泰山赤靈芝多糖提取物對骨質疏松大鼠骨量的影響

葛凡，葛孚章

( 1．泰安市第一中學，山東泰安271000; 2．泰山醫學院運動醫學研究所)

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泰山赤靈芝多糖提取物對骨質疏松大鼠骨量的影響

葛凡1，葛孚章2*

( 1．泰安市第一中學，山東泰安271000; 2．泰山醫學院運動醫學研究所)

摘要目的:研究泰山赤靈芝多糖提取物對去卵巢雌性Wistar大鼠全身骨大小及骨量的影響。方法:選用4月齡雌性Wistar大鼠50只，隨機分為5組，10只為正常對照組，40只大鼠去除雙側卵巢，其中30只分別注射不同劑量( 10 g/kg，5 g/kg，1 g/kg)的泰山赤靈芝多糖提取物，剩余10只為模型組。實驗結束后，取大鼠右股骨進行骨大小、骨量的測定。結果:去卵巢大鼠骨大小、骨量均低于正常對照組;但給予泰山赤靈芝多糖提取物干預后，骨大小、骨量均較模型組增加。結論:泰山赤靈芝多糖提取物具有抑制骨量丟失、預防骨質疏松的良好作用。

關鍵詞骨質疏松;泰山赤靈芝多糖提取物;骨量;骨大小

骨質疏松癥是主要發生在絕經后婦女和老年人中的一種代謝性骨病。隨著我國人口的老齡化，骨質疏松癥發病率日益增高，它的的高致殘率和高病死率，嚴重威脅著中老年人的健康，對于它的防治是全社會關注的問題。

泰山赤靈芝是著名的泰山特產，為我國醫藥寶庫中的珍品，《本草綱目》記載它具有“堅筋骨、利關節”的功效［1］，如果實驗研究能證明泰山赤靈芝確實能夠改善骨質疏松癥，重視它的藥用、市場價值，對其開發、保護具有重要意義。

1　材料與方法

1.1實驗動物及儀器實驗動物: 4月齡雌性Wistar大鼠60只，體重200～250 g，購于泰山醫學院動物中心。

主要儀器:電子分析天平(上海FA1104B)、電子透射電鏡(日本日立H-9500)。

1.2制備泰山赤靈芝多糖提取物( Taishan Ganoderma lucidum Extract，TGLE)按參考文獻［2］采用水提法從泰山赤靈芝中制備提取物，采用蒽酮法［3］測定TGLE中靈芝多糖含量為20%。

1.3分組及骨質疏松模型的建立將實驗大鼠隨機分為5組:正常對照組、橫型組、TGLE高劑量組、TGLE中劑量組、TGLE低劑量組。

骨質疏松模型的建立［4］:除正常對照組外，所有大鼠均用戊巴比妥鈉( 40 mg/kg)腹腔內注射麻醉，除正常對照組單純開腹手術外，其他組在無菌條件下切除雙側卵巢，羊腸線縫合，為預防感染，在切口縫合時敷少量青霉素粉，術后2萬單位青霉素注射1次。

1.4干預術后第2天，稱取TGLE高劑量組、中劑量組、低劑量組的Wistar大鼠的體重，每只大鼠腹部皮下注射TGLE滅菌生理鹽水溶液，高劑量組10 mg/kg體重，中劑量組5 mg/kg體重，低劑量組1 mg/kg體重;各組每日定量喂食，飲用水量不限。室溫( 25±2)℃，相對濕度( 45±10) %，保持良好通風。

1.5評價指標各組大鼠分別于實驗后第12周末行動脈放血處死，摘取右股骨，測量骨大小及骨量。體重:每只大鼠動脈放血處死前稱其體重。骨長度:用游標卡尺量取右股骨的長度。骨直徑:分別于右股骨的近端1/3點、中點、遠端1/3點，用游標卡尺量取其最大外徑及最小外徑，將6個數值相加后平均，作為骨直徑的數值。骨體積:用阿基米德( Archimedes)原理測量右股骨的體積。骨濕重:右股骨剝凈軟組織后，即置于1/ 100 000分析天平上稱其質量。骨干重:右股骨剝凈軟組織后置烤箱中于110℃下烤48 h至恒重，于1/100 000分析天平上稱骨干重。

1.6統計學方法計量資料采用均數±標準差( x ±s)表示，數據分析采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

實驗過程中無大鼠死亡。模型組的骨直徑和骨體積較正常對照組降低( P＜0.05) ;骨長度、骨濕重、骨干重較正常對照組明顯降低( P＜0.01)，說明去卵巢可使大鼠的骨大小和骨量下降。見表1。

TGLE高劑量組、中劑量組、低劑量組的骨直徑和骨體積較模型組增加( P＜0.05) ;骨長度、骨濕重、骨干重較去卵巢組明顯增加( P＜0.01) ;與正常對照組比較，上述各指標差異均無統計學意義( P＞0.05)。見表1。

TGLE高劑量組、中劑量組、低劑量組在骨直徑、骨體積、骨長度、骨濕重、骨干重方面差異有統計學意義( P＜0.05)，見表1。

表1　TGLE不同劑量注射對骨大小和骨量的影響(±s)

表1　TGLE不同劑量注射對骨大小和骨量的影響(±s)

