邁瑞BC5390血液分析儀實驗室性能驗證

韋永瓊，沈　偉，劉成桂，曹登成，楊　煉

(成都市婦女兒童中心醫院檢驗科，四川成都 610031)

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·論著·

邁瑞BC5390血液分析儀實驗室性能驗證

韋永瓊，沈偉，劉成桂，曹登成，楊煉

(成都市婦女兒童中心醫院檢驗科，四川成都 610031)

摘要:目的對邁瑞BC5390血液分析儀的主要性能進行實驗室驗證。方法依據美國臨床和實驗室標準化協會(CLSI)系列文件和相關文獻，結合該實驗室實際工作，對邁瑞BC5390(編號SM-45000421)的精密度、準確度、線性、臨床可報告范圍及攜帶污染率進行測定。結果邁瑞BC5390的本底計數均達到廠商設計規定的要求，檢測WBC、RBC、PLT、Hb、HCT、MCV 6項精密度、準確度、線性范圍良好，攜帶污染率低。白細胞分類與人工鏡檢分類相比，除嗜堿性粒細胞外，均有良好的相關性(r2>0.95)。結論邁瑞BC5390全自動血細胞分析儀的各項性能良好，精密度及準確度高，線性范圍寬，攜帶污染率低，能較好地滿足臨床血液常規檢查的要求。

關鍵詞:血液分析儀；性能驗證；精密度；準確度

全自動血細胞分析儀因其用血量少、結果準確度高及可報告參數多、同時操作簡便易于標準化，因而極大地提高了血細胞檢測的效率與質量，現已基本取代手工顯微鏡檢查(形態學檢驗除外)。邁瑞BC5390是一款具有雙通道白細胞五分類及異常細胞篩選功能的全自動血細胞分析儀，可用靜脈全血、微量全血、預稀釋血三種模式進行檢測，因其末梢血模式用血量少，僅需20 μL，現已成為目前婦女兒童醫院檢驗科不可缺少的儀器。但若未按標準對儀器進行性能評價，不了解其具體性能就盲目應用，檢測結果的誤差將大大超過手工操作，而檢驗結果準確性的高低直接影響到醫生對患者病情的判斷及疾病的診療，因此實驗室對新安裝的儀器必須進行性能驗證，以保證檢驗結果準確、可靠。為了解本科室2014年8月新投入使用的邁瑞BC5390全血細胞分析儀的性能，本文參考美國臨床和實驗室標準化協會(CLSI)系列文件及相關文獻對其精密度、準確度、線性、攜帶污染及白細胞分類相關性進行測定[1-2]，以驗證新儀器BC5390的性能指標是否滿足實驗室需要。

1資料與方法

1.1標本來源批間精密度的評價采用高、低2個濃度水平的全血室內質控品作為檢測標本；批內精密度、線性及攜帶污染率的評價使用2014年7～8月本院門診及住院患者的EDTA-K2抗凝新鮮全血作為檢測標本。

1.2儀器與試劑邁瑞BC5390全自動血細胞分析儀和相關配套試劑、校準品、質控品；日本奧林巴斯顯微鏡；珠海瑞氏-吉姆薩染液[3]。

1.3方法

1.3.1BC5390本底(空白)檢測用儀器配套稀釋液作為標本，在儀器選定的檢測模式下計數，測得結果為該種檢測模式當前狀態下的空白計數結果。本底計數要求在廠家標示的范圍內，若開機本底未達到要求者，不能做余下相關試驗，必須經廠家售后服務工程師檢修合格后再次測試。

1.3.2精密度分析根據EP15-A文件[4]，對BC5390進行精密度評價。批間精密度：取高、低兩個水平質控品，每天測定2次，每次檢測之間相隔2 h，連續測定10 d，一共收集20個數據，計算變異系數(CV)，標準差(s)。批內精密度：取高、中、低3個水平的新鮮全血，連續重復測定20次，計算CV，s；將實驗所得的CV值與衛生部臨檢中心所要求的進行比較，若小于臨檢中心所要求的，說明該儀器的精密度指標符合要求。

1.3.3準確度分析參照CLSI的EP9-A2[5-7]文件以及國家食品藥品監督管理局體外診斷試劑分析性能評估系列指導原則，采用對比試驗進行準確度的驗證。每天準備8份新鮮全血樣本，濃度覆蓋生物參考區間，分別在BC5390和基準儀器BC6900(SPA46151115)上進行測定，共5 d，收集40個數據進行分析。計算比對儀器和基準儀器之間的直線回歸、相關系數(r)及相對偏差。判斷標準為兩儀器間r2>0.95及偏差在規定范圍內為合格，即WBC：≤5%，RBC：≤2%，血紅蛋白(Hb)：≤2%，平均紅細胞體積(MCV)：≤3%，血小板(PLT)：≤5%，血細胞比容(HCT)：≤2%。

