豬沙門氏菌病的研究進展

文/貴州大學生命科學學院 曹正花

豬沙門氏菌病的研究進展

文/貴州大學生命科學學院 曹正花

沙門氏菌病（salmonellosis）又名副傷寒（paratyphoid），是許多種動物感染沙門氏菌屬細菌而引起的疾病總稱。臨床診斷癥狀多表現(xiàn)為腸炎和敗血癥，有時也可以使懷孕的母畜發(fā)生流產(chǎn)現(xiàn)象。本病普遍發(fā)生于世界各地，對牲畜的繁殖和幼畜的健康帶來嚴重危害。沙門氏菌的許多血清型也可使人感染，如吃了被沙門氏菌污染的食物會發(fā)生食物中毒和敗血癥等，可以說沙門氏菌是重要的人獸共患病原體。近年來由于抗菌藥物的大量和不規(guī)范使用，沙門氏菌耐藥性問題越來越嚴重，發(fā)病率逐年上升，尤其是在養(yǎng)豬業(yè)中，給養(yǎng)豬業(yè)造成的損失越來越嚴重。本文就豬沙門氏菌病的病原、發(fā)病原因和發(fā)病機理，臨床診斷、預防與治療進行了相關介紹，以期為生產(chǎn)中豬沙門氏菌疾病的預防與控制提供參考。

豬沙門氏菌；臨床診斷；預防治療

1 有關豬沙門氏菌病的相關簡介

1.1 病原

沙門氏菌病（Salmonellosis）這一名稱是為紀念美國獸醫(yī)師丹尼爾·E·沙門（Daniel E Salmon）而命名的，他在1885年第一次分離得到豬霍亂沙門氏菌。

沙門氏菌屬是腸桿菌科中的重要成員之一，屬于血清學相關的革蘭氏陰性桿菌，不產(chǎn)生芽孢，也無莢膜，大小為2.0～5.0μm×0.7～1.5μm，其間有短絲狀形成。除雞傷寒沙門氏菌和雞白痢沙門氏菌沒有鞭毛不能運動外，其它各菌都以周生鞭毛運動，而且大部分沙門氏菌具有I型鞭毛［1，2］。沙門氏菌屬的培養(yǎng)特性與埃希氏菌屬類似，在普通培養(yǎng)基上生長較好，需氧及兼性厭氧，培養(yǎng)溫度為37℃左右，pH 7.4～7.6。只有羊流產(chǎn)沙門氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌、雞白痢氏菌和雞傷寒沙門氏菌等在肉湯瓊脂培養(yǎng)基上生長狀況較差，形成較小的菌落。在鑒別或腸道桿菌選擇培養(yǎng)基上，絕大多數(shù)沙門氏菌菌株由于不發(fā)酵，乳糖會形成無色菌落，本屬在培養(yǎng)基上有S-R變異。

本屬細菌包括腸道沙門氏菌和邦戈爾沙門氏菌兩個種，前者又分為6個亞種。沙門氏菌具有O、H、K和菌毛4種抗原，其中前2種為主要抗原。沙門氏菌屬依據(jù)不同的K抗原、O抗原和H抗原分為不同的血清型［3］。到現(xiàn)在為止，已經(jīng)知道的沙門氏菌共有52個O群，64種H抗原和59種O抗原，組成了2，600種以上的血清型，除了不到11個罕見的血清型屬于邦戈爾沙門氏菌外，其余血清型都屬于腸道沙門氏菌。

1.2 豬沙門氏菌病

豬沙門氏菌病又稱豬副傷寒。世界各國所分離得到的沙門氏菌的血清類型比較復雜，其中主要的有鼠傷寒沙門氏菌、德爾卑沙門氏菌、豬傷寒沙門氏菌、豬傷寒沙門氏菌（Voldagsen）變型、豬霍亂沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌（Kunzendorf）變型、腸炎沙門氏菌等［4］。豬沙門氏菌病菌潛伏期一般從兩天到數(shù)周不等，病理變化種類多樣，這取決于病豬的年齡、對病原菌的易感性以及病原菌的感染量和毒力強度，臨床診斷上分為急性、亞急性和慢性。其病理變化急性的多表現(xiàn)為敗血癥，而慢性的多表現(xiàn)為腸炎型疾病［5，6］。

