葛根解酒膠囊對小鼠急性酒精中毒的預防及治療作用

嚴橋路　尹雪艷　徐立

(1.大理大學臨床醫學院，云南 大理　671000；

2.大理大學基礎醫學院，云南 大理　671000)

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葛根解酒膠囊對小鼠急性酒精中毒的預防及治療作用

嚴橋路1尹雪艷1徐立2△

(1.大理大學臨床醫學院，云南 大理671000；

2.大理大學基礎醫學院，云南 大理671000)

摘要目的：探討葛根解酒膠囊對急性酒精中毒小鼠的預防及治療作用。方法：“跳樓試驗”：選昆明小鼠30只，隨機分為三組，每組10只，對照組：給予50%酒精0.2 ml·10g(-1)灌胃；藥物治療組：給予濃度為12 mg·ml(-1)的葛根解酒膠囊溶液0.2 ml·10g(-1)灌胃，1 h后各只給予50%酒精0.2 ml·10g(-1)灌胃；非藥物治療組：給予生理鹽水0.2 ml·10g(-1)灌胃，1 h后各只給予50%酒精0.2 ml·10g(-1)灌胃；10 min后將小鼠放到單桿上，觀察并記錄小鼠在單桿上停留的時間。水迷宮試驗：經過水迷宮訓練的昆明小鼠30只，隨機分為3組，對照組：50%的酒精0.2 ml·10g(-1)灌胃，20 min之后投入水迷宮；藥物治療組：50%的酒精0.2 ml·10g(-1)灌胃，10 min后濃度為12 mg·ml(-1)葛根解酒膠囊溶液0.2 ml·10g(-1)腹腔注射，再過10 min后把小鼠投入水迷宮；非藥物治療組：50%的酒精0.2 ml·10g(-1)灌胃，10 min后生理鹽水0.2 ml·10g(-1)，腹腔注射，再過10 min后把小鼠投入水迷宮，記錄小鼠投入水迷宮后能否找到并爬上平臺的只數，并記錄其平均游泳速度。結果：藥物治療組維持平衡時間(266.9 ± 52.4 s)明顯長于非藥物治療組(173.5 ± 74.1 s)和對照(155.8 ± 54.8 s)(P < 0.01)；葛根解酒膠囊能夠促進小鼠找到平臺(P<0.05)，藥物治療組小鼠的游泳速度(17.2± 9.4 cm·s(-1))比非藥物治療組(8.02± 4.8 cm·s(-1))及對照組(7.01±4.1 cm·s(-1))快(P<0.05)。結論：葛根解酒膠囊對急性酒精中毒有一定預防及治療作用。

關鍵詞：葛根解酒膠囊；急性酒精；預防及治療作用

目前，我國對葛根資源的應用主要體現在以下幾個方面：除在影響酒精吸收代謝、抗氧化、保肝及保護中樞神經系統、心血管疾病方面，還作為中藥入藥，作為蔬菜食用，干燥葛根中提取的異黃酮類化合物制造的藥物制劑，以及從鮮葛中提取淀粉。此外，葛根的開發產品還有葛根解酒酸奶、葛根口香糖、葛根果凍、葛根功能飲料等，但暫未形成規模。由此可看出，對于葛根資源的開發利用還處于初級階段，沒有形成系列產品，經濟效益較低；另制藥和淀粉生產過程相互分離，對葛葉、葛莖開發少等。這都造成了葛根資源在一定程度上的浪費[1-3]。

隨著生活水平的日益提高，酒精濫用和酒精成癮的人群日益增多，酒精濫用是一個公共健康問題已經引起社會廣泛關注。因大量飲酒導致急性或者慢性肝損傷[4]，導致各種神經精神性腦病，如酒精中毒性腦病等。這些問題嚴重影響了人們的身體健康和生活水平。本研究目的是為了探討葛根解酒膠囊對于急性酒精中毒小鼠的預防及治療作用。為把葛根的解酒療效更好的應用于臨床提供基本數據和依據。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1藥品與試劑

濃度為12 mg·ml-1的葛根解酒膠囊溶液(其成分為葛根提取物、蒸餾水，由大理大學院藥物與化學學院提供)，實驗用酒(茅糧小清香型白酒酒精度50%vol DB53/T092)。Morris水迷宮視頻跟蹤分析系統，(成都秦盟科技有限公司)。

1.1.2動物

昆明小鼠，雄性，體重18-22 g，由大理大學實驗動物中心提供。

1.2方法

1.2.1建立模型

選昆明小鼠30只，通過預實驗結果，選取0.2 ml·10g-1，作為醉酒實驗劑量，進行模型建立。根據相關葛根素藥代謝動力學相關數據，小鼠靜脈注射葛根素的LD50是738 mg·kg-1，靜脈注射葛根素期藥代動力學過程符合開放二室模式，t1/2α=10.3 min，t1/2β=74 min，平均滯留時間為74 min[5]，將葛根解酒膠囊溶液配成濃度為12 mg·ml-1的溶液，給藥劑量定為0.2 ml·10g-1。

1.2.2小鼠“跳樓試驗”

另選昆明小鼠30只，隨機分為三組，每組10只：對照組：給予50%酒精0.2 ml·10g-1灌胃，藥物治療組：給予濃度為12 mg·ml-1的葛根解酒膠囊溶液0.2 ml·10g-1灌胃，1 h后各只給予50%酒精0.2 ml·10g-1灌胃，非藥物治療組：給予生理鹽水0.2 ml·10g-1灌胃，1 h后各只給予50%酒精0.2 ml·10g-1灌胃，10 min后將小鼠放到單桿上，觀察并記錄小鼠在單桿上停留的時間。

1.2.3小鼠Morris水迷宮實驗(定位航行實驗)

再另選昆明小鼠30只，進行水迷宮訓練，記錄小鼠投入水迷宮后找到并爬上平臺(四肢均爬上平臺且停留時間>5 s)的時間，此為定向實驗逃避潛伏期。以此來評價空間學習和記憶鞏固能力,每次觀察時間為120 s如果在120 s內未能找到平臺，則由實驗者引導至平臺，潛伏期記為120 s。每天訓練四次，訓練逃避潛伏期的平均數作為當天的成績進行統計。連續訓練5天，每天時間相同，分別從四個象限投入。第6天把小鼠隨機分為3組：對照組：50%的酒精0.2 ml·10g-1灌胃，20 min之后投入水迷宮；藥物治療組：50%的酒精0.2 ml·10g-1灌胃，10 min后濃度為12 mg·ml-1葛根解酒膠囊溶液0.2 ml·10g-1腹腔注射，再過10 min后把小鼠投入水迷宮；非藥物治療組：50%的酒精0.2 ml·10g-1灌胃，10 min后生理鹽水0.2 ml·10g-1，腹腔注射，再過10 min后把小鼠投入水迷宮，記錄小鼠投入水迷宮后能否找到并爬上平臺(四肢均爬上平臺且停留時間>5s)的只數，并記錄其平均游泳速度。

1.3統計學處理

2結果

2.1“跳樓試驗”

葛根解酒膠囊對非藥物治療組、對照組、藥物治療組小鼠平衡調節的影響，出現平衡失調現象的平均時間見表1，結果提示，葛根解酒膠囊能夠增加酒精中毒小鼠停留在單杠上的平衡時間(P<0.01)。

表1　“跳樓實驗”葛根解酒膠囊對小鼠平衡時間的影響(X±SD，n=10)

注：與非藥物治療組比較，*P < 0.01。

2.2Morris水迷宮實驗(定位航行實驗)

葛根解酒膠囊對非藥物治療組、對照組、藥物治療組小鼠空間定向的影響結果見表2。從表2可看出，藥物治療組小鼠的游泳速度比非藥物治療組和對照組快(P<0.05)，非藥物治療組與對照組的比較沒有統計學意義。實驗結果提示，葛根解酒膠囊能夠增加酒精中毒小鼠的游泳速度。從小鼠找到平臺的只數的百分比來看，葛根解酒膠囊能增加小鼠找到平臺的數量(P<0.05)。

表2　小鼠找到平臺只數及游泳速度(n=10)

注：與非藥物治療組比較，*P < 0.05。

3討論

葛根異名甘葛、粉葛，為豆科植物葛(野葛)Pueraria lobata(Willd.)Ohwi的干燥根，習稱“柴葛”。葛根含有多種有效成分，主要為黃酮類化合物達12%：大豆甙元、大豆甙及葛根素等[6]。葛根作為中國傳統醫學中最具代表性的解酒藥物之一，具有解酒防醉、改善心腦血管循環、降低心肌耗氧量，降低血糖、血脂，防止高血壓及動脈硬化，抗肝臟毒，抗炎，祛痰，解熱，提高機體免疫力，抗菌，抗腫瘤作用抗病毒等多種藥理作用[7-10]。可見，葛根用途廣泛，對各個系統疾病都要一定的治療、改善作用，其臨床實用價值研究意義深遠。

有關葛根解酒作用的藥理研究主要是：抑制酒精自主攝入、增加乙醇耐受 、降低血液乙醇濃度、影響酒精代謝，葛根通過對抗乙醇代謝中起主要作用的乙醇脫氫酶活性減低的作用，有利于乙醇在體內的分解代謝，從而可以解酒毒。對中樞神經系統的保護作用對中樞神經系統興奮與抑制過程的影響也是解酒的重要途徑之一[11]。

本實驗用酒精度為50%vol茅糧小清香型白酒復制小鼠急性酒精中毒的模型，白酒灌胃致小鼠急性酒精中毒時，明顯地抑制中樞神經系統，全部醉倒。有研究證明酒精中毒可造成肝臟損傷[12]。急性酒精中毒是由于血液中的過高濃度的乙醇短時間內大量進入腦內，通過邊緣系統、小腦、網狀結構到延髓，抑制中樞神經系統，出現昏睡、平衡失調等相應的臨床癥狀，同時還可能損害心肌、影響代謝、肝功能等[13]。有研究表明葛根素對飲酒后小鼠體內氧化反應有明顯的拮抗作用[14]，葛根素可減少嗜酒大鼠的酒精攝入量，改善酒精中毒神經系統癥狀作用[ 15]。Morris水迷宮法是目前廣泛用于研究動物學習、記憶、空間定向和認知能力的理想方法[16]。“跳樓實驗”是研究酒精中毒對小鼠平衡失調的影響。實驗結果發現，葛根解酒膠囊對急性酒精中的小鼠平衡失調有一定的改善作用，Morris水迷宮定位航行實驗測試結果提示葛根解酒膠囊對急性酒精中毒小鼠空間定向能力有一定改善作用。綜上所述，葛根解酒膠囊對急性酒精中毒致小鼠平衡失調、空間定向能力有一定改善作用。急性酒精中毒、酒精依賴是當今社會問題之一，特別是因酒精中毒引起的慢性器官功能損傷缺乏有效的治療方法。中醫藥是我國醫學的一項長處, 研究這些中草藥的有效成分用于治療各系統疾病是很有希望的。葛根有效成分提取技術日益成熟。用于治療酒精中毒具有明顯的優越性及廣闊的發展前途。本實驗由于樣本量過少，在進行水迷宮實驗中找到平臺小鼠數量無法進行統計學分析，只能通過百分比進行粗略比較，為大量本研究提供一定的依據。

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Prevention and treatment effects of puerariae anti-inebriation capsule on acute alcohol intoxication mice

Yan Qiao-lu1, Yin Xue-yan1, Xu Li2△

(1.Clinical College, Dali University, Yunnan Dali 671000;2.Pre-Clinical College, Dali University, Yunnan Dali 671000)

AbstractObjective：To study the prevention and treatment effects of puerariae anti-inebriation capsule on mice with acute alcohol intoxication. Methods: Jump experiment: Thirty Kunming mice were randomly divided into three groups(n=10). Control group: each mouse was given 50% alcohol by intragastric administration(dosage, 0.2 ml·10g-1). Drug-treatment group: each mouse was fed with the solution of puerariae anti-inebriation capsule (concentration, 12 mg·ml-1, dosage, 0.2 ml·10g-1), then with 50% alcohol (dosage, 0.2ml·10g-1) after one hour by the way of intragastric administration. Non-drug treatment group: all mice were given normal saline (dosage, 0.2ml·10g-1), one hour later, fed with 50% alcohol (dosage, 0.2ml·10g-1) through the way as before. When finishing conductions of each group respectively, mice were put on a single pole after ten minutes, to observe the length of time the mice stay on the pole. Morris water maze experiment: Another thirty Kunming mice which have been trained with Morris water maze experiment were randomly divided into three groups (n=10). Control group: 50% alcohol (dosage, 0.2 ml·10g-1) was given to each mouse in this group by intragastric administration. Then the mice were launched to Morris water maze after twenty minutes. Drug-treatment group: first, all mice which were divided into this group were received 50% alcohol (dosage, 0.2 ml·10g-1) by intragastric administration. Second, they were treated with the solution of puerariae anti-inebriation capsule (concentration, 12 mg·ml-1, dosage, 0.2 ml·10g-1) by intraperitoneal injection ten minutes later. Third, they were launched to Morris water maze after another ten minutes. Non-drug treatment group: In this group, the mice were treated as the same way as drug-treatment group excepting the second step. At the second step, the mice of non-drug treatment group were only given normal saline (dosage, 0.2 ml·10g-1) by intraperitoneal injection ten minutes after the first step. In this experiment, we need to observe whether the mice could find and climb the platform or not, and the number of mice which successfully climb the platform, as well as the average speed of swimming. Results: In jump experiment, the time of staying balance of drug-treatment group (average time, 266.9±52.4 s) was obviously longer than non-drug treatment group (average time, 173.5±74.1 s) and control group (average time, 155.8±54.8 s) (P<0.01). In Morris water maze experiment, the number of mice which could find and climb the platform were significantly increased in drug-treatment group, as compared to control group. The average speed of swimming of drug-treatment (average speed, 17.2±9.4 cm·s-1) was faster than non-drug treatment group (average speed, 8.02±4.8 cm·s-1) and control group (average speed, 7.01±4.8 cm·s-1) (P<0.05). Conclusion: Puerariae anti-inebriation capsule has the prevention and treatment effect on acute alcohol intoxication to a certain degree.

Key Words:Puerariae anti-inebriation; Acute alcoholism; Prevention therapeutic action

(收稿日期：2015-11-19)

作者簡介：嚴橋路，男，住院醫師，研究生，Email：490549939@qq.com。△通訊作者：徐立，男，副教授，主要從事葛根對酒精中毒的防治研究，Email：dalixuli@163.com。