膀胱癌組織中c—Met的表達(dá)及意義

鄒偉++張譯尹

【摘要】 目的 探討膀胱癌組織中c-Met的表達(dá)及意義。方法 選取60例膀胱癌組織病理標(biāo)本（觀察組）與60例正常膀胱組織病理標(biāo)本（對(duì)照組）， 均進(jìn)行c-Met表達(dá)的免疫組化實(shí)驗(yàn)分析。結(jié)果 c-Met在觀察組中的陽性表達(dá)率為60.0%（36/60）， 明顯高于對(duì)照組的6.7%（4/60）（P<0.05）。在60例膀胱癌組織中， c-Met在不同病理分級(jí)、臨床分期與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中的陽性表達(dá)率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 c-Met在膀胱癌中呈現(xiàn)高表達(dá)狀況， 能反映膀胱癌組織的病理分級(jí)、臨床分期與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況， 具有很好的分析價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】 c-Met；膀胱癌；免疫組化；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；臨床分期

【Abstract】 Objective To investigate expression and significance of c-Met in bladder cancer tissue. Methods There were 60 pathological samples of bladder cancer tissue （observation group） and 60 samples of normal bladder tissue （control group）. Immunohistochemistry analysis was made on all c-Met expression. Results The positive expression rate of c-Met was much higher in the observation group as 60.0% （36/60） than the control group as 6.7% （4/60） （P<0.05）. Among the 60 bladder cancer tissue cases， positive expression rates in different pathological grades， clinical stages， and lymphatic metastasis tissues had statistical significance （P<0.05）. Conclusion High expression of c-Met in bladder cancer can reveal pathological grades， clinical stages， and lymphatic metastasis tissues condition. It contains high value for analysis.

【Key words】 c-Met； Bladder cancer； Immunohistochemistry； Lymphatic metastasis； Clinical stages

膀胱癌是當(dāng)前常見的惡性腫瘤， 嚴(yán)重威脅著人類的健康， 現(xiàn)代研究表明膀胱癌的發(fā)生和進(jìn)展與基因的表達(dá)差異有關(guān)[1]。c-Met是編碼肝細(xì)胞生長因子的酪氨酸激酶受體蛋白的基因， 即與酪氨酸激酶受體（RTK）相關(guān)的原癌基因。本文具體探討了膀胱癌組織中c-Met的表達(dá)及意義， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇本院2010年5月～2014年5月病理科收集與保存的60例膀胱癌組織病理標(biāo)本（觀察組）與60例正常膀胱組織病理標(biāo)本（對(duì)照組）。納入標(biāo)準(zhǔn)：病程<3年；均未接受放療、化療；年齡≥18周歲；醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。對(duì)照組中男33例， 女27例；年齡最小19歲， 最大79歲， 平均年齡（53.13±8.62）歲。觀察組中男34例， 女26例；年齡最小19歲， 最大78歲， 平均年齡（53.66±8.11）歲。病理分級(jí)根據(jù)2004年世界衛(wèi)生組織的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)， 低級(jí)別42例， 高級(jí)別18例；臨床分期根據(jù)國際抗癌協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)， T1～2期49例， T3～4期11例；區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：N0（無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移）45例， N1（單個(gè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移， 最大直徑≤2 cm）10例， N2（單個(gè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移， 2 cm<最大直徑≤5 cm或者多個(gè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移， 無一最大直徑>5 cm）5例。兩組患者性別、年齡等一般資料比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 免疫組化方法 采用c-Met蛋白兔抗人單克隆抗體工作液（北京中杉生物工程有限公司）， 實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格按試劑說明書進(jìn)行（SP-9001免疫組化檢測(cè)試劑盒）。兩組的標(biāo)本經(jīng)10%福爾馬林固定， 常規(guī)進(jìn)行石蠟包埋， 然后石蠟塊進(jìn)行4 μm連續(xù)切片， 消除內(nèi)源性過氧化物酶活性， 應(yīng)用高壓鍋抗原修復(fù)， 然后加入c-Met蛋白單克隆抗體的一抗， 4℃放置于室溫約30 min， PBS液連續(xù)洗滌3次；滴加二抗， 37℃放置10 min， PBS液再次洗滌3次。DAB顯色3～5 min， 蘇木素復(fù)染細(xì)胞核， 封片觀察。

