方 偉
(首都醫科大學附屬北京地壇醫院檢驗科,北京 100015)
?
·經驗交流·
抗凝劑對C反應蛋白檢測結果的影響研究
方偉
(首都醫科大學附屬北京地壇醫院檢驗科,北京 100015)
摘要:目的分析抗凝劑種類對C反應蛋白(CRP)檢測結果的影響。方法隨機選取門診和住院患者120例,同時采集患者肝素和乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝標本,在相同條件下,采用邁瑞BC-5390分析儀進行兩種全血標本CRP濃度檢測,比較檢測結果間的差異。結果兩種抗凝標本CRP檢測結果具有相關性,但肝素抗凝標本對CRP低、中、高值標本的檢測結果均低于EDTA-K2抗凝標本(P<0.05)。結論肝素抗凝標本不適用于邁瑞BC-5390分析儀CRP檢測。
關鍵詞:乙二胺四乙酸鹽;肝素;C反應蛋白
C反應蛋白(CRP)屬于急性時相反應蛋白之一,對微生物具有直接及輔助清除作用,是用于細菌感染早期診斷和鑒別診斷的主要指標[1]。在臨床檢驗中抗凝劑的使用非常普遍,且不同檢測系統及項目都有與之相應的抗凝劑,而不同抗凝劑對檢測項目的影響不同[2]。CRP檢測標本多以肝素作為抗凝劑,血液學檢測標本則多以乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)作為抗凝劑。在日常工作中,經常出現1份標本加做項目和抗凝劑使用混淆的情況。本研究以肝素和EDTA-K2抗凝標本分別進行CRP檢測,并對檢測結果進行比較分析,旨在探討兩種抗凝劑抗凝標本對CRP檢測結果的影響,評價不同抗凝標本能否通用。
1材料與方法
1.1標本來源隨機選取2015年5~6月門診和住院患者120例,男58例,女62例,均采集晨起空腹靜脈血標本,分別采用肝素及EDTA-K2抗凝。
1.2方法標本采集后2 h內,采用邁瑞BC-5390分析儀及配套試劑對采集的肝素及EDTA-K2抗凝全血標本進行CRP檢測,嚴格按儀器、試劑盒說明書操作。參照美國臨床和實驗室標準化協會(CLSI)EP9-A2文件的要求,在室內質控在控、儀器正常運轉和試劑在效期內的條件下進行檢測[3]。每份標本平行檢測3次,計算均值。本研究采用的邁瑞BC-5390分析儀參加衛計委臨床檢驗中心CRP檢測室間質評,結果準確可靠,可以接受。

2結果
120例標本中,檢出CRP異常值標本78例,正常值標本42例。按CRP濃度分為低、中、高值標本。統計學分析結果顯示,在CRP各濃度范圍內,與EDTA-K2抗凝標本相比,肝素抗凝標本CRP檢測結果降低,且比較差異有統計學意義(P<0.05),見表1。以肝素抗凝標本結果為Y軸,以EDTA-K2抗凝標本檢測結果為X軸,繪制回歸直線,并計算回歸方程。直線回歸方程及相關性,見圖1~3。