1.3.4線性范圍驗證參照EP6-A2[8]文件，選取接近預期上限的高值全血標本(H)1份，分別按100%、80%、60%、40%、20%的比例進行稀釋，每個稀釋度重復測定2次，計算的均值作為實測值。將實測值與理論值進行比較，并計算直線回歸方程Y=bX+a和r，驗證線性范圍。判斷標準：r≥0.975，b值在1±0.05范圍內為合格。臨床可報告范圍：要求偏差在1/3CLIA′88之內的最大稀釋度，為本室可接受的最大稀釋度，臨床可報告范圍=最大稀釋倍數×線性范圍上限，偏差值=(Y實測值-X理論值)/X理論值。

1.3.5攜帶污染率測定取高濃度全血標本，連續測定3次，測定值分別為H1、H2、H3；再取低濃度全血標本，連續測定3次，測定值分別為L1、L2、L3。按公式計算攜帶污染率。攜帶污染率=(L1-L3)/(H3-L3)×100%。攜帶污染率值小于1.0%為合格。

1.3.6生物參考區間驗證收集20份健康男性和20份健康女性新鮮EDTA-K2抗凝全血標本，連續上機檢測，對現有的生物參考區間進行驗證。驗證所有提供參考范圍的報告參數(如有性別或年齡劃分，則按要求填入)。

1.3.7白細胞五分類的驗證取20份非血液科非腫瘤科住院患者的EDTA-K2抗凝血，每份標本重復測定2次，取五分類均值。同時每份標本制備血片2張，分別由2位具備資格的檢驗人員在油鏡下選擇體尾交界處，分類計數200個白細胞，共400個，取均值與BC5390儀器五分類均值結果進行相關性分析[9]。

1.3.8質量控制驗證前使用配套校準液、質控品對儀器進行校準以及室內質控檢測，確保儀器狀態良好。

1.4統計學處理采用Excel 2003軟件進行數據分析，對各指標的檢測結果分別計算算術平均值、s及相對偏差，可比性和線性驗證計算回歸方程Y=bX+a和r。

2結果

2.1BC5390本底檢測BC5390本底檢測結果顯示每次本底計數均在廠家標示的范圍內。

2.2精密度驗證WBC、RBC、PLT、Hb、HCT、MCV的批間、批內精密度驗證結果均低于判定標準，見表1，滿足衛生部臨檢中心的要求。

表1　　邁瑞BC5390全血細胞分析儀精密度驗證結果

表2　　邁瑞BC5390全血細胞分析儀的準確度驗證

2.3準確度驗證通過對比試驗，邁瑞BC5390與參比儀器進行相關性分析，兩臺儀器r2>0.95以及誤差均在允許范圍內，儀器BC5390的準確度指標符合標準。見表2。

2.4線性驗證WBC、RBC、Hb、HCT和PLT線性方程及線性范圍見表3，各檢測項目的線性驗證結果均符合合格的判定標準。

表3　　邁瑞BC5390全血細胞分析儀線性驗證結果

2.5攜帶污染率邁瑞BC5390全血細胞分析儀測定WBC、RBC、Hb、HCT和PLT的攜帶污染率均遠低于判定標準的1%，滿足臨檢中心的要求，見表4。

表4　　邁瑞BC5390全血細胞分析儀攜帶污率的計算

2.6生物參考區間驗證檢測男、女各20例健康志愿者全血標本，5項指標檢測結果均至少有95%的檢測值分布在實驗室使用的生物參考區間范圍內。

2.6白細胞五分類驗證將20例非血液科患者的血細胞分析儀五分類百分比結果與手工顯微鏡分類結果進行比對分析，計算出回歸方程和r，結果中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞的r分別為0.980、0.990、0.983、0.976、0.386，表明除嗜堿性粒細胞百分比外均有良好的相關性(r>0.975)。

