圍產期孕婦B族鏈球菌感染情況和藥敏性試驗及其與不良妊娠結局的關系

張嬌珍，王小敏，李麗娟（海南省海口市中醫醫院檢驗科，海南海口570100）

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圍產期孕婦B族鏈球菌感染情況和藥敏性試驗及其與不良妊娠結局的關系

張嬌珍，王小敏，李麗娟
（海南省海口市中醫醫院檢驗科，海南海口570100）

摘要：目的探討孕婦妊娠期B族鏈球菌（GBS）感染情況及其藥物敏感性，分析GBS感染與不良妊娠結局的關系及不同用藥方案對GBS感染孕婦妊娠結局的影響。方法選取2014年1月-2014年10月海口市中醫醫院婦產科行產前檢查的428例孕35～37周孕婦為研究對象，收集孕婦陰道及肛周分泌物，應用實時定量PCR檢測GBS感染情況，并對分離的菌株進行耐藥試驗。將GBS陽性患者分為A組（臨產后采用敏感性抗生素靜脈滴注至分娩結束，1次/4 h）及B組（發現感染即口服抗生素治療7 d，其余治療方法與A組相同），對比分析兩種治療方案妊娠結局。結果GBS陽性組胎兒宮內感染、胎兒窘迫、羊水污染、早產、新生兒肺炎、產婦產后出血、產褥期感染發生率高于GBS陰性組（P<0.05）。GBS孕婦對萬古霉素、頭孢噻肟、青霉素、氨芐青霉素的敏感性為100%，而對克林霉素、阿奇霉素及紅霉素的敏感率較低，分別為58.8%、44.1%及35.2%。B組胎兒宮內感染、胎兒窘迫、羊水污染、早產、新生兒肺炎、產婦產后出血、產褥期感染發生率低于A組（P<0.05）。結論GBS感染可增加孕婦不良妊娠結局的發生，在發現孕婦感染GBS后立刻采用敏感性的抗生素類藥物治療能有效改善孕婦不良妊娠結局，有利于孕婦預后。

關鍵詞：圍產期孕婦；B族鏈球菌；藥敏性試驗；不良妊娠結局

B族鏈球菌（group B Streptococcus，GBS）屬于革蘭陽性鏈球菌，主要定植在人類胃腸道及下生殖道中，同時也可定植在新生兒上呼吸道中[1]。GBS感染可引起孕婦圍產期不良妊娠結局，如可增加新生兒胎膜早破、宮腔感染、肺炎等不良妊娠結局的發生[2]。研究表明[3]，GBS感染后對孕婦采用敏感性抗生素治療能有效改善孕婦不良妊娠結局，降低新生兒發病率及死亡率。目前孕婦GBS臨床篩查方法常采用細菌培養法，但該方法培養時間長，培養率低，不利于GBS孕婦臨床篩查及評估，而聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）法因其快速、靈敏度高而備受關注[4]。本研究將采用PCR法測定孕婦下陰道GBS感染情況，并對陽性患者進行藥敏試驗及探討不同治療時機對GBS感染孕婦妊娠結局的影響，旨在為臨床GBS感染治療提供指導。

1　資料與方法

1.1臨床資料

選取2014年1～2014年10月海口市中醫醫院婦產科行產前檢查的428例孕婦為研究對象。均為單胎妊娠，入組前無性交史或應用抗生素史，取材均獲得孕婦同意。年齡22～38歲，平均（27.8±2.5）歲，孕35～37周，平均（36.2±0.4）周，初產婦322例，經產婦106例。所有產婦均由醫師采用拭子采集陰道及肛周分泌物標本2份，其中1份用于培養鑒定，一份用于PCR檢測，并立刻送檢培養。

1.2試驗方法

1.2.1標本采集取材方法參照2002年用戶研究與體驗設計中心（CDC）推薦取材方法，在孕35～37周時收集樣本，先將外陰分泌物拭去，采用2根無菌陰道棉放入陰道1/3內，旋轉1周后收集陰道分泌物，將同一根棉拭子再在肛門周圍旋轉一周，取材完畢后將拭子放入帶封帽的試管中備用。取材前不進行外陰消毒，取材時不使用陰道窺器。