1.2.1 急性 癥狀為前期病豬體溫突然升高（41～42℃），食欲下降，精神萎靡不振。到后期病豬會出現(xiàn)呼吸困難，下痢，胸前、耳根和腹下皮膚有紫紅色斑點等癥狀顯現(xiàn)。有時會在出現(xiàn)臨診癥狀24h內(nèi)死亡，但大多數(shù)病程為2～4d，病死率非常高。

其病理變化主要為敗血癥，肝腎有不同程度的腫大、充血和出血現(xiàn)象。有時肝實質(zhì)可觀察到黃灰色壞死點，腸胃黏膜可見急性卡他性炎癥。全身漿膜、黏膜都有不同程度的出血斑點。脾常腫大，堅實似橡皮，切面藍紅色，脾髓質(zhì)部軟化，色暗帶藍色。腸系膜淋巴結鎖狀腫大。其他淋巴結也有不同程度的增大，紅而軟，大理石形狀［7］。

1.2.2 亞急性和慢性 這種類型疾病最為常見，與腸型豬瘟的臨床癥狀表現(xiàn)非常類似。患該病的豬上下眼瞼被黏著，眼睛里有黏性或膿性分泌物，體溫升高（40.5～41.5℃），精神萎靡不振，打寒顫，比較喜歡鉆墊草，堆疊在一起。部分病豬在病程后期皮膚表現(xiàn)為彌漫性濕疹現(xiàn)象，特別在腹部皮膚，有時可見干涸、綠豆大的漿性覆狀物，揭開可看到淺表潰瘍。病情2～3周或更長，最后極度消瘦，衰竭而死［8，9］。少數(shù)發(fā)生角膜混濁，甚至眼球被腐蝕，嚴重者發(fā)展為潰瘍，病豬食欲不振，初便秘后下痢。患該病的病豬糞便惡臭，呈淡黃色或灰綠色，病豬身體消瘦較快。有時病豬臨診癥狀逐漸減輕，癥狀似恢復，但之后生長發(fā)育不良或經(jīng)過短暫時間又復發(fā)。病理變化，其特征性病理變化為壞死性腸炎。結腸、盲腸腸壁變厚，有一層彌漫性壞死性和腐乳狀物質(zhì)覆蓋在黏膜上，呈糠麩狀，剝開可觀察到邊緣不規(guī)則的潰瘍面、底部紅色，這種病理變化有時波及回腸后段。少數(shù)病例濾泡周圍黏膜壞死，有纖維蛋白物積累，稍突出于表面形成隱約可見的輪環(huán)狀。肝有時可見黃灰色壞死點。脾稍腫大，呈網(wǎng)狀組織增生。腸系膜淋巴結鎖狀腫脹，部分呈干酪樣變［10～12］。

2 豬沙門氏菌病發(fā)病原因

沙門氏菌屬種的許多類型細菌對人、畜及其他動物都有致病性。各種年齡的動物都可能有感染，但年幼者較成年者更易感染。豬沙門氏菌病發(fā)病多見于6月齡以下的仔豬，尤其以2～4月齡常見，吮乳仔豬則很少發(fā)生，6月齡以上的豬很少出現(xiàn)原發(fā)性副傷寒，常常是豬瘟等疾病的繼發(fā)病或伴發(fā)病［13，14］。有的豬群感染了潛伏性“副傷寒”，這時小豬就會出現(xiàn)生長發(fā)育緩慢，身體健康狀況較差，有時會發(fā)生下痢，身體表面皮毛粗亂、污穢。雖然其體溫和食欲變化情況不明顯，但有一些患病的豬病情發(fā)展到一定時期會突然病癥加劇而死亡。

