CCR5-D32雜合性對HIV-1感染者高效抗逆轉錄病毒治療病毒學反應與免疫學反應影響的meta分析

聞穎，鄧寶成，劉沛（中國醫科大學附屬第一醫院傳染科，遼寧沈陽110001）

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CCR5-D32雜合性對HIV-1感染者高效抗逆轉錄病毒治療病毒學反應與免疫學反應影響的meta分析

聞穎，鄧寶成，劉沛
（中國醫科大學附屬第一醫院傳染科，遼寧沈陽110001）

摘要：目的評價趨化因子受體5-D32（CCR5-D32）雜合性對HIV-1感染者高效抗逆轉錄病毒治療病毒學反應與免疫學反應的影響。方法在PubMed，Web of Science和China Biology Medicine數據庫檢索，文獻收索至2015年10月1日。結果按照入選標準，有11篇文獻入選病毒學反應分析，4篇文獻入選免疫學反應分析。CCR5-D32雜合性人群病毒學反應較高免疫學反應也較高病毒學反應亞組分析，在至少1年的觀察期以及具有稍高的HIV RNA檢測門檻的研究中，CCR5-D32雜合性與較高的病毒學反應具有相關性。由于文獻少，免疫學反應分析中無法進行亞組分析。結論CCR5-D32雜合性人群病毒學反應較高。其與免疫學反應的相關性由于文獻偏少仍需進一步證實。

關鍵詞：CCR5-D32雜合性；高效抗逆轉錄病毒治療；病毒學反應；免疫學反應；meta分析

從1996年高效抗逆轉錄病毒治療（highly active antiretroviral therapy，HAART）的應用，人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染患者的HIV病毒復制得到控制，帶來了免疫學重建以及臨床預后的改善[1]。然而，在部分患者中，HAART治療的有效性受到多種因素的影響，如病毒變異、患者依從性、HAART治療方案、HIV疾病分期等。然而，宿主因素對HAART的療效也發揮重要作用。趨化因子受體5（C-C chemokine receptor 5，CCR5）是HIV進入CD4+T靶細胞的關鍵表面受體[2]。全世界普遍流行的HIV-1亞型C（C-HIV），即為CCR5嗜性。趨化因子受體5-D32（CCR5-D32），是CCR5等位基因32個堿基缺失，其可編碼功能缺失的CCR5。CCR5-D32純合子（CCR5 D32/D32）的個體是非常稀少的（白人中大約占1%），該類人群對HIV感染具有天然抵抗力[3-4]。此外，CCR5-D32雜合子（CCR5 wt/D32）的個體，CD4+T靶細胞的CCR5表達也是減少的，導致該類人群對CCR5嗜性的HIV感染易感性大大降低[5]。在HIV感染疾病的自然進程中，CCR5 wt/D32人群較CCR5野生型（CCR5 wt/wt）人群進展緩慢，這可能與CCR5 wt/D32人群HIV病毒載量較低和CD4+T細胞計數較高有關[6-7]。在HAART藥物種類有限的眾多地區，明確CCR5-D32雜合性對HIV-1感染者HAART病毒學反應與免疫學反應的影響十分重要。然而迄今為止的這方面研究尚無定論，一些研究認為兩者有相關性[8-15]，另一些研究卻否定該種聯系[16-18]，主要是這些研究采用的入選標準不同。不同的HAART藥物方案、評估時間點、初治或復治的背景、HIVRNA的檢測門檻都可能對結果產生影響。因此，應用meta分析通過增加樣本量、減少偏倚來對該結果進行分析，以明確CCR5-D32雜合性是否對HIV-1感染者HAART病毒學反應與免疫學反應產生影響，并對上述的影響因素進行分析，以指導臨床更好的評價HIV患者HAART后的療效。

1　資料與方法

1.1檢索策略

計算機檢索PubMed，Web of Science and China Biology Medicine（CBM）數據庫，收索從建庫至2015年10月1日文獻；英文檢索詞：（“CCR5”或“chemokine receptor 5”）和（“HIV”或“Human Immunodeficiency Virus”或“AIDS”）和（“antiretroviral”或“HAART”）；中文檢索詞：趨化因子受體5和人類免疫缺陷病毒或艾滋病和抗病毒治療。

1.2納入標準與排除標準

納入標準：①HIV病人使用HAART治療；②治療方案是HAART，而非單藥治療；③研究CCR5-D32的雜合性；④研究類型為：隊列研究、病例對照研究或橫斷面研究，內容涉及CCR5-D32異質性對HAART病毒學反應與免疫學反應的影響。排除標準：①與先前文章類似；②數據不全；③缺乏對照；④meta分析、綜述或評論文章。

1.3文獻提取

由聞穎，鄧寶成，劉沛3位作者獨立提取文獻數據，并共同檢查匯總。從11篇文獻中提取以下數據：第一作者、出版年限、種族、國家、樣本大小、CCR5-D32測序方法、HIVRNA檢測門檻、評估時間點、是否初治、HAART方案。對HAART啟動時的CD4+T計數與HIVRNA也要進行評估。同時采用（Sacks Quality Assessment Checklist，SQAC）量表對納入文獻進行質量評價（0～50分）。