1.2.2GBS分離及鑒定標本采集、分離、培養嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》（第4版）進行，獲得純培養后將分離的病原菌接種于35℃的血瓊脂平板中恒溫培養24 h，采用應用編程接口（API）法或VITEK全自動細菌鑒定系統對菌種進行鑒定。采用美國臨床實驗室標準化委員會推薦的紙片擴散法（K-B）進行檢測，將血瓊脂板上的待測菌稀釋至0.5麥氏單位的細菌懸液，并將菌種接種至MH平板中，待菌液風干后應用GPS-15藥敏最低抑菌濃度（MIC）測定試驗條進行鑒定，試劑盒由美國Sigma公司提供，操作過程嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

1.2.3PCR檢測GBS將陰道拭子浸于pH 8.0的鹽酸緩沖液中，于37℃中加入100μg/ml溶菌酶充分搖勻震蕩30 min后，加入200μg/ml蛋白酶K，于56℃中反應3 h，并置于離心機中以10 000 r/min中離心處理5 min后留取上清液200μl，采用DNA試劑盒（美國Sigma公司）提取DNA，具體步驟參照說明書進行操作。采用PCR檢測法測定GBS水平，操作過程嚴格按照試劑盒說明方法進行。

1.3治療方法

根據隨機數字表將GBS陽性患者分為A組及B組。其中，A組于臨產后采用敏感性抗生素靜脈滴注至分娩結束，1次/4 h，B組于發現感染即口服敏感性抗生素7 d，同時于臨產后采用敏感性抗生素靜脈滴注至分娩結束，1次/4 h。A組若分娩前發現胎膜早破現象，應立刻采用敏感性抗生素靜脈滴注治療。

1.4統計學方法

采用SPSS 17.0統計軟件進行數據分析，計數資料用頻數、構成比或率進行描述，組間計數資料率的比較用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1孕婦GBS檢出結果及GBS感染對妊娠結局的影響

428例孕婦經PCR檢測，GBS陽性68例（15.89%），GBS陰性360例（84.11%），GBS陽性組胎兒宮內感染、胎兒窘迫、羊水污染、早產、新生兒肺炎、產婦產后出血、產褥期感染發生率高于GBS陰性組（P<0.05），見表1。

2.2GBS陽性孕婦藥敏性試驗情況分析

經藥敏性試驗分析可知，GBS孕婦對萬古霉素、頭孢噻肟、青霉素、氨芐青霉素的敏感性為100%，而對克林霉素、阿奇霉素及紅霉素的敏感率分別為58.8%、44.1%及35.2%，見表2。

2.3不同的治療方法對GBS陽性孕婦妊娠結局的影響

B組胎兒宮內感染、胎兒窘迫、羊水污染、早產、新生兒肺炎、產婦產后出血、產褥期感染發生率低于A組（P<0.05），見表3。

表1　孕婦GBS檢出結果及GBS感染對妊娠結局的影響例（%）

表2　GBS陽性孕婦藥敏性試驗情況分析　例（%）

表3　不同治療方法對GBS陽性孕婦妊娠結局的影響　例（%）

3　討論

GBS是一種寄生于人類泌尿系統及下消化道的致病菌。研究表明[5]，不同種族、不同地區的妊娠晚期婦女GBS感染率為6.5%～36.0%。國內文獻報告[6]為10.1%～32.4%。本研究中孕婦GBS檢出率為15.89%，與上述報告相近。由于標本培養法容易受到標本取樣、運送及培養等條件的影響，容易產生假陽性率。實時PCR技術是近年細菌感染檢測中的熱門方法，其不僅檢測時間段，且準確率高。為此，本研究對圍產期孕婦采用PCR技術檢測GBS感染情況，以提高研究準確性。

