不同產地八月瓜總黃酮的含量比較

李曉艷 劉杰 劉義偉 嚴銳 許義紅 李香

【摘要】目的：紫外分光光度法測定不同產地八月瓜中總黃酮的含量。方法：以70%乙醇、80℃水浴回流1h，料液比1∶25，測定波長510nm。結果：總黃酮回歸方程為C=9.452×10-2A-4.362×10-3（R=0.9992），在0.0154～0.0769mg范圍內有良好的線性關系，平均加樣回收率為98.90%（RSD為1.91%）。結論：不同產地八月瓜總黃酮含量存在一定差異。

【關鍵詞】八月瓜；不同產地；總黃酮；紫外分光光度法

【中圖分類號】R284.1 【文獻標志碼】A 【文章編號】1007-8517（2016）07-0013-02

Abstract：Objective To establish a method of determining the total flavonoids content of Holboellia latifolia in different regions by Uv-spectrophotometry.Methods With 70% ethanol， water circumfluence for an hour in 80℃，ratio of solid to liquid 1∶25，and detection wavelength 510nm.Result The total flavonoids has a good linear relationship in 0.0154-0.0769mg.The regression equation is C=9.452×10-2A-4.362×10-3（R=0.9992）. And the average sample recovery rate is 98.90%（RSD=1.91%）.Conclusion The total flavonoids content of Holboellia latifolia has some differences in different regions.

Keywords：Holboellia latifolia；different regions； total flavonoids；Uv- spectrophotometry

八月瓜為三葉木通Akebia trifoliate（Thunb.）Koidz的果實，具有消腫、鎮痛、通乳、抗癌的作用。其主要化學成分為齊墩果酸、黃酮、多糖等成分[1-2]。實驗采用紫外分光光度法測定5個不同產地八月瓜中總黃酮含量，為不同產地八月瓜的質量研究提供依據。

1 儀器與材料

1.1 儀器 紫外可見分光光度計（GBC cintra 20 澳大利亞）；WS205十萬分之一電子天平（瑞士梅特公司）；DZG-6000電熱恒溫鼓風干燥箱（上海森信實驗儀器有限公司）；HA-4恒溫水浴鍋（常州澳華儀器有限公司）；HS10260D超聲波清洗機。

1.2 材料 葡萄糖（批號：20141110，天津市科密歐化學試劑開發中心）；蘆丁對照品（批號：0080-9705，中國藥品生物制品檢定所）；所用試劑均為分析純。八月瓜藥材采于貴州云頂、大定、云霧、王司、都勻，由黔南民族醫學高等專科學校李香副教授鑒定為木通科木通屬落葉木質藤本植物Akebia trifoliate（Thunb.）Koidz的果實。

2 方法與結果

2.1 波長的確定 取蘆丁對照品及八月瓜樣品的鋁配合物測定液，以相應試劑為空白對照，在波長200～600nm掃描，掃描結果顯示兩者在510nm處有最大吸收，故實驗選取510nm作為測定波長。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱量蘆丁對照品25.64mg，置50ml容量瓶中，加入60%的乙醇定容至刻度，搖勻，即配制成濃度為0.5128mg/ml的對照品溶液。

2.3 供試液的制備[3] 稱取干燥至恒重、過四號篩的八月瓜藥材約0.1 g，加入2.5ml的70%的乙醇80℃回流1h。過濾，水浴濃縮揮干溶劑。加入60%乙醇微熱溶解轉移至25ml容量瓶中，定容至刻度即得供試液。取0.5ml的各樣品溶液至10ml的試管中，加入1ml的5%NaNO2溶液，搖勻，放置5min，加入1ml的10%Al（N03）3溶液，搖勻，放置5min，加入5ml的6%NaOH溶液，用60%乙醇定容至刻度，搖勻，放置5min，作為待測液。

2.4 方法學考察[4]

2.4.1 標準曲線的制備 精密吸取標準品母液0.3、0.5、0.7、0.9、1.1、1.3、1.5ml置10ml試管中。加5% NaNO21.0ml，搖勻放置5min；加10% Al（N03）3 1.0ml，搖勻放置5min；加6%NaOH溶液5.0ml，加60%乙醇至刻度，搖勻放置5min，得濃度為0.0154、0.0256、0.0359、0.0462、0.0564、0.0667、0.0769mg/ml的對照品溶液。以相應試劑作空白對照，于510nm處測定吸光值。得回歸方程為：C=9.452×10-2A-4.362×10-3（R=0.9992）（C為濃度，A為吸光度）其。表明吸光度與濃度在0.0154～0.0769mg范圍內有良好的線性關系。

2.4.2 精密度實驗精密 稱取八月瓜藥材粉末約0.1 g，按“2.3”項制備供試液及顯色。以相應試劑作空白對照，在510nm波長處測定吸光值，重復測定6次，記錄吸光值，總黃酮質量分數的RSD為0.71%。

2.4.3 穩定性實驗 精密稱取八月瓜粉末約0.1g，同“2.3”項操作，以相應試劑作空白對照，在510nm波長處測定吸光度，每0.5h測定一次吸光值，共測定7次。記錄吸光度，總黃酮質量分數的RSD為1.78%，表明在3h內樣品溶液基本無變化。

2.4.4 重復性實驗 按“2.3”項操作，制備供試液6份。進行顯色。以相應試劑作空白對照，于510nm處測定吸光值，記錄吸光度，總黃酮質量分數的RSD為1.54%，結果表明本方法重復性良好。

2.4.5 回收率實驗 精密稱取八月瓜粉末9份，每份約為0.1g，按80%、100%、120%比例量加入已配制好蘆丁對照品溶液。按“2.3”項制備供試液并顯色。以相應試劑作空白對照，于510nm處測定吸光值，記錄吸光度，平均回收率為98.90%，總黃酮質量分數的RSD為1.91%，表明試驗方法可行。見表1。

2.5 樣品含量測定 取5種不同產地八月瓜，每個產地采集不同3個區域，各1.0g，據“2.3”項制備供試液，測定吸光度，計算各產地總黃酮含量。結果見表2。

3 討論

八月瓜作為藥食兩用的一種野生中藥，具有抗菌、抗腫瘤作用，實驗以黃酮成分作為測定指標，采用分光光度法測定貴州不同產地八月瓜總黃酮含量，為八月瓜更好的開發研究提供一定依據。

實驗中，云頂與王司兩個產地的總黃酮含量相對高，不同產地的含量存在一定差異。

參考文獻

[1]劉桂艷，王曄.木通屬植物木通化學成分及藥理活性研究概況[J].中國藥學雜志，2004，39（5）：330-332.

[2]李金光，孿嘉瑞.三葉術通果實生物學特征盈營養成分的研究[J].廣西植物，1991，11（2）：189-192.

[3]李香，孫濟平，彭小冰.三葉木通中總黃酮的提取工藝研究[J].遼寧中醫藥大學學報，2008，10（12）：152-153.

[4]趙虹橋，唐克華.小血藤總黃酮的提取研究[J].食品科學，2007，27（7）：158-161.

（收稿日期：2016.01.22）