T-SPOT．TB在骨與關節結核鑒別診斷中的價值*

苗瑞瑞，張文龍，鮑玉成，邱南海，高　巍

(1．天津中醫藥大學; 2．天津市海河醫院，天津　300350)

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T-SPOT．TB在骨與關節結核鑒別診斷中的價值*

苗瑞瑞1，2，張文龍2，鮑玉成2，邱南海2，高巍2

(1．天津中醫藥大學; 2．天津市海河醫院，天津300350)

摘要:目的:探討結核感染T細胞斑點實驗(T-SPOT．TB)在骨與關節結核鑒別診斷中的應用價值。方法:通過收集我院骨科2012年3月至2015年6月收治的骨結核患者及非骨結核的骨質破壞患者，統計T-SPOT．TB結果的靈敏度、特異度、假陽性率、假陰性率，同時統計結核抗體上述指標作為對比參考。結果:在本組病例中TSPOT．TB試驗靈敏度為91．36%，特異度為100%，經統計學處理P＜0．05，T-SPOT．TB檢測優于結核抗體檢查。結論: T-SPOT．TB檢測法對肺外結核病診斷特異性高，對于骨與關節結核病的診斷意義重大，不失為一種可靠的檢查手段，但目前價格較貴，不建議作為結核病常規篩查，應該應用于疑難病例的鑒別診斷中。

關鍵詞:T-SPOT．TB;骨結核;鑒別診斷

骨與關節結核是較為常見的肺外結核，其早期臨床表現缺乏特異性，誤診和漏診常見，患者常因錯過最佳治療時機而導致病情延誤，對患者的健康造成嚴重的損傷，致畸致殘率高［1］，目前尚沒有一種檢查手段可以快速、準確的做出診斷。結核感染T細胞斑點實驗(T-SPOT．TB)作為近年來一種新型的檢測手段廣泛應用于結核病的診斷中，本研究回顧我院骨科疑似骨與關節結核患者檢查T-SPOT．TB結果進行總結研究，評價T-SPOT．TB實驗在骨與關節結核鑒別診斷中的價值。

1　資料與方法

1．1一般資料通過收集、整理我院骨科2012年3月至2015年6月收治的骨質病理性破壞的患者共93例，其中男53例，女40例，年齡21～74歲。所有病例均已確診，其中85例術后病理檢查確診; 8例未手術患者根據癥狀、體征、影像學檢查、其他化驗檢查及抗結核藥物試驗性治療后確診。

1．2 T-SPOT．TB實驗本組病例均為晨起空腹抽外周靜脈血化驗檢查，采血后2 h內常規分離PBMC，在活化后預包被好抗IFN-γ抗體的平板中，每孔加入100 μL，每孔的細胞濃度為2×105cells。陰性對照孔中不加入任何刺激物。陽性對照孔加入5 μL植物血凝素(PHA)，終濃度為5 μg·mL－1。實驗孔分別加入結核特異抗原A(ESAT-6)和B(CFP-10)，終濃度為5 μg·mL－1。然后蓋上板蓋，放入37℃，5%CO2培養箱培養16～24 h。第2天洗板，加入檢測抗體孵育1 h。洗板后再加入親和素孵育1 h。最后加入顯色劑顯色。待顯色洗板后晾干，ELISPOT斑點計數。并記錄斑點的各種參數，做統計分析，A 或B任一個＞24 SFCs·10－6提示有結核病，判定為陽性結果;兩項結果均＜24 SFCs·10－6提示無結核感染，判定為陰性結果。

1．3評價指標將靈敏度、特異度、假陽性率和假陰性率作為診斷試驗臨床效果的評價指標;同時統計結核抗體檢查結果作為對比指標。

2　結果

2．1臨床確診結果此93例病例均為菌陰患者，肺部癥狀不明顯，無明顯咳嗽及咳痰。81例確診為骨結核，其中19例為關節結核，62例為脊柱結核; 5例確診為腰椎布氏桿菌性脊柱炎，7例確診為脊椎轉移瘤。

2．2 T-SPOT．TB試驗結果與最終確診結果比較

T-SPOT．TB試驗靈敏度為91．36%，特異度為100%，假陰性率為8．64%，假陽性率為0，約登指數為91．36%，見表1。

2．3結核抗體試驗結果與最終確診結果比較結核抗體試驗靈敏度為65．43%，特異度為83．33%，假陰性率為34．57%，假陽性率為16．67%，約登指數為48．76%，見表2。

表1　T-SPOT．TB試驗結果

表2　結核抗體試驗結果

3　討論

結核病是全球嚴重的公共衛生問題之一，據WHO估計，全球有約20億人感染結核分枝桿菌，每年有約200萬人死于結核［2］。近年來由于人口大規模流動，結核病的發病率有上升趨勢。結核菌可侵犯全身各個系統，導致臨床表現復雜多變，尤其是肺外結核常因病情隱匿或表現不典型，極易誤診漏診［3］。

機體感染結核分枝桿菌后，體內存在特異的效應T淋巴細胞，其在體外再次受到結核菌特異抗原的刺激時，會分泌釋放IFN-γ，通過檢測IFN-γ的水平或計數分泌IFN-γ的外周血單個核細胞(PBMC)，可以了解機體在感染結核分枝桿菌后的免疫應答狀態，從而發現結核分枝桿菌的潛伏感染、輔助診斷結核病。對于結核菌特異性抗原的選定是試驗中至關重要的，使用ESAT-6(早期分泌靶向抗原6 000蛋白early secretory antigenic target 6)和CFP-10(培養濾過蛋白10 culture filtrate proten 10)作為抗原，得到了較好的效果［4］。