1.4統計學方法

采用STATA 11.0統計學軟件（StataCorp，College Station，TX）進行數據分析，應用95%可信區間的優勢比（odds ratios，ORs）評估CCR5-D32雜合性對HAART病毒學反應與免疫學反應的影響。針對HIVRNA檢測門檻、評估時間點、是否初治、HAART方案進一步進行亞組分析。P<0.05為差異有統計學意義。存在異質性的資料，應用隨機效應模型，否則應用固定效應模型分析。應用Egger’s和Begger’s檢驗明確有否發表偏倚。同時進行敏感性分析。

2　結果

2.1檢索流程與納入文獻特征

首先，應用上述關鍵詞收索到1 139篇文獻；然后，根據標題與關鍵詞，1 083篇文獻被剔除；剩余的56篇文獻經詳閱摘要與全文后，45篇文獻被剔除；最后，11篇文獻入組CCR5-D32雜合性對HAART病毒學反應影響[8-10，11-17]，文獻篩選流程圖（見圖1），且其中僅4篇文獻入組CCR5-D32雜合性對HAART免疫學反應影響[9-10、12-13]。出版年限從1998年到2010年。所有文獻CCR5基因分型的DNA樣本均來自患者的外周血。CCR5基因分型方法為PCR限制性片段長度多態性分析、DNA測序、聚丙烯酰胺。

圖1　文獻篩選流程圖

凝膠分析和瓊脂糖凝膠分析。共檢測到CCR5 的3種基因分型：CCR5 wt/wt、CCR5 wt/D32、CCR5 D32/D32。其中2例CCR5 D32/D32的患者未納入meta分析中[10，17]。應用哈代-溫伯格平衡定律（The Hardy-Weinberg equilibrium，HWE）檢驗基因型的分布，未發現偏倚（P >0.05）。樣本大小從107例到1 174例，主要為高加索人群。入選文獻特征，見附表。在CCR5 wt/wt與CCR5 wt/D32兩組患者中，比較HAART啟動時的CD4+T計數及HIVRNA水平，有9篇文獻的HAART啟動時的CD4+T計數及HIVRNA水平無差異；而在2篇文獻中[8-9]，CCR5 wt/ D32患者有較低的HIVRNA水平與較高的CD4+T計數。有10篇文獻HAART啟動時的CD4+T計數小于350 cells/μl，僅1篇文獻HAART啟動時的CD4+T計數大于350 cells/μl[15]。

附表　納入研究的基本特征

2.2CCR5-D32雜合性與HAART病毒學反應的相關性與亞組分析

在納入的11篇文獻中，病毒學反應定義為，低于檢測門檻。由于文獻的異質性明顯（P<0.05），應用隨機效應模型。結果表明，CCR5 wt/D32人群對HAART的病毒學反應較高（1.35，P=0.000），見圖2。針對HIVRNA檢測門檻進行的亞組分析表明，在HIVRNA檢測門檻為400 copies/ml的8篇文獻中病毒學反應較高（95%CI=1.15～1.38，P=0.000），而采用更低的檢測門檻的3篇文獻中缺乏該聯系（1.51，P=0.076），見圖3A。針對評估時間點進行的亞組分析表明，在至少進行1年評估的9篇文獻中病毒學反應較高（0.000），而在僅觀察6個月的2篇文獻中缺乏這種聯系見圖3B。此外，進一步亞組分析表明，病毒學反應與初治或經治1.26，95%CI=1.14～1.40，P=0.000）無關；與HAART方案（PI方案或各種方案）也無關1.07~1.36，P=0.002；P= 0.000）。

2.3CCR5-D32雜合性與HAART免疫學反應的相關性

在納入CCR5-D32雜合性對HAART免疫學反應影響的4篇文獻中，所采用的免疫學反應定義是不同，包括：CD4+T計數增加了50 cells/μl，CD4+T計數增加100 cells/μl，CD4+T計數增加到200 cells/μl以上，CD4+T計數增加到200 cells/μl以上。該文獻評估時間點也不同，見附表。由于文獻的異質性不明顯（P>0.05），故應用固定效應模型。結果表明，CCR5 wt/D32人群對HAART免疫學反應較高（見圖4。由于文獻少，免疫學反應無法進行亞組分析。

2.4發表偏倚評價與敏感度分析

Begger’s漏斗圖形狀對稱，見圖5；Egger’s線性回歸結果表明，無論是針對病毒學反應（t =1.7，P= 0.123），還是針對免疫學反應的研究（t=-0.74，P= 0.537），均提示發表偏倚小。敏感度分析結果排除了單個文獻對的統計學影響。