1. 3 判定標(biāo)準(zhǔn) c-Met蛋白陽性標(biāo)注主要在腫瘤細(xì)胞膜和細(xì)胞漿內(nèi)呈現(xiàn)棕黃色或者棕褐色顆粒， 陽性細(xì)胞數(shù)>20%為陽性表達(dá)。實(shí)驗(yàn)同時(shí)設(shè)陽性對(duì)照和陰性對(duì)照， 陰性對(duì)照選擇PBS代替一抗。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 c-Met陽性表達(dá)率比較 經(jīng)過判定， c-Met在觀察組中的陽性表達(dá)率為60.0%（36/60）， 明顯高于對(duì)照組的6.7%（4/60）， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2. 2 c-Met在膀胱癌中的表達(dá)與臨床病理特征的相關(guān)性 在60例膀胱癌組織中， c-Met在高級(jí)別的陽性表達(dá)率明顯高于低級(jí)別（P<0.05）；而在T3～4期的陽性表達(dá)率為81.8%， 明顯高于T1～2期的42.9%；而在5例N2淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中， 陽性表達(dá)率為76.5%（13/17）， 分別高于N0的20.0%與N1的50.0%， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

3 討論

膀胱癌是較為常見的惡性腫瘤之一， 膀胱癌腫瘤切除后容易復(fù)發(fā)， 而且15.0%左右有惡性程度增加的趨勢(shì)， 為此需要積極探索膀胱癌特異性的腫瘤標(biāo)志物及腫瘤發(fā)生發(fā)展的機(jī)制， 從而有效預(yù)防與防治膀胱癌。

人類的c-Met基因位于7號(hào)染色體上， c-Met基因編碼的蛋白是具有自身磷酸化活性的跨膜受體， 可以導(dǎo)致下游中間體和活化的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的自身磷酸化或磷酸化， 也可促進(jìn)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)， 導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞的遷移、上皮細(xì)胞分散和促進(jìn)趨化性， 為此可能參與腫瘤轉(zhuǎn)移[2]。

研究證實(shí)c-Met信號(hào)通路的高表達(dá)對(duì)與膀胱癌的發(fā)生和發(fā)展具有促進(jìn)作用并通過上皮表型的惡性轉(zhuǎn)化導(dǎo)致癌變[3]。有學(xué)者用免疫組化法在膀胱癌組織中發(fā)現(xiàn)c-Met在膀胱癌中呈過度表達(dá)， 該信號(hào)傳導(dǎo)通路主要以自分泌方式激活， 為此在膀胱癌的發(fā)生與發(fā)展中可能起著重要作用[4]。本研究顯示在60例膀胱癌組織中， c-Met在不同病理分級(jí)、臨床分期與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織中的陽性表達(dá)率比較， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）， 表明膀胱癌臨床分期越晚， 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移越嚴(yán)重， c-Met的表達(dá)異常越明顯。

綜上所述， c-Met在膀胱癌中呈現(xiàn)高表達(dá)狀況， 能反應(yīng)膀胱癌組織的病理分級(jí)、臨床分期與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況， 具有很好的分析價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1]王璠.基因表達(dá)影響膀胱腫瘤發(fā)生和演進(jìn)的機(jī)制及其診斷和判斷預(yù)后的價(jià)值.現(xiàn)代泌尿外科雜志， 2005， 10（4）：246-248.

[2]劉志華， 葉云林， 卞軍， 等.負(fù)性共刺激分子PD-L1在非肌層浸潤性膀胱癌的表達(dá)及其對(duì)術(shù)后膀胱灌注治療的影響.中山大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)科學(xué)版）， 2015， 36（2）：221-226.

[3]龍俊任， 董自強(qiáng)， 熊飛， 等.膀胱癌組織中MACC1、c-Met表達(dá)變化及意義.山東醫(yī)藥， 2012， 52（18）：74-75.

[4]金鵬飛， 譚操， 毛平花， 等. PTEN蛋白在膀胱移行細(xì)胞腫瘤中的表達(dá)及臨床意義.浙江臨床醫(yī)學(xué)， 2015， 17（1）：12-13.

[收稿日期：2016-01-14]