帶病者和患病者是豬沙門氏菌病的主要傳染源。病原隨乳汁以及流產(chǎn)的胎兒、胎衣和羊水糞便、尿排出而污染水源和飼料等，經(jīng)消化道感染健康的牲畜。患病動物和健康動物交配或者用患病動物的精液人工授精都可發(fā)生感染。除此之外，子宮感染也有可能引發(fā)此病。

身體健康的豬攜帶病菌現(xiàn)象也非常普遍。豬沙門氏菌病菌可以潛伏于消化道、膽囊內(nèi)和淋巴組織。當外界不良環(huán)境因素使動物抵抗能力降低時，該病菌便可活化而發(fā)生內(nèi)源性感染，持續(xù)不斷的通過許多容易感染的動物，毒力增強而擴大傳染。豬沙門氏菌病一年四季都有可能發(fā)生，但豬在多雨潮濕季節(jié)發(fā)病較多。一般呈現(xiàn)發(fā)散性或者地方性流行，有些動物還可以表現(xiàn)為流行性［15］。飼養(yǎng)管理好的豬群，發(fā)病也會呈發(fā)散性。

以下因素可加速豬沙門氏菌病的暴發(fā)，例如：豬群圈舍擁擠，生長環(huán)境骯臟、陰暗潮濕，糞便沒有及時清理，通風不良，溫度過低或過高，養(yǎng)料和飲水供應不充足；長途運輸過程出現(xiàn)疲勞和饑餓、環(huán)境氣候惡劣、機體內(nèi)寄生蟲和病毒感染；母豬分娩、手術；母畜缺奶；新引進動物未實行隔離檢疫等［16］。

3 臨床診斷及致病原理

3.1 豬沙門氏菌病的診斷

對于豬沙門氏菌病可根據(jù)臨診癥狀和病理變化做出初步診斷，但是臨床上很容易與豬瘟、豬肺疫、豬丹毒、豬痢疾、豬傳染性胃腸炎和豬流行性腹瀉等豬常見疾病混淆，確診還需要進行細菌學檢查。目前有許多方法，包括涂片鏡檢、細菌的分離鑒定、凝集試驗、生化試驗、小鼠接種試驗、Dot-PPA-ELISA、單抗競爭ELISA和聚合酶鏈式反應（PCR）技術等，也包括沙門氏菌與其他癥狀相似疾病的鑒別診斷［17］。

3.2 致病機理

沙門氏菌的毒力因子種類非常多，其中主要的有腸毒素、細胞毒素、脂多糖及毒力基因等。

3.2.1 脂多糖（LPS） 脂多糖是沙門氏菌外胞壁的基本組成成分，用來構成細菌的O抗原和內(nèi)毒素，它是沙門氏菌的一個重要的毒力因子，在防止宿主吞噬細胞和殺傷作用上起關鍵性的作用，可使宿主發(fā)熱、黏膜出血、白細胞減少、彌漫性血管內(nèi)凝血、循環(huán)衰竭、中毒臨診等癥狀，嚴重者可休克死亡。

3.2.2 腸毒素 已知某些血清型的沙門氏菌可產(chǎn)生腸毒素。鼠傷寒沙門氏菌中發(fā)現(xiàn)一種熱敏的、細胞結合型的霍亂毒素（CT）樣腸毒素。其結構、功能和抗原上與CT和ETEC的LT1類似，即可引起CHO細胞伸長，在兔結腸中誘導液體分泌，與GM1神經(jīng)節(jié)苷脂結合，提高兔結腸細胞內(nèi)cAMP和前列腺E2水平，其生物活性可被抗CT抗體中和。該毒素有A和B兩種亞單位，分子質(zhì)量分別是25，000u和12，000u。在沙門氏菌中還發(fā)現(xiàn)其它種腸毒素，可引起CHO細胞伸長，并導致兔腸積液，但其活性不被CT抗血清中和。