3討論

邁瑞BC5390是一款具有雙通道白細胞五分類及異常細胞篩選功能的全自動血細胞分析儀，有多種不同的操作模式及多種項目組合檢測，能滿足不同的檢測需求，儀器在不同模式下使用一根進樣針檢測，減少了因不同進樣針而造成的結果差異。該儀器可對靜脈血、末梢血進行定量分析，手動模式中還有標本足量時的封閉模式及量少時的開蓋模式。因其開蓋模式用血量少，僅需20 μL，已成為目前許多臨床實驗室特別是兒童醫院檢驗科不可缺少的儀器。任何全自動分析儀在使用時都首先要保證該儀器的系統誤差在臨床可接受范圍內，因此要求儀器在新安裝和投入臨床使用前，要顯示有能力達到所需的性能且還須滿足與檢測相關的規格[7,10]。美國頒布的“臨床實驗室修正法規的最終法規”也明確要求：每個實驗室在引入未作修改的、FDA認可或批準的檢測系統時，在向臨床報告患者檢驗報告前必須作性能指標的驗證[9]。故本文對本院臨床實驗室新投入使用的邁瑞BC5390(編號SM-45000421)全血細胞分析儀實驗室性能進行驗證。

檢測系統性能驗證是臨床實驗室質量管理的重要內容，系統性能良好是保證患者檢驗報告準確、可靠的前提。其最主要的性能包括精密度、準確度、線性及攜帶污染率等。精密度是檢測儀器在校準狀態下，對同一份標本檢測結果一致性的能力，良好的精密度是驗證其他各項指標的基礎[11]，衛生部臨檢中心要求批內和批間精密度應分別小于1/4和1/3CLIA′88允許范圍。本研究中，邁瑞BC5390全自動血細胞分析儀批內、批間精密度CV%均小于判定標準，表明本儀器重復性良好，滿足臨床和患者的要求。通過與基準儀器的比對結果表，BC5390儀器準確度指標符合要求，結果穩定可靠，其檢測出來的數據可信性高，可以放心出具報告。線性范圍的驗證是確定臨床可報告范圍的基礎，當儀器檢測結果超出線性范圍時，該結果應視為不準確的測定值。本文表3中斜率b在1±0.05之內，r2均不低于0.95，檢測濃度與稀釋倍數呈線性相關線性，表明儀器檢測的線性范圍很寬，儀器對于臨床標本的可報告范圍上限較高，完全能滿足臨床上不同標本的準確定量分析。攜帶污染率是體現檢測標本之間相互污染的程度，是判定高濃度標本是否影響低濃度標本測定結果的指標，其大小應符合儀器制造商的要求。表4結果顯示，儀器BC5390攜帶污染率均遠遠小于標準要求的1%，表明沖洗功能良好，不同標本間的交叉污染小，對于結果的可信性也有很大的提高。

在白細胞五分類驗證中，與顯微鏡手工分類相比，除嗜堿性粒細胞外，均有良好的相關性(r2>0.95)。嗜堿性粒細胞相關性不好，可能是由于嗜堿性粒細胞數量少，在血液中的絕對值相對低以及在血片中分布不均，數據變異較大所致，這也是目前全血細胞分析儀普遍存在的一個問題。面對這個問題，要求檢驗人員在日常工作中，應根據相應的復檢標準并結合本實驗室的實際工作，制訂完善的復檢規則，嚴格按照要求，做好人工顯微鏡復檢的工作[12]，可做到基本不影響臨床醫師對檢測結果的正常分析。

綜上所述，邁瑞BC539全自動血細胞儀準確度及精密度良好，攜帶污染率低，線性范圍覆蓋臨床可能遇到的水平，是一臺性能良好的血細胞分析儀，可用于檢驗科的日常工作，基本能滿足臨床患者血液標本分析的需要。但儀器五分類結果需根據儀器散點圖及報警提示，必要時進行顯微鏡復檢后發出報告。

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Evaluation verification of Mindary BC5390 hematology analyzer

WeiYongqiong，ShenWei，LiuChenggui，CaoDengcheng，YangLian

(DepartmentofClinicalLaboratory,ChengduWomen′sandChildren′sCentralHospital,Chengdu,Sichuan610031,China)

Abstract:ObjectiveTo evaluate the performance verification of Mindary BC5390 hematology analyzer.MethodsAccording to requirement of CLSI documents,the precision,accuracy,linearity,carryover were evaluated.ResultsThe background counts all met the designed requirements of manufacturer.Precision,accuracy,linearity of the WBC,RBC,PLT,Hb,HCT,MCV were good and the contamination carrying rates were low.Except for basophils,the classification of leukocyte was well correlated with the artificial microscopy classification(r2>0.95).ConclusionThe BC5390 is a ideal automated hematology analyzer which has high precision and accuracy,wide linearity，low contamination carrying rate，and it can be used for the blood samples analysis.

Key words:hematology analyzer；performance qualification；precision；accuracy

(收稿日期：2015-11-06)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.08.013

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)08-1046-03

作者簡介：韋永瓊，女，檢驗技師，主要從事臨床血液學與檢驗的研究。