胃，0.17g/kg的給藥量1次/d，連續灌胃15d。

藥浴組：治療方法為在長50cm、寬30cm、高20cm的半透明塑料容器中加入濃度為33.4%的蒙醫五味甘露浴1000ml，浸泡方法與正常對照組相同。

2.3 取材、檢測方法 末次治療后24h，用烏拉坦腹部皮下麻醉大鼠，將大鼠斷頭處死，在冰上剝離大腦，迅速完整取下丘腦，并稱重后置于速凍管，用液氮快速冷凍，放入-80 ℃冰箱保存待測。采用酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測大鼠5-HT、NE、DA的含量，按試劑盒說明操作。

2.4 統計學方法 計量數據均以（x±s）表示，采用SPSS 13.0統計軟件，單胺類神經遞質的含量結果用單因素方差分析作為統計學檢驗。P<0.05為差異具有統計學意義。

3 結果

與正常對照組相比，模型組5-HT、DA、NE的含量明顯升高（P<0.05），五味甘露浴組、來氟米特組與模型組比5-HT、DA、NE的含量明顯降低，差異有統計學意義（P<0.05），蒙醫五味甘露浴組與來氟米特組比，5-HT、DA、NE的含量明顯降低，但差異無統計學意義（P>0.05）。

4 討論

類風濕關節炎是一種病因未明的慢性、以炎性滑膜炎為主的系統性、自身免疫性疾病。臨床表現為關節紅腫熱痛和活動障礙，并伴有不同程度的僵硬畸形、骨和骨骼肌的萎縮，是目前造成人類喪失勞動力和致殘的主要原因之一。RA是一種主要累及關節滑膜的慢性、炎癥性自身免疫性疾病[2]，是世界醫學界公認的難治性疾病，其發病機制仍不清楚。據統計，我國患病率為0.3%～0.4%[3-5]。大鼠佐劑性關節模型與類風濕關節炎在病理機制、臨床表現、病理學和免疫學改變等方面有許多相似特征，佐劑能較好地模擬免疫紊亂和炎癥反應，故佐劑性關節炎是建立免疫性炎癥動物模型的最常用的方法。國內外學者[6]認為用CFA誘發的大鼠關節炎模型的疼痛特點具有持續性，可以成為良好的臨床痛證研究的動物模型。佐劑性關節炎大鼠致痛的機制為炎癥局部血小板被激活，釋放出5-HT，超過了MAO的代謝能力而產生疼痛。因游離的5-HT是一種致痛物質，其減少途徑可能是使血小板對5-HT吸收增加及再釋放減少[7]，并使較多的5-HT貯存于胃壁的APUD細胞內，使5-HT釋放入血的量減少[8]。雖然DA、NE不是直接的致痛物質，但疼痛時可能會出現一系列的自主神經反應，特別是在交感神經系統；NE作為交感神經遞質，當疼痛發生時，NE的含量會升高。在這次實驗中，蒙醫五味甘露浴能抑制交感神經的過度興奮，使DA、NE含量下降；同時，DA、NE含量的降低又有助于改善炎癥局部血液循環，促使致痛物質發生轉運和清除，從而使疼痛減輕。

關節炎屬蒙醫“托來”病范疇，其治病因素是“黃水”，黃水增盛，并與血交搏注關節，導致局部氣血運行受阻所致。誘發本病之常見因素有關節拐傷，強勞內傷，酗酒，飲食過多，汗出冒風寒，中潮濕之毒等。據蒙醫文獻及臨床實踐，蒙醫五味甘露藥浴之藥有各自的功能主治等蒙藥特征外，傳統理論認為五味配合具有改善全身氣血運行、潤僵舒筋、疏通經絡、調理體素、增強臟腑器官的功能、根除深伏之病毒余邪的作用等功效[9]。臨床中主要治療四肢僵直或抅攣、關節腫痛、肌肉萎縮等“黃水”疾患，治宜以燥黃水，舒筋為原則[10]。

蒙醫五味甘露浴是利用水和藥物的協同作用使人體的外部浸漬，以達到防治疾病目的的一種療法，是蒙醫臨床外治法重要組成部分。藥物的有效成分通過皮膚黏膜吸收、轉運、擴散，通過對皮膚的刺激，擴張血管、促進血液循環、改善周圍組織，發揮抑制和殺死病菌、調節免疫的作用。五味甘露藥浴能抑制各種炎癥模型所致的炎癥，并能起到鎮痛作用，是蒙醫臨床外治法中重要的療法之一[9]。

本實驗結果表明，蒙醫五味甘露浴具有較好的抗炎、鎮痛作用，能夠明顯降低CFA誘導的佐劑性關節炎大鼠下丘腦5-HT、DA、NE的含量。提示蒙醫五味甘露浴通過調節AA大鼠下丘腦5-HT、DA、NE的含量，抑制炎癥模型所致炎癥，起到鎮痛作用。

參考文獻

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[9]陳英松.蒙醫學-適宜技術及應用[M].呼和浩特：內蒙古大學出版社，2011，7： 93.

[10]蒙古學百科全書編輯科員會《醫學卷》編輯委員會編，蒙古學百科全書-醫學卷[M].呼和浩特：內蒙古人民出版社，2002：724-725.

（收稿日期：2015.09.16）