胃癌組織中CTHRC1的表達與淋巴道轉移

王鴻垚，譚小平

(長江大學第一臨床醫學院 荊州市第一人民醫院消化內科，湖北 荊州 434000)

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胃癌組織中CTHRC1的表達與淋巴道轉移

王鴻垚，譚小平

(長江大學第一臨床醫學院 荊州市第一人民醫院消化內科，湖北 荊州 434000)

[摘要]目的: 觀察三螺旋重復膠原蛋白1(CTHRC1)在胃癌組織中的表達及其與淋巴道轉移關系，為臨床判斷胃癌的侵襲性、轉移潛能及估計預后提供及時合理的參考指標。方法：應用免疫組化的方法，分別檢測胃癌伴淋巴轉移、胃癌無淋巴轉移的組織中CTHRC1的表達水平。結果：胃癌組織中CTHRC1蛋白在有淋巴轉移的胃癌組織中的表達強度明顯高于無淋巴轉移的患者(P<0.05)。結論：CTHRC1在胃癌淋巴轉移中的高表達，提示CTHRC1可能在胃癌的發生、發展和淋巴轉移中發揮了一定的作用。

[關鍵詞]三螺旋重復膠原蛋白1(CTHRC1)；胃癌； 免疫組化；淋巴道轉移

胃癌由于其腫瘤轉移復雜性、多步驟性、多階段性的特點，使之成為死亡率較高的病癥。并且呈現出逐年增加，患者年齡逐步年輕化的趨勢。近年來，隨著外科技術和影像技術的發展，聯合放療、化療和免疫治療的進步，胃癌的治療取得了很大的進展，患者存活率有所提高，但是目前的治療手段還不能從根本上解決胃癌的化療耐藥和轉移問題，因此早期診斷胃癌是目前研究重點。三螺旋重復膠原蛋白1(collagen triple helic repeat containing 1，CTHRC1)是一種分泌性糖蛋白，在胰腺癌、食管癌、乳腺癌等多種實體腫瘤中過度表達[1,2]。本研究主要探討CTHRC1在胃癌淋巴道轉移組織中的表達及其臨床意義。

1對象與方法

1.1對象

選取2013年10月至2015年12月在長江大學第一臨床醫學院確診為胃癌的組織蠟塊80例，其中合并淋巴道轉移的胃癌組織蠟塊標本58例，無淋巴道轉移轉移發生的胃癌組織蠟塊標本22例。免疫組化方法檢測CTHRC1在胃癌組織中的表達。

1.2主要試劑

多聚賴氨酸、二甲苯、無水乙醇、蘇木素染色液、伊紅染色液、鹽酸乙醇溶液、碳酸鋰溶液、中性樹膠、0.01M檸檬酸鹽緩沖液(pH6.0)、0.01M Tris鹽酸緩沖液(pH10.0)、磷酸鹽緩沖液PBS、H2O2(均為國產試劑)。免疫組化檢測所用試劑：①兔抗人CTHRC1多克隆抗體濃縮液；②免超敏二步法進行免疫組化檢測試劑盒；③DAB試劑盒；④PV-9000染色試劑盒。

1.3方法

免疫組化實驗采用SP法，石蠟切片脫蠟和烘烤后，用高溫高壓抗原修復，用 PBS(pH7.4～7.6)進行洗滌，沖洗3次，每次5min。 每張切片放入3%雙氧水中20min， PBS沖洗3次，每次3min。去PBS液，將兔抗人CTHRC1多克隆抗體濃縮液進行稀釋(1∶50)，每張切片加1滴，室溫下維持2h，再次用PBS 沖洗3次，每次3min。去除PBS液，每張切片滴加辣根酶標記抗兔二抗，37℃保持30min。PBS沖洗3次，每次3min。去除 PBS液，每張切片加新鮮配制的 DAB溶液50ul，靜置幾分鐘，等待顯色后，用蒸餾水沖洗。用蘇木素復染，PBS 或自來水沖洗返藍，經過1%鹽酸酒精脫水干燥，樹膠封片，切片進行鏡檢。

2結果

CTHRC1蛋白在有淋巴結轉移的胃癌組織中的表達明顯要高于無淋巴結轉移者，存在統計學差異(P<0.05)。研究還發現CTHRC1蛋白的表達強度與胃癌浸潤深度的關系呈正相關，其表達明顯較未侵及漿膜組胃癌的表達要高，存在統計學差異(P<0.05)。CTHRC1蛋白在胃癌組織中的表達與患者性別、年齡、腫瘤大小無明顯關系(P>0.05)。見表1。