3.2.3 細胞毒素 沙門氏菌病腸炎的重要特征之一是腸上皮細胞出現(xiàn)損傷，而造成這種損傷的因素可能是3種細胞毒素。其一是對熱和胰酶敏感，在許多血清型中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)。它可阻止Vero細胞的蛋白質(zhì)合成。其二是沙門氏菌外膜的一種低分子質(zhì)量成分，已經(jīng)證明該毒素基因序列與其它一些沙門氏菌以及各種志賀氏菌和ETEC之間存在高度相關性。第三種是分子質(zhì)量為26，000u的細胞結合接觸性溶血素，對Vero等細胞系均有致死作用，可引起細胞的快速解瓦，分子大小和活性不同于已知的其他血溶素［18］。

3.2.4 侵襲力與毒力基因 有毒力的豬沙門氏菌菌株能進入小腸黏膜上表皮細胞，并穿過黏膜上表皮細胞層到達下層組織。豬沙門氏菌雖然可在此處被吞噬細胞吞噬，但是不被殺滅并且可在細胞內(nèi)繼續(xù)生長繁殖。這種抗吞噬作用除與O抗原以及Vi抗原有關外，現(xiàn)在認為，豬沙門氏菌菌株內(nèi)具有質(zhì)粒染色體的毒力基因，它編碼的產(chǎn)物有助于病原體在宿主體內(nèi)居住并造成機體嚴重損傷。自1982年起，在鼠傷寒、傷寒、豬霍亂、腸炎、羊流產(chǎn)、雞傷寒、雞白痢、都柏林等沙門氏菌中先后鑒定出不同分子質(zhì)量的毒性質(zhì)粒，含有毒性質(zhì)粒的血清型菌株對小鼠的毒力要比其他相應的無質(zhì)粒菌株高數(shù)百萬倍之多。豬沙門氏菌菌株上染色體的有關基因?qū)訌娕c質(zhì)粒相關毒力基因表達是非常必要的，在染色體上最少有8個侵襲位點和其他許多基因與該菌的感染力密切相關。

4 預防與治療

如果發(fā)生豬沙門氏菌病，應及時隔離發(fā)病豬，最大程度降低病豬的臨床癥狀，防止此病繼續(xù)在豬群中傳播和復發(fā)。如已發(fā)病可用豬傷寒弱毒疫苗進行預防加之用抗菌藥物進行治療，但由于豬霍亂沙門氏菌與傷寒沙門氏菌對豬常用的抗菌藥物有不同程度的耐藥性［19］，所以應該在選用抗菌藥物之前，對分離到的沙門氏菌進行藥敏試驗，選擇對流行毒株更有效的抗菌藥物，并且應該選擇幾種不同抗菌藥物同時進行治療，這樣效果會更好。如果沒有進行藥敏試驗也可以選擇硫酸阿米卡星、慶大霉素、新霉素、安普霉素以及三甲氧嘧啶-磺胺類抗菌藥物，研究表明這幾種抗菌藥物對大多數(shù)實驗室沙門氏菌分離株有效［20］。

預防本病除利用疫苗預防與抗菌藥物治療外，最關鍵的是的加強飼養(yǎng)環(huán)境的管理，包括對豬舍進行嚴格消毒、改善飼養(yǎng)環(huán)境衛(wèi)生、減少豬應激，對飼料、飲水等都應該嚴格執(zhí)行獸醫(yī)衛(wèi)生管理部門制定的相關規(guī)定，使用含有抗菌藥物的飼料添加劑，不僅有預防相關疾病的作用，還有利于幼豬的健康生長，但是應該注意地區(qū)性抗藥菌株的出現(xiàn)，如果在使用過程中發(fā)現(xiàn)病菌對某種藥物出現(xiàn)抗藥性時，應該改換其他種類的藥物，只有不斷提高豬體自身的免疫力才更有利于控制沙門氏菌病的暴發(fā)。

［1］ 蔡寶祥.家畜傳染病學［M］.第四版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2005：52～59.

［2］ Barbara E Straw，Jeffery J Zimmerman，David J Taylor.豬病學［M］.趙德明，張仲秋，沈建忠譯.第九版.北京：中國農(nóng)業(yè)大學出版社，2007：841～861.

［3］ 湯景元，姜平，鄧雨修，等.豬繁殖與呼吸綜合征病毒和致病性沙門氏菌的混合感染［J］.中國獸醫(yī)學報，2005，25（4）：337～338.

［4］ 林進秋，李沐華.豬圓環(huán)病毒2型和致病性沙門氏菌的混合感染［J］.廣東畜牧獸醫(yī)科技，2005，30（6）：33～34.

［5］ 侯洪烈.豬沙門氏菌和豬瘟混合感染的診治［J］.畜牧與獸醫(yī)，2002，34（10）：23～24.

［6］ 童光志.動物傳染病學［M］.第一版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2008：37～51.

［7］ 應成玉，柴順蓮，王文光，等.乳膠凝集試驗檢測成品飼料中的沙門氏菌［J］.青海畜牧獸醫(yī)雜志，2006，36（2）：14～15.

［8］ 文其乙，焦新安，劉秀梵，等.沙門氏菌快速檢測試劑盒的研制及其應用［J］.江蘇農(nóng)業(yè)研究，1996，17（2）：29～32.

［9］ 文其乙，焦新安，劉秀梵，等.直接ELISA檢測沙門氏菌方法的建立及其應用研究［J］.中國獸醫(yī)學報，1995，15（2）：105～111.

［10］ 崔水保，王紅東，于亮明，等.蛋白胨對仔豬副傷寒疫苗培養(yǎng)菌數(shù)和凍干后活菌率的影響［J］.中國獸藥雜志，2003，37（2）：44～45.

［11］ 康凱，姚文生.仔豬副傷寒活疫苗兩種菌落的免疫效力比較試驗［J］.中國獸藥雜志，2000，34（3）：33～34.

［12］ 王紅寧，劉書亮，陶勇，等.規(guī)模化豬場致病性大腸桿菌、沙門氏菌藥敏區(qū)系調(diào)查［J］.西南農(nóng)業(yè)學報，2000，13（1）：84～91.

［13］ 傅力，任娟，李瑾瑜，等.新疆某豬場的幾株沙門氏菌及大腸桿菌對16種抗菌藥物藥敏性研究［J］.新疆農(nóng)業(yè)科學，2008，45（4）：754～757.

［14］ 馬孟根，王紅寧，余勇，等.豬源致病性沙門氏菌耐藥基因的分析［J］.畜牧獸醫(yī)學報，2006，37（1）：65～70.

［15］ 楊保偉，盛敏，席美麗，等.沙門氏菌抗菌藥物抗性機理研究進展［J］.微生物學通報，2008，35（9）：1479～1484.

［16］ 王穎，王雪瑩，代永魁，等.豬傳染性胃腸炎的臨床診斷及防治［J］.畜牧獸醫(yī)科技信息，2008（5）：64.

［17］ 孫鳳娟，王俊江，豬傳染性胃腸炎病的診斷與防制［J］.中國豬業(yè)，2008（2）：48.

［18］ 于永勝，畢勝，趙海君.仔豬流行性腹瀉的診治［J］.畜牧獸醫(yī)科技信息，2008（7）：80.

［19］ 張俊，龐健，高宏.豬流行性腹瀉的診治［J］.畜禽業(yè)，2008（1）：22～23.

［20］ 謝紅玲，崔尚金，崔玉東.豬流行性腹瀉及病毒研究進展［J］.畜禽業(yè)，2008（1）：10～13.