本研究結果顯示，GBS陽性組胎兒宮內感染、胎兒窘迫、羊水污染、早產、新生兒肺炎、產婦產后出血、產褥期感染發生率高于GBS陰性組（P<0.05），表明圍產期孕婦GBS感染會增加不良妊娠結局的發生，這與國內外研究結果相一致。GBS是目前國際公認的引起圍產期母嬰不良妊娠結局的致病菌。當孕婦感染GBS后，寄生于泌尿道、陰道及宮頸的病原菌上行感染胎膜，通過細胞蛋白水解酶及炎癥細胞吞噬作用侵襲胎膜會降低胎膜張力，導致胎膜早破[7]。同時孕婦感染GBS后會導致細胞因子、前列腺素及磷酸酯酶A2釋放，從而刺激子宮收縮，這是GBS陽性孕產婦早產高于GBS陰性孕產婦的原因。此外病原菌可侵入宮腔，引起胎膜感染，并可穿透胎膜使得胎兒感染，增加新生兒肺部感染發生率，與本文結果相符。胎膜破裂后其屏障作用消失，GBS可直接上行感染并擴散至胎膜及子宮中從而導致宮腔感染，引起胎兒發育不良，也會引起絨毛羊膜炎、子宮內膜炎、泌尿系統感染等疾病。對于絨毛膜羊膜炎患者由于其胎盤血管阻力增加而影響胎兒正常血供，導致胎兒宮內窘迫[8]。此外，孕婦感染GBS后會導致子宮內膜損傷，引起產婦宮縮乏力，導致產婦產后出血，并會導致產婦產褥期感染[9]。

美國疾病預防控制中心對圍產期GBS感染患者預防性應用抗生素，推薦氨芐青霉素、青霉素G，而對于青霉素G過敏者可用紅霉素或克林霉素[10]。本研究顯示，GBS孕婦對萬古霉素、頭孢噻肟、青霉素、氨芐青霉素的敏感性為100%，而對克林霉素、阿奇霉素及紅霉素的敏感率較低，分別為58.6%、44.5%及34.5%，與國外文獻[11]的研究結果一致。GBS對克林霉素、紅霉素等耐藥主要與其體內Elm基因編碼的23rRNA甲基化引起的。近年由于大環內酯類藥物耐藥性呈上升趨勢，因此，臨床用藥時應根據藥物試驗結果及時調整用藥方案，減少菌株耐藥性的產生。既往關于GBS治療時機缺乏統一的指導，認為過早對患者應用抗生素藥物會影響胎兒發育，因此一般在臨產前及分娩后對患者用藥[12]。而本研究發現，盡早對GBS陽性孕婦用藥能有效降低母嬰不良妊娠結局。由于本研究所選的孕婦為孕晚期，此時胎兒腦部發育基本完成，因此藥物對胎兒影響較小，不會對胎兒產生較大的影響。而對于早中期孕婦在發現GBS后即刻采用藥物治療是否對胎兒產生影響，在日后的研究中還需要進一步探討。

綜上所述，GBS感染可增加孕婦不良妊娠結局的發生，在發現孕婦感染GBS后立刻采用敏感性的抗生素類藥物治療能有效改善孕婦不良妊娠結局，有利于孕婦預后。

參考文獻：

[1]戴怡蘅,曾立軍,高平明,等.新生兒B族鏈球菌敗血癥16例臨床分析[J].中國新生兒科雜志,2012,27(1):44-46.

[2]李亞梅,張利俠,秦利,等.圍產期孕婦B族鏈球菌的感染和耐藥性檢測及對妊娠結局的影響[J].現代檢驗醫學雜志,2013,28(1):87-89.

[3] Mitima KT,Ntamako S,Birindwa AM,et al.Prevalence of colonization by streptococcus agalactiae among pregnant women in Bukavu,democratic republic of the congo[J].J Infect Dev Ctries,2014,8(9):1195-2000.

[4] Abarzǘa F,Argomedo C,Meissner A,et al.Prevalence of anal-vaginal colonization of Streptococcus agalactiae in third trimester of pregnancy and susceptibility to macrolides and lincosamides,in pregnant women controlled at clínica alemana temuco,southern chile[J].Rev Chilena Infectol,2014,31(3):305-308.