近年來T-SPOT．TB檢查被大家越來越重視，文獻報道其靈敏度可高達89．0%和特異度高達98．1%［5］，對活動性結核病的診斷有很大價值。Mahairas等在1996年發現致病性結核分枝桿菌中一段名為“RD1”的基因編碼產生結核菌特異度抗原ESAT-6和CEP-10的編碼基只因存在于致病性分枝桿菌中，而不存在于大多數環境分枝桿菌和卡介苗中，因此酶聯免疫斑點試驗的特異度較高，不受大多數環境分枝桿菌感染和卡介苗接種的影響［6］。同時文獻表明血T-SPOT．TB試驗在艾滋病合并肺結核患者中敏感性及特異性較高，臨床上對疑似肺結核的艾滋病患者進行T-SPOT．TB檢測有利于疾病診斷及鑒別診斷［7］，提示T-SPOT．TB試驗受機體免疫力影響很小。本組病例提示T-SPOT．TB特異性高達100%，可能與非結核病例較少有關，但與文獻報道相近，誤診率極低。靈敏度僅為91．36%，從而提示漏診率很低。同時對比兩種檢測方法，TSPOT．TB檢查在靈敏度、特異度、約登指數方面均優于結核抗體實驗，說明T-SPOT．TB檢查對骨與關節結核鑒別診斷有很大幫助。

骨結核的診斷目前尚無一種特異性檢查能完全確診，骨結核的診斷與鑒別診斷要結合癥狀、體征、影像學檢查、化驗檢查、流行病學檢查綜合考慮，特別是不能忽略病史及查體，結合CT及MRI表現，大部分患者可得到正確診斷，部分患者經試驗性抗結核藥物治療可確診，T-SPOT．TB是一項新型的檢查手段，對骨與關節結核疑難病例鑒別診斷意義重大，

但價格較貴，不建議作為常規檢查。同時T-SPOT．TB是一種定性診斷檢查，對既往有明確結核病史，新發骨關節疾病病灶，臨床中要慎重考慮，需要結合臨床其他表現做出正確診斷，注意既往結核病與新發腫瘤鑒別，特別是老年患者。

參考文獻:

［1］劉純成，劉林飛，李桂珍，等．T-SPOT．TB在結核感染診斷中的應用研究［J］．中國衛生檢驗雜志，2015，8 (25) :．2644－2646．

［2］WHO．Global Tuberculosis Control Surveillance，Plann ing，Financing［C］．Geneva: WHO，2007．

［3］李寶田，焦云龍，孫文星．T-SPOT．TB檢測在脊柱結核診斷中的應用［J］．中國骨科臨床與基礎研究雜志，2015，4(7) : 74－78．

［4］劉國威，梅早仙．γ-干擾素釋放試驗在肺外結核病診斷中的臨床意義［J］．吉林醫學，2012，4(33) :2056－2058．

［5］LeeJY，ChoiHJ，ParkIn，et al．Comparison of two commercial interferon-gamma assays for diagnosing Mycobacterium tuberculosis infection［J］．Eur Respir J，2006，28(1) :24－31．

［6］成詩明，杜聽，徐敏．1992－2004年全國兒童新發現的痰涂片陽性肺結核監測與分析［J］．中華兒科雜志，2009，52(4) : 257－261．

［7］童學成，陳國春，濮翔科，等．結核感染T細胞斑點試驗對艾滋病合并肺結核的臨床診斷價值［J］．中華醫院感染學雜志，2014，24(14) : 3632－3634．

Value of T-SPOT in Differential Diagnosis on Osteoarticular TB

MIAO Rui-rui1，2，ZHANG Wen-long2，BAO Yu-cheng2，QIU Nan-hai2，GAO Wei2
(1．Tianjin university of Traditional Chinese Medicine; 2．Tianjin Haihe Hospital，Tianjin 300350)

Abstract:Objective: To discuss the value of T-SPOT in differential diagnosis on osteoarticular TB．Method: The sensitivity，specificity，false positive rate and false negative rate of T-SPOT in TB was got By collecting and analysing cases of patients admitted in our hospital with bone destruction due to tuberculosis and non-tuberculosis during March 2012 June 2015．The pertinent above indications of TB-Ab were recorded for comparison．Results: In whole cases，the sensitivity of T-SPOT-TB test was 91．36%，with the specificity rate of 100%．The pertinent statistic results showed the superiority of T-SPOT-TB test to TB-Ab(P＜0．05)．Conclusion: Of the high diagnosis specificity，T-SPOT TB test is meaningful in diagnosis of osteoarticular TB，which can be regarded as a reliable means of inspection．For its expensive spending，it is recommended in the differential diagnosis of difficult cases other than as a routine inspection．

Key words:T-SPOT-TB; bone tuberculosis; differential diagnosis

(收稿日期:2015－11－22 ) (責任編輯:敖慧斌)

*通訊作者:張文龍，男，主任醫師，碩士研究生導師。E-mail: 18920180058@189．cn

DOI:10．3969/j．issn．1001－5779．2016．01．022

中圖分類號:R529．2

文獻標志碼:A

文章編號:1001－5779(2016) 01－0076－03