表1　CTHRC1蛋白的表達與胃癌患者臨床特征的關系

3討論

CTHRC1基因在染色體中的位置為8q22.3段，主要分布于細胞間隙[1]，包含4個外顯子和4個內含子，共計為11435個堿基。CTHRC1可形成膠原蛋白的和重建血管內皮等作用。近年來的研究發現CTHRC1在多種實體腫瘤中過度表達，并與腫瘤的增殖、侵襲及轉移密切相關。有學者[1]在檢測40例胰腺患者癌組織與癌旁組織中CTHRC1的表達中發現，胰腺癌組織CTHRC1 mRNA表達水平明顯高于癌旁組織(P<0.05)。劉偉等[2]學者針對46例成人的食管中患有鱗癌的組織進行分析，與之形成對比的是10例成人的正常食管組織。通過對這些組織細胞進行試驗分析，發現在癌癥患者的食道鱗細胞膜及細胞體中均有CTHRC1過度表達。有學者[3]通過免疫組化分析研究胃癌組織與正常胃組織中CTHRC1的表達時發現，胃癌組織中CTHRC1呈過度表達，差異有統計學意義(P<0.05)。本研究與之一致，胃癌組織中CTHRC1呈高表達，說明CTHRC1可作為胃癌的診斷標志物之一。

在對乳腺癌的研究中，研究者發現CTHRC1主要存在于乳腺癌細胞的胞質當中。CTHRC1在乳腺癌的癌組織中的表達量明顯高于正常組織，并且在浸潤性乳腺小葉癌的表達量高于浸潤型乳腺導管癌[4]。值得指出的是，在乳腺癌中，CTHRC1的高表達同乳腺癌骨轉移相關。在對結直腸癌的研究中，學者發現有腹膜轉移的結直腸癌組CTHRC1表達顯著高于不伴有腹膜轉移組，認為CTHRC1的高表達與結直腸癌腹膜轉移有關[5]。并且與患者預后較差密切相關。還有學者[6]發現CTHRC1在食管鱗癌組織中存在過度表達，但在癌旁鱗狀上皮組織中基本不表達。CTHRC1表達與食管鱗癌TNM分期、浸潤深度和淋巴結轉移呈正相關，因此，認為CTHRC1在惡性腫瘤包括食管癌中具有促腫瘤增殖的功能。本研究顯示在58例有淋巴結轉移的表達較高，與其相對應的22例無淋巴結轉移的組織中也均有一定程度的表達，但與無淋巴結轉移組相比，差異具有統計學意義(P<0.01)。本觀察結果表明在胃癌組織中CTHRC1存在過度表達的現象，通過淋巴道來促進胃癌的遷移的分子學機制可能與CTHRC1過度表達相關。

[參考文獻]

[1]孟犁南.CTHRC1在胰腺癌中的表達及其意義[J].中國普通外科雜志, 2015, 24(11):1587～1591.

[2] 劉偉, 施瑞華, 朱宏,等.ITGA6、CTHRC1在食管鱗癌中的表達及臨床意義[J].南京醫科大學學報(自然科學版), 2009，29(4):508～511.

[3] Lina G, Lei L, Li l Z, et al.Cthrc1 overexpression is an independent prognostic marker in gastric cancer[J].Human Pathology,2014, 45(5):1031～1038.

[4] Gvantsa K, Magdalena C, Katerina B, et al.Collagen triple helix repeat containing 1 protein, periostin and versican in primary and metastatic breast cancer: an immunohistochemical study[J].Journal of Clinical Pathology,2011, 64(11):977～982.

[5] Tan F, Liu F, Liu H, et al.CTHRC1 is associated with peritoneal carcinomatosis in colorectal cancer: a new predictor for prognosis[J].Medical Oncology,2013,30(1):1～7.

[6] 王輝, 許青.CTHRC1在食管鱗癌中的表達及其臨床意義[J].臨床腫瘤學雜志, 2015，20(6):531～534.

[編輯]一凡

26 An Observation of Curative Effects of 14 Cases of Calcaneal Fracture Involving Talocalcaneal Joints

Long Qing

(HealthCenterofGuanyinTown，Jingzhou434000,China)

Abstract：Objective：To assess the curative effects of operative treatment for calcaneal fractures involving talocalcaneal joints Methods：Open reduction and internal fixation with restoration reconstruction plates from the outside of calcaneus had been adopted for 14 cases with calcaneal fractures of 16 feet involving talocalcaneal joints. The mean time of follow-up was 14 months. The curative effects had been assessed according to the sense, the shape of foot heels, and the activity of ankle joints and the X-ray manifestation of follow-up.Results：The excellent rate was 87.5%. Conclusion：Open reduction and internal fixation can achieve better curative effects on calcaneal fractures involving talocalcaneal joints.

Key words：calcaneal fractures; talocalcaneal joints ; internal fixation; reconstruction plate

[中圖分類號]R735.2

[文獻標志碼]A

[文章編號]1673-1409(2016)12-0016-02

[作者簡介]王鴻垚(1990-)，女，碩士生，主要從事消化系統疾病研究工作；通信作者：譚小平，79867330@qq.com。

[收稿日期]2016-03-16

[引著格式]王鴻垚，譚小平.胃癌組織中CTHRC1的表達與淋巴道轉移[J].長江大學學報(自科版)，2016，13(12)：16～17，27.