注:與正常對照組比較，1)P＜0.05，2)P＜0.01;與模型組比較，3)P＜0.05，4)P＜0.01;與高劑量比較，5)P＜0.05

組別　　體重( g)骨長度( mm)骨直徑( mm)骨體積( cm3)骨濕重( mg)骨干重( mg)正常對照組　326.47±17.21　 37.54±1.24　3.90±0.15　0.72±0.09　781.47±24.31　 574.76±23模型組　325.47±15.33　 37.45±1.232)　3.73±0.191)　0.67±0.111)　731.47±24.222)　514.76±23.312)高劑量組　326.23±11.24　 37.53±1.194)　3.88±0.073)　0.71±0.083)　777.47±24.194)　569.52±23.404)中劑量組　325.91±19.13　 37.51±1.144) 5)　3.86±0.133) 5)　0.70±0.123) 5)　762.47±24.274) 5)　564.63±234) 5)低劑量組　325.74±13.19　 37.49±1.094) 5)　3.81±0.073) 5)　0.69±0.053) 5)　760.47±24.174) 5)　551.77±23.224) 5)

3　討論

骨質疏松癥一般發病緩慢，早期無明顯臨床表現，隨著病情進展逐漸出現腰背疼痛、身長縮短、駝背、骨折、呼吸功能下降等癥狀［5］，嚴重威脅患者的正常生活質量，需積極進行治療。骨質疏松癥及其并發癥，正成為亟待解決的現實問題。

《本草綱目》中記載:靈芝性溫、味甘、微苦，有益心氣、生血、助心安神、益肺氣、堅筋骨、利關節、安神補肝等多種功能［1］，現在被國際醫學界公認為最理想的人體整體平衡的調節劑，現代科學研究表明，靈芝含有多糖、多種氨基酸、甾類、三萜類、生物堿、有機酸、甘露醇等多種生物活性物質，最近的研究表明靈芝多糖有廣泛免疫調節、抗氧化、降血脂、神經細胞保護等藥理活性，具有成為治療骨質疏松癥的潛在能力［6－7］。

本研究從骨大小及骨量2個方面檢測，能夠較完整顯示TGLE在不同劑量時對骨質疏松癥的治療效果。表1數據對比可以發現TGLE高劑量組效果最好，并且稍微優于TGLE中劑量組、TGLE低劑量組，但明顯高于模型組，說明TGLE對大鼠骨質疏松模型有良好的治療作用;其中應用高劑量TGLE，治療骨質疏松癥效果最佳。

本實驗初步表明，TGLE對大鼠激素性骨質疏松具有促進其骨生成作用，可有效治療激素性骨質疏松，對于它的臨床應用、開發研究提供重要的參考數據。TGLE治療骨質疏松癥的作用機理，有待進一步深入研究。

參考文獻:

［1］李時珍．《本草綱目》(校點本)［M］．2版．北京:人民衛生出版社，2005: 1985－912．

［2］李兆蘭，鄭濤．靈芝菌絲體和發酵液有效成分及含量分析［J］．中草藥，1994，25 ( 1) : 17－19．

［3］汪沛洪．基礎生物化學實驗指導［M］．西安:陜西科學技術出版社，1986: 16－182．

［4］鄧軒賡，陳建庭，查丁勝．低強度復合振動治療去卵巢老齡大鼠骨質疏松實驗研究［J］．中國運動醫學雜志，2011，30 ( 3) : 265－269，274．

［5］常志芳，馮成龍，史曉霞，等．免疫與骨質疏松的研究進展［J］．中國骨質疏松雜志，2015，( 21) 4: 508－513．

［6］張維珂，黃文建，崔長松，等．泰山赤靈芝對提高運動員大強度訓練中的免疫機能預防運動性疾病的實驗研究［J］．體育科技文獻通報，2014，22 ( 7) : 116－117．

［7］董少斌．補充番茄紅素對籃球運動員大強度訓練后免疫機能的影響［J］．北京體育大學學報，2008，31 ( 3) : 351－352，358．

(吳迪編輯)

Effect of Taishan Red Ganoderma Lucidum Extract on Bone Mass in Rats with Osteoporosis

GE Fan1，Ge Fuzhang2*
( 1．Middle School of Tai'an，Tai'an 271000，China; 2．Institute of Sports Medicine，Taishan Medical University)

AbstractObjective: To study the effect of Taishan red ganoderma lucidum extract ( TGLE) on bone size and bone mass in the whole body of ovariectomized female Wistar rats．Methods: A total of 50 female Wistar rats were randomly divided into 5 groups．There were 10 in normal control group．And bilateral ovaries in 40 rats were removed，30 of which were injected with different doses ( 10 g/kg，5 g/kg，1 g/kg) of TGLE，and the remaining 10 were the control group．The bone size and bone mass of the right femur were measured after the experiment．Results: The bone size and bone mass in ovariectomized rats were lower than those in normal control group，but the bone size and bone mass were increased by TGLE．Conclusion: TGLE have good effect in inhibiting bone loss，preventing osteoporosis．

Key wordsosteoporosis; Taishan red ganoderma lucidum extract; bone mass; bone size

收稿日期2015－06－29

通訊作者葛孚章( 1971—)，男(漢)，副教授，研究方向:運動醫學．E-mail: gefuzhang@ 163.com

基金項目泰安市2012年科技發展計劃課題( No.20123052)

doi:10.16753/j.cnki.1008－2344.2016.01.006

中圖分類號R681

文獻標識碼A

文章編號1008－2344( 2016) 01－0021－02