圖2　CCR5-D32雜合性與HAART治療病毒學反應的相關性

圖3　A：CCR5-D32雜合性與HAART治療病毒學反應相關性的HIVRNA檢測門檻亞組分析；B：評估時間亞組分析

圖4　CCR5-D32雜合性與HAART治療免疫學反應的相關性

圖5　A：CCR5-D32雜合性與HAART治療病毒學反應的相關性發表偏倚評價；B：CCR5-D32雜合性對HAART治療免疫學反應的相關性發表偏倚評價

3　討論

本研究發現：①CCR5 wt/D32人群對HAART的病毒學反應較高；該聯系主要體現在至少1年的觀察期以及具有稍高的HIV RNA檢測門檻的研究中，且獨立于HAART啟動時的CD4+T計數及HIVRNA水平這兩個已知的預測因素，既往未見此類報道；②CCR5-D32雜合性人群對HAART的免疫學反應較高。由于文獻少，免疫學反應無法進行亞組分析；③在高加索人群中，10%～25%的患者為CCR5 wt/D32，這與已發表文獻一致[19]。

到目前為止，盡管CCR5-D32雜合性對HIV-1感染者HAART病毒學反應與免疫學反應的影響尚無定論，尚缺乏這方面相關的meta分析文章，但重要的是沒有文獻提出CCR5 wt/D32的劣效性。Kasten等[13]認為，在基線HIVRNA、CD4+T計數沒有統計學差異的前提下，CCR5 wt/D32雜合性人群病毒學反應與免疫學反應均較高。而Brumme等認為，單變量分析表明CCR5 wt/D32雜合性人群病毒學反應較高，但調整基線因素如依從性等的多元回歸分析差異無統計學意義[8]。本文研究結果，即CCR5 wt/ D32人群對HAART病毒學反應較高，可能與NSI/R5轉換SI/X4的過程延緩以及細胞表面CCR5與嗜淋巴細胞受體4[chemokine（C-X-C motif）receptor 4，CXCR4]表達同時減少有關[20]。CCR5 wt/D32人群對HAART的病毒學反應較高，該聯系一方面體現在至少1年的觀察期，揭示了CCR5 wt/D32這一宿主因素有利于HAART后的持久病毒學應答。另一方面體現在稍高的HIV RNA檢測門檻，揭示CCR5 wt/D32這一宿主因素有利于HAART后HIV儲存庫衰減緩慢患者的病毒學抑制[21]。新近研究表明，CCR5 wt/D32人群由于HIVRNA轉錄受到抑制，HIV儲存庫復制水平較低[22]。需要指出：①在本研究中，病毒學反應與初治或經治無關，這與先前文獻不一致[23]；該文獻指出經治患者SI/X4增強，可能降低CCR5 wt/D32這一宿主因素的有利作用；②在本研究中，病毒學反應與HAART方案（PI方案或各種方案）無關，與先前文獻不一致[24]，該文獻指出PI方案聯系著更高的病毒學應答。

雖然樣本量偏小及回顧性的meta分析可能使本研究存在一定限制，但本研究卻首次針對CCR5-D32雜合性對HIV-1感染者HAART病毒學反應與免疫學反應影響進行meta分析，且根據納入標準，納入文獻的質量得到了保證。數據提取、分析的準確性也得到了保證。敏感性分析與出版偏倚評價保證了統計結果的可靠性。

綜上所述，CCR5-D32這一宿主因素是HAART后病毒學應答的有利預測因子。CCR5-D32這一宿主因素與HAART后免疫學應答也有一定聯系，但需更多文獻加以證實。

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（張蕾編輯）

Effects of CCR5-D32 heterozygosity on virological and immunological responses to highly-active antiretroviral therapy in HIV-1-infected patients:a meta-analysis

Ying Wen,Bao-cheng Deng,Pei Liu
(Department of Infectious Diseases,the First Affiliated Hospital,China Medical University,Shenyang,Liaoning 110001,China)

Abstract:Objective To evaluate the effect of C-C chemokine receptor 5-D32 (CCR5-D32) heterozygosity of HIV-1-infected patients on the virological and immunological responses to highly-active antiretroviral therapy (HAART).Methods A literature search on the articles published before October 1,2015 was conducted in the PubMed,Web of Science and China Biology Medicine databases.Results Eleven studies on virological response and only four studies on immunological response were eligible for inclusion.Populations with CCR5-D32 heterozygosity had stronger virologicaland immunological1.04-1.31；P = 0.009) responses to HAART.There was a significant association between CCR5-D32 heterozygosity and stronger virological response in studies that involved at least one year of observation and a high threshold of detection for HIV RNA.Due to an insufficient number of eligible studies,further subgroup analyses of immunological responses could not be performed.Conclusions Stronger virological response has been found in the populations with CCR5 -D32 heterozygosity.The association of CCR5 -D32 heterozygosity with immunological response still needs further confirmation.

Keywords:CCR5-D32 heterozygosity; highly-active antiretroviral therapy; virological response; immunological response; meta-analysis

[通信作者]聞穎，E-mail：wenying666466@163.com；Tel：15840210638

收稿日期：2015-11-17

文章編號：1005-8982（2016）06-0069-06

DOI:10.3969/j.issn.1005-8982.2016.06.015

中圖分類號：R512.91

文獻標識碼：B