[5]邊佳明,丁媛媛,楊凡,等.拭樣增菌對實時熒光PCR法檢測孕婦B族鏈球菌感染的影響[J].現代檢驗醫學雜志,2012,27(6):102-104.

[6]嚴育忠,華靜,范惠清,等.圍產期B族鏈球菌感染的研究進展[J].中華圍產醫學雜志,2011,14(12):758-763.

[7] Ghaddar N,Alfouzan W,Anastasiadis E,et al.Evaluation of chromogenic medium and direct latex agglutination test for detection of group B streptococcus in vaginal specimens from pregnant women in lebanon and kuwait[J].J Med Microbiol,2014,63(10):1395-1399.

[8]申微,劉清,張俊芝,等.妊娠期B族鏈球菌感染干預的臨床觀察[J].中國醫師進修雜志,2012,35(12):12-14.

[9]游艷琴,童紅莉,高志英,等.實時聚合酶鏈反應技術檢測妊娠晚期B族溶血性鏈球菌的臨床價值[J].中華圍產醫學雜志,2014(6):403-405.

[10]秦利,張利俠,袁軍,等.孕婦生殖道B族鏈球菌感染與胎膜早破的關系及其對母兒預后的影響[J].國際檢驗醫學雜志,2013,34(8):928-929.

[11]趙運轉,史從寧,張國軍,等.妊娠晚期陰道微生物對B族溶血性鏈球菌檢出率的影響[J].中華圍產醫學雜志,2014(6):405-407.

[12] Shabayek S,Abdalla S.Macrolide-and tetracycline-resistance determinants of colonizing group B streptococcus in women in Egypt[J].J Med Microbiol,2014,63(10):1324-1327.

（張西倩編輯）

Perinatal infection and drug sensitivity of GBS in pregnant women and their relationships with adverse pregnant outcomes

Jiao-zhen Zhang,Xiao-min Wang,Li-juan Li
(Clinical Laboratory,Haikou Hospital of Chinese Traditional Medicine,Haikou,Hainan 570100,China)

Abstract:Objective To investigate the infection status and drug sensitivity of group B Streptococcus (GBS) in pregnant women,analyze the relationship between GBS infection and adverse pregnancy outcomes,and compare the influence of different treatment regimens on the outcomes of pregnant women with GBS infection.Methods Totally 428 cases of pregnant women with 35-37 weeks pregnancy were selected as the research subjects from January 2014 to October 2014.Vaginal and anal secretions of the pregnant women were collected,and real time quantitative PCR was used to detect GBS infection,and drug resistance test was carried out for the isolated strains.The GBS-positive patients were divided into group A (using sensitive antibiotics intravenously once every 4 hours from the beginning to the end of delivery) and group B (oral antibiotic treatment for 7 d once GBS infection was confirmed,the rest was the same as group A),and the pregnancy outcomes of the two treatment regimens were compared.Results The incidences of intrauterine infection,fetal distress,meconium,premature birth,neonatal pneumonia,postpartum hemorrhage and puerperal infection in the GBS-positive group were significantly higher than those in the GBS-negative group (P < 0.05).GBS-positive maternal sensitivity to Vancomycin,Cefotaxime,Penicillin and Ampicillin was 100%,while the sensitivity rates to Clindamycin,Azithromycin and Erythromycin was lower (58.8%,44.1% and 35.2% re－book=51,ebook=56spectively).The incidences of intrauterine infection,fetal distress,meconium,premature birth,neonatal pneumonia,postpartum hemorrhage and puerperal infection in the group B were significantly lower than those in the group A (P < 0.05).Conclusions GBS infection can increase the incidence of adverse pregnancy outcomes in pregnant women.Use of sensitive antibiotics immediately after diagnosis of GBS infection can effectively improve pregnancy outcomes.

Keywords:perinatal pregnant woman; group B Streptococcus; susceptibility test; adverse pregnancy outcome

收稿日期：2015-12-25

文章編號：1005-8982（2016）06-0050-04

DOI:10.3969/j.issn.1005-8982.2016.06.011

中圖分類號：R714.2；R378.1

文獻標識碼：A