表1 不同抗凝標本CRP檢測結果比較

圖1 低值標本CRP檢測結果相關性(Y=0.926 8X-

圖2 中值標本CRP檢測結果相關性(Y=0.999 8X-

圖3 高值標本CRP檢測結果相關性(Y=0.990 5X-
3討論
對于CRP低值標本而言,肝素與EDTA-K2抗凝標本檢測結果偏倚較大,隨著CRP濃度增大,偏倚逐漸降低[4-5]。這是因為低濃度時,檢測結果較小,很小的差異即可導致較大的偏倚,隨著濃度增大,數值增大,差異所占比例相對降低,偏倚降低。本研究結果顯示,在其他條件相同的情況下,同一患者肝素抗凝全血標本CRP檢測結果低于EDTA-K2抗凝標本檢測結果,呈負偏倚傾向,表明采用邁瑞BC-5390分析儀進行肝素抗凝全血標本CRP檢測可能存在系統誤差。臨床通常以CRP<8 mg/L作為正常參考值。在低濃度范圍,肝素抗凝全血標本易出現CRP假陰性結果[6-7]。雖然兩種抗凝標本CRP檢測結果相關性良好,但為了保證結果可靠性,筆者不建議在采用邁瑞BC-5390分析儀進行肝素抗凝全血標本CRP檢測。
邁瑞BC-5390分析儀采用膠乳試劑免疫比濁法的原理檢測CRP,通過紅細胞壓積、白細胞壓積和血小板壓積的實測值校正CRP檢測結果[計算公式為:CRP=CRP定標曲線計算值/(1-BCT%),BCT為白細胞壓積、紅細胞壓積、血小板壓積之和],以確保全血與血清標本CRP檢測結果一致,提高了結果準確性,優于床旁檢驗(POCT)分析儀。
進行血常規檢測時,不同抗凝劑對白細胞計數結果幾乎無影響,對紅細胞壓積檢測結果也影響較小[8-9]。目前血常規檢測廣泛使用的抗凝劑是國際血液學標準化學會(ICSH)推薦的EDTA-K2。EDTA-K2可有效結合血液中的鈣離子,通過膜離子通道進入血小板內[10-11]。ETDA-K2對鈣離子的螯合作用強于枸櫞酸鈉,能更好地防止血小板受各種因素影響而發生的凝集,對血小板計數影響較小,有較好的穩定性[12-13]。此外,EDTA-K2血細胞有很好的保護作用[14]。因此,采用邁瑞BC-5390分析儀檢測EDTA-K2抗凝全血標本CRP水平,結果更加準確。肝素主要通過抑制凝血活酶與凝血酶的形成[15],同時激活纖溶酶而發揮抗凝作用。肝素可引起血小板聚集及腫脹,肝素過量可破壞血小板,對血小板檢測結果影響較大[16-17]。因此,采用校正公式進行計算時,肝素抗凝全血標本CRP檢測結果低于EDTA-K2抗凝標本檢測結果,出現系統誤差和假陰性結果。
本研究證實,邁瑞BC-5390分析儀對不同抗凝劑抗凝標本的CRP檢測結果有所差異。因此,在開展新項目、使用新儀器時,應注意抗凝劑的選擇,避免因儀器和方法學的改變而用錯抗凝劑。護士在采集外周血標本時,應根據檢驗項目使用正確的抗凝管,做好分析前質量控制工作。在具體工作中,更應嚴格根據檢測系統的要求使用相應的抗凝標本,不能交叉使用或者一管多用,以保證檢測結果的準確性。
綜上所述,EDTA-K2與肝素的抗凝機制不同,對血細胞的影響不同,導致邁瑞BC-5390分析儀對不同抗凝劑抗凝標本的CRP檢測結果存在差異。采用肝素抗凝全血標本對邁瑞BC-5390分析儀CRP檢測結果影響較大。不同的儀器、方法學、檢測項目應根據各自的要求使用相應的抗凝劑,不能隨意更換抗凝劑種類,以保證檢測結果的準確性。
參考文獻
[1]黃苑.C-反應蛋白和血常規聯合檢測在兒科疾病中的應用價值[J].大家健康,2013,7(6):52-53.
[2]于建梅.臨床中不合格的血液標本原因分析及預防措施[J].當代醫學,2010,16(3):84.
[3]Clinic and Laboratory Standards Institute.EP9-A2 Method comparison and bias estimation using patient samples;approved guideline,second edition[S].Wayne,PA,USA:CLSI,2002.
[4]杜婷,藏小晴.i-CHROMA分析儀測定CRP及hs-CRP兩種抗凝劑應用比較[J].中國保健營養,2013,23(5):25-28.
[5]楊晶,何俊民.C-反應蛋白質控品的制備及應關注的問題[J].檢驗醫學,2007,22(6):711-714.
[6]張廣梅.低分子肝素降低糖尿病腎病患者的尿清蛋白及C-反應蛋白[J].牡丹江醫學院學報,2013,34(4):39-41.
[7]戴有功.依達拉奉聯合低分子量肝素鈣治療急性腦梗死的療效觀察及對血清C反應蛋白的影響[J].中國醫師進修雜志,2012,35(9):67-69.
[8]方蓉,黃宇烽,鄭均,等.抗凝劑濃度不同血液的血細胞計數儀分析結果[J].臨床檢驗雜志,2001,19(2):105-106.
[9]許德英,常永超,張淑珍,等.4種抗凝劑對血液分析儀計數結果的影響[J].洛陽醫專學報,2001,19(2):156-157.
[10]范亞敏,張立紅,李鳳俠,等.應用乙二胺四乙酸二鉀抗凝劑引起血小板假性減少14例分析[J].河北醫學,2011,17(9):1242-1244.
[11]王東江.低分子肝素治療急性冠狀動脈綜合征的臨床效果及對C反應蛋白的影響[J].白求恩醫學雜志,2015(1):82-83.
[12]孫楊.抗凝劑EDTA致PLT假性減少[J].檢驗醫學與臨床,2008,5(8):504.
[13]馬雙雙,王紅艷,楊俊.血常規檢驗的質量控制與注意事項[J].重慶醫學,2009,35(18):1694-1695.
[14]彭賢貴,王平,劉思恒.做好骨髓細胞形態學檢驗室內質量控制要素分析及改進[J].檢驗醫學與臨床,2010,2(4):309-310.
[15]張盼盼,韓曉慶,王紅陽,等.普通肝素對感染性休克患者血清降鈣素原及高敏C反應蛋白的影響[J].中國現代醫學雜志,2015,25(29):88-90.
[16]馬雨東.血細胞分析儀測定血小板時抗凝劑等影響因素分析[J].檢驗醫學與臨床,2010,7(11):189-191.
[17]李大鵬,呂丹,李震,等.不同血液保存抗凝劑對采集紅細胞影響的實驗研究[J].醫學信息,2014,14(2):60-61.
(收稿日期:2015-12-13)
DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.052
文獻標識碼:B
文章編號:1673-4130(2016